(发酵分析)脂肪的测定8

1、( (发酵分析发酵分析) )脂肪的测定脂肪的测定8 8（五）常用提取剂及其特点（五）常用提取剂及其特点（P64） 乙醚：乙醚：溶解能力强，沸点低（溶解能力强，沸点低（34.6），易燃，），易燃，可含约可含约2%的水分。因含水乙醚会同时抽出糖分等成的水分。因含水乙醚会同时抽出糖分等成分，所使用时，必须采用无水乙醚作提取剂，且待分，所使用时，必须采用无水乙醚作提取剂，且待测样品应无水分。测样品应无水分。乙醚不能溶解结合态脂肪。乙醚不能溶解结合态脂肪。 石油醚：石油醚：溶解能力比乙醚弱，沸程溶解能力比乙醚弱，沸程3545，无，无乙醚易燃，吸水比乙醚少，乙醚易燃，吸水比乙醚少，也不能提取结合态脂肪。也

2、不能提取结合态脂肪。 氯仿甲醇混合液：氯仿甲醇混合液：价格高、毒性强、对脂蛋白、价格高、毒性强、对脂蛋白、磷脂提取效率高。磷脂提取效率高。l常用的检验脂肪的方法有：索氏提取法，酸常用的检验脂肪的方法有：索氏提取法，酸水解法、罗紫一哥特里法（碱水解法）、巴水解法、罗紫一哥特里法（碱水解法）、巴布科克法、盖勃法、氯仿甲醇提取法等。布科克法、盖勃法、氯仿甲醇提取法等。l要求主要掌握要求主要掌握索氏提取法索氏提取法和和罗紫一哥特里法罗紫一哥特里法，其它方法要求有所了解，能区别不同方法的其它方法要求有所了解，能区别不同方法的特点。特点。1、原理 将经前处理而分散且干燥的样品用无水乙醚或石油醚等将经前处理

3、而分散且干燥的样品用无水乙醚或石油醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（或粗脂肪）。得到的残留物，即为脂肪（或粗脂肪）。 一般食品用有机溶剂浸提，挥干有机溶剂后得到的重量一般食品用有机溶剂浸提，挥干有机溶剂后得到的重量主要是游离脂肪，此外，还含有磷脂、色素、树脂、蜡状物、主要是游离脂肪，此外，还含有磷脂、色素、树脂、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以用挥发油、糖脂等物质，所以用l此法适用于脂类含量较高，结合态的脂类此法适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结块的含量较少，能烘干磨

4、细，不易吸湿结块的样品的测定。样品的测定。l索氏提取法测得的只是索氏提取法测得的只是游离态脂肪游离态脂肪，而结，而结合态脂肪测不出来。合态脂肪测不出来。 索氏提取器。 电热恒温水浴（5080）。 电热恒温烘箱（80120）。 滤纸筒的制备滤纸筒的制备 样品制备样品制备 索氏提取器的准备索氏提取器的准备 抽提抽提 回收溶剂回收溶剂5、测定过程、测定过程 将滤纸裁成将滤纸裁成8cm15cm大小，以直径大小，以直径位位2.0cm的大试管的大试管为模为模型，将滤纸紧靠试管壁卷型，将滤纸紧靠试管壁卷成圆筒型，把底端封口，成圆筒型，把底端封口，内放一小片脱脂棉，用白内放一小片脱脂棉，用白细线扎好细线扎好定

5、型，在定型，在1001050C烘箱中烘至恒烘箱中烘至恒量（准确至量（准确至0.0002g）。）。 滤纸筒的制备滤纸筒的制备l 样品制备样品制备 样品于样品于1001050C烘箱中烘干并磨碎，或用测定烘箱中烘干并磨碎，或用测定水分后的试样。准确称取水分后的试样。准确称取25g试样于滤纸筒内，封试样于滤纸筒内，封好上口。好上口。l索氏抽提取器的准备索氏抽提取器的准备 索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂瓶索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂瓶三部分所组成，抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净三部分所组成，抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥，提脂瓶需烘干并称至恒量并干燥，提脂瓶需烘干并称至恒量

6、。 将装有试样的滤纸筒放入带有虹吸管的提脂管将装有试样的滤纸筒放入带有虹吸管的提脂管中，倒入乙醚，满至使虹吸管发生虹吸作用，乙醚全中，倒入乙醚，满至使虹吸管发生虹吸作用，乙醚全部流入提脂瓶，再倒入乙醚，同样再虹吸一次。此部流入提脂瓶，再倒入乙醚，同样再虹吸一次。此时，提脂瓶中乙醚量约为烧瓶体积时，提脂瓶中乙醚量约为烧瓶体积2/3。接上回流冷。接上回流冷凝器，凝器，在恒温水浴中抽提，控制每分钟滴下乙醚在恒温水浴中抽提，控制每分钟滴下乙醚80滴滴左右（夏天约控制左右（夏天约控制650C，冬天约控制，冬天约控制800C），抽提），抽提34h至抽提完全（视含油量高低，或至抽提完全（视含油量高低，或81

7、2h，甚至，甚至（24h）。可用滤纸或毛玻璃检查，由提脂管下口滴下）。可用滤纸或毛玻璃检查，由提脂管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下痕迹。的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下痕迹。 抽提 取出滤纸筒，用抽提器回收乙醚，当乙醚在提脂管内将取出滤纸筒，用抽提器回收乙醚，当乙醚在提脂管内将虹吸时立即取下提脂管，将其下口放到盛乙醚的试剂瓶口，虹吸时立即取下提脂管，将其下口放到盛乙醚的试剂瓶口，使之倾斜，使液面超过虹吸管，乙醚即经虹吸管流入瓶内。使之倾斜，使液面超过虹吸管，乙醚即经虹吸管流入瓶内。按同法继续回收，将乙醚完全蒸按同法继续回收，将乙醚完全蒸出后，取下提脂烧瓶，于水出后，取下提

8、脂烧瓶，于水浴上蒸去残留乙醚。用纱布擦净烧瓶外部，于浴上蒸去残留乙醚。用纱布擦净烧瓶外部，于1001050C烘箱烘箱中烘至恒量并准确称量。或将滤纸筒中烘至恒量并准确称量。或将滤纸筒置于小烧杯内，挥干乙置于小烧杯内，挥干乙醚，在醚，在100 1050C烘箱中烘至恒量，滤纸筒及样品所减少的烘箱中烘至恒量，滤纸筒及样品所减少的质量即为脂肪质量。所用滤纸应事先用乙醚质量即为脂肪质量。所用滤纸应事先用乙醚浸泡挥干处理，浸泡挥干处理，滤纸筒应预先恒量。滤纸筒应预先恒量。l M2M1l 粗脂肪（%）= x 100 l M样 M样-试样质量，g;M1-提脂瓶质量，g;M2-提脂瓶与样品所含脂肪质量，g;或 粗

9、脂肪（%）=（抽提前滤纸筒质量-抽提后滤纸筒质量/样品质量）100l此法原则上应用于此法原则上应用于风干或经干燥处理风干或经干燥处理的试样，但某些湿的试样，但某些湿润、粘稠状态的食品，添加无水硫酸钠混合分散后也可设润、粘稠状态的食品，添加无水硫酸钠混合分散后也可设法使用索氏提取法。法使用索氏提取法。l乙醚回收后，烧瓶中稍残留乙醚，放入烘箱中有发生爆乙醚回收后，烧瓶中稍残留乙醚，放入烘箱中有发生爆炸的危险，故需在水浴上炸的危险，故需在水浴上彻底挥净彻底挥净，另外，使用乙醚时应，另外，使用乙醚时应注意室内通风换气。仪器周围注意室内通风换气。仪器周围不要有明火不要有明火，以防空气中有，以防空气中有机

10、溶剂蒸气着火或爆炸。机溶剂蒸气着火或爆炸。l 提取过程中若有溶剂蒸发损耗太多，可适当从冷凝器上提取过程中若有溶剂蒸发损耗太多，可适当从冷凝器上口小心加入（用漏斗）适量新溶剂补充。口小心加入（用漏斗）适量新溶剂补充。l 提取后烧瓶烘干称量过程中，反复加热会因脂类氧化而提取后烧瓶烘干称量过程中，反复加热会因脂类氧化而增量，故在恒量中若质量增加时，应以增量前的质量做为增量，故在恒量中若质量增加时，应以增量前的质量做为恒量。为避免脂肪氧化找成的误差，对富含脂肪的食品，恒量。为避免脂肪氧化找成的误差，对富含脂肪的食品，应在应在真空干燥箱中干燥真空干燥箱中干燥。7、说明 若样品分数多，可将索氏提取器串联起

11、来同时使用。所若样品分数多，可将索氏提取器串联起来同时使用。所用用乙醚应不含过氧化物、水分及醇类乙醚应不含过氧化物、水分及醇类。过氧化物的存在会促。过氧化物的存在会促使脂肪氧化而增量，且在烘烤提脂使脂肪氧化而增量，且在烘烤提脂瓶时残留过氧化物易发生瓶时残留过氧化物易发生爆炸事故。水分及醇类的存在会因糖及无机盐等物质的抽出爆炸事故。水分及醇类的存在会因糖及无机盐等物质的抽出而增量。而增量。 过氧化物检查方法：过氧化物检查方法：取乙醚取乙醚10ml加入加入100g/l碘化钾溶液碘化钾溶液2ml，用水振摇放置，用水振摇放置1min，若碘化钾层出现黄色证明有过氧，若碘化钾层出现黄色证明有过氧化物存在。

12、此乙醚需经处理后方可使用。化物存在。此乙醚需经处理后方可使用。 乙醚的处理：乙醚的处理：于乙醚中加入于乙醚中加入1/101/20体积的体积的200g/L硫代硫硫代硫酸钠溶液洗涤，再用水洗，然后加入少量无水氧化钙或无水酸钠溶液洗涤，再用水洗，然后加入少量无水氧化钙或无水硫酸钠脱水，于水浴上进行蒸馏。蒸馏时硫酸钠脱水，于水浴上进行蒸馏。蒸馏时，水浴温度一般调，水浴温度一般调至稍高于溶剂沸点，能达到烧瓶内沸腾即可。弃去最初及最至稍高于溶剂沸点，能达到烧瓶内沸腾即可。弃去最初及最后的后的1/10馏出液，收集中间馏出液备用馏出液，收集中间馏出液备用。*8、使用本法的问题、使用本法的问题 （1）适用哪些样

13、品的测定？）适用哪些样品的测定？ 待测样品必须干燥、粉碎，游离态脂肪含量较高。待测样品必须干燥、粉碎，游离态脂肪含量较高。 （2）待测样品预处理应注意哪些问题）待测样品预处理应注意哪些问题? 样品必须干燥无水，研细。样品必须干燥无水，研细。 要用滤纸筒包住，严密、防外漏，但又不能太紧。滤要用滤纸筒包住，严密、防外漏，但又不能太紧。滤纸筒高度不能超过回流吸管顶端。纸筒高度不能超过回流吸管顶端。 含糖较多时，应除糖。含糖较多时，应除糖。 （3）使用乙醚进行抽取应注意哪些问题？如何）使用乙醚进行抽取应注意哪些问题？如何处理？处理？ 使用的乙醚要求使用的乙醚要求无水、无乙醇无水、无乙醇，处理方法：，处

14、理方法：是：重新蒸馏并用无水是：重新蒸馏并用无水Na2SO4过滤。过滤。 要求要求无过氧过物无过氧过物，处理方法是：加，处理方法是：加Na2SO3或或FeSO4过滤，蒸馏。过滤，蒸馏。 注意防止中毒：在通风良好的地方或通风柜注意防止中毒：在通风良好的地方或通风柜中进行。中进行。 防止着火爆炸：加热时不能用明火电炉，应用防止着火爆炸：加热时不能用明火电炉，应用电热套或水浴；要烘样品前，一定要在水浴中充分电热套或水浴；要烘样品前，一定要在水浴中充分蒸干乙醚。蒸干乙醚。 （4）索氏提取器的安装应注意的问题。）索氏提取器的安装应注意的问题。 安装使用前，应清洗干净，并干燥。安装使用前，应清洗干净，并干

15、燥。 所用的铁架台要稳固，铁夹有保护胶。所用的铁架台要稳固，铁夹有保护胶。 各部件所在的平面应平行或垂直。各部件所在的平面应平行或垂直。 安装好的装置应整齐美观。安装好的装置应整齐美观。 （5）抽取后的粗脂肪在恒重干燥时发生氧化增重，）抽取后的粗脂肪在恒重干燥时发生氧化增重，如何确定恒重值？如何确定恒重值？ 重量增加时，以增重前的重量为恒重值。重量增加时，以增重前的重量为恒重值。l某些食品中，脂肪被包含在食品组织内部，或与食品成分结某些食品中，脂肪被包含在食品组织内部，或与食品成分结合而成合而成结合态脂类，结合态脂类，如，谷物等淀粉颗粒中的脂类，面条、焙如，谷物等淀粉颗粒中的脂类，面条、焙烤食

16、品等组织中包含的脂类，用索氏提取法不能完全提取出烤食品等组织中包含的脂类，用索氏提取法不能完全提取出来。这种情况下，必须要用强酸将淀粉来。这种情况下，必须要用强酸将淀粉、蛋白质、纤维素水、蛋白质、纤维素水解，使脂类游离出来，再用有机溶剂提取。解，使脂类游离出来，再用有机溶剂提取。l此法使用于各类食品总脂肪的测定此法使用于各类食品总脂肪的测定，特别对于易吸潮，结块，特别对于易吸潮，结块，难以干燥的食品应用本法测定效果较好，但此法不宜用高糖类食难以干燥的食品应用本法测定效果较好，但此法不宜用高糖类食品，因糖类食品遇强酸易炭化而影响测定效果。品，因糖类食品遇强酸易炭化而影响测定效果。l 应用此法，脂

17、类中的磷脂，在水解条件下将几乎完全分解为应用此法，脂类中的磷脂，在水解条件下将几乎完全分解为脂肪酸及碱，当用于测定含大量磷脂的食品时，测定值将偏低。脂肪酸及碱，当用于测定含大量磷脂的食品时，测定值将偏低。故对于含较多磷脂的蛋及其制品，鱼类及其制品，不适宜用此故对于含较多磷脂的蛋及其制品，鱼类及其制品，不适宜用此法。法。2、仪器、仪器 恒温水浴恒温水浴50800C。 100ml具塞量筒。具塞量筒。 电热恒温烘箱（电热恒温烘箱（80120）。）。1、原理、原理 酸分解法的原理是利用强酸在酸分解法的原理是利用强酸在加热的条件下将试样成分水解，使加热的条件下将试样成分水解，使结合或包藏在组织内的脂肪游

18、离出结合或包藏在组织内的脂肪游离出来，再用有机溶剂提取，经回收溶来，再用有机溶剂提取，经回收溶剂并干燥后，称量提取物质量即为剂并干燥后，称量提取物质量即为试样中所含脂类。试样中所含脂类。 乙醇（95%体积分数） 乙醚（不含过氧化物） 石油醚（30600C沸腾） 盐酸称重称重样品处理样品处理水解水解提取提取回收溶剂回收溶剂烘干烘干 准确称取固体样品准确称取固体样品2g于于50ml大试管中，加入大试管中，加入8mL水，用玻璃棒充分混合，加水，用玻璃棒充分混合，加10ml盐酸。或称取盐酸。或称取液体样品液体样品10g于于50mL大试管中，加大试管中，加10mL盐酸。混匀盐酸。混匀后于后于70800C

19、的水浴中，每隔的水浴中，每隔510min用玻璃棒搅拌用玻璃棒搅拌一次至脂肪游离为止，约须一次至脂肪游离为止，约须4050min，取出静置，取出静置，冷却。冷却。 水解 取出试管加入取出试管加入10mL乙醇，乙醇，混合。冷却后将混合混合。冷却后将混合物移入物移入100mL具塞筒中，用具塞筒中，用25mL乙醚乙醚分次冲洗试管分次冲洗试管洗液一并倒入具塞量筒内。加塞振摇洗液一并倒入具塞量筒内。加塞振摇1min,将塞子将塞子慢慢慢慢转动放出气体，再塞好，静置转动放出气体，再塞好，静置15min，小心开塞，用，小心开塞，用石石油醚油醚-乙醚等乙醚等量混合液量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置冲洗塞及筒口

20、附着的脂肪。静置1020min,待上部液体清晰，吸出上层清夜于已恒量的待上部液体清晰，吸出上层清夜于已恒量的锥形瓶内，再加入锥形瓶内，再加入5ml乙醚乙醚于具塞量筒内振摇，静置后于具塞量筒内振摇，静置后仍将上层乙醚吸出，放入仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶于水原锥形瓶内。将锥形瓶于水浴上蒸干，置浴上蒸干，置951050C烘箱中干燥烘箱中干燥2h，取出放干燥器取出放干燥器中冷却中冷却30min后称量后称量。 M M 总脂肪（总脂肪（%）= x 100 M 开始加入开始加入8mL水是为水是为防止后面加盐酸时干试样固化防止后面加盐酸时干试样固化，水，水解后加入解后加入乙醇可使蛋白质沉淀乙醇

21、可使蛋白质沉淀，降低表面张力，促进脂肪球聚，降低表面张力，促进脂肪球聚合，同时溶解一些碳水化合物如糖，有机酸等。后面用乙醚提合，同时溶解一些碳水化合物如糖，有机酸等。后面用乙醚提取脂肪时因乙醇可溶于乙醚取脂肪时因乙醇可溶于乙醚故需故需加入石油醚降低乙醇在醚中的加入石油醚降低乙醇在醚中的溶解度溶解度，使乙醇溶解物残留在水层，使乙醇溶解物残留在水层，使分层清晰使分层清晰。 挥干溶剂后残留物中若有黑色焦油状杂质，是分解物与水挥干溶剂后残留物中若有黑色焦油状杂质，是分解物与水一同混入所致，会使测定值增大造成误差，可用等量的乙醚及一同混入所致，会使测定值增大造成误差，可用等量的乙醚及石油醚溶解后，过滤，

22、再次进行挥干溶剂的操作石油醚溶解后，过滤，再次进行挥干溶剂的操作。 若无分解液等杂质混入，通常干燥若无分解液等杂质混入，通常干燥2h即可恒量即可恒量。 7、本法适用范围、本法适用范围 固体、半固体、粘稠液体或液体食品。固体、半固体、粘稠液体或液体食品。 不适合测定鱼类、贝类、蛋品等含磷脂不适合测定鱼类、贝类、蛋品等含磷脂较多的食品。较多的食品。 不适合高糖食品。不适合高糖食品。 此法为国际标准化组织（此法为国际标准化组织（ISO），联合国粮农组织），联合国粮农组织/世界世界卫生组织（卫生组织（FAO/WHO）等采用，为乳）等采用，为乳、炼乳、奶粉、炼乳、奶粉、奶油等脂类定量的国际标准法。奶油等

23、脂类定量的国际标准法。它适用于各种液状乳它适用于各种液状乳（生乳（生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等）、各种炼乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等）、各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋。除乳制品外，也适用于豆乳或加奶粉、奶油及冰淇淋。除乳制品外，也适用于豆乳或加工成乳状的食品。工成乳状的食品。 本法适用于能在碱性溶液中溶解或至少能形成均匀混本法适用于能在碱性溶液中溶解或至少能形成均匀混悬胶体的样品，是乳品脂肪测定公认的标准方法。悬胶体的样品，是乳品脂肪测定公认的标准方法。 乳是多种物质组成的混合物，它不是简单乳是多种物质组成的混合物，它不是简单的分散体系，而是具有胶体特性的多种分散的分散体系，而是具有胶

24、体特性的多种分散体系。故在乳脂类测定中，用有机溶剂体系。故在乳脂类测定中，用有机溶剂不能不能直接提取直接提取，而必须，而必须先行破坏胶体状态先行破坏胶体状态进而进而破破坏脂肪球膜坏脂肪球膜，使，使脂肪游离脂肪游离，再用有机溶剂进，再用有机溶剂进行提取、定量。行提取、定量。 罗紫罗紫哥特里法的原理是利用哥特里法的原理是利用 ，破坏乳的胶，破坏乳的胶体性状及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨体性状及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中而脂肪游离乙醇溶液中而脂肪游离出来，再用乙醚出来，再用乙醚-石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即为乳脂。为乳脂。1、原理

25、、原理2、仪器、仪器氨氨-乙醇溶液乙醇溶液恒温水浴（恒温水浴（60-7060-700 0C C和和1001000 0C C）100ml100ml具塞量筒具塞量筒电热恒温烘箱（电热恒温烘箱（8080-120-120） 氨-乙醇处理 乙醚-石油醚提取 回收溶剂4、操作步骤（1）仪器准备）仪器准备 恒重烧瓶，洗涤干燥抽提器恒重烧瓶，洗涤干燥抽提器（2）抽提）抽提 称取乳粉称取乳粉1克左右（或牛奶克左右（或牛奶10克），放入抽脂瓶（即具塞量克），放入抽脂瓶（即具塞量筒）中，加入筒）中，加入10ml 65 50C的水的水，混匀。加入，混匀。加入2ml 氨水氨水，摇匀，摇匀后放入后放入65 50C的水浴的

26、水浴中，加热中，加热15-20分钟分钟。 取出具塞量筒，用流水冷却至室温。加入取出具塞量筒，用流水冷却至室温。加入10ml乙醇乙醇，摇，摇匀，再加入匀，再加入25ml乙醚乙醚振摇振摇1min，再加入，再加入25ml石油醚石油醚，震荡，震荡30秒。秒。静止静止30min，待分层清晰后，用移液管将有机层吸入至已恒重，待分层清晰后，用移液管将有机层吸入至已恒重的接受瓶中。再加乙醚、石油醚（的接受瓶中。再加乙醚、石油醚（2-3次）的次）的重复提取重复提取（每次（每次用用15ml），将），将有机层合并有机层合并于同一接受瓶中。于同一接受瓶中。（3）蒸发溶剂、烘干、称重）蒸发溶剂、烘干、称重 将接受瓶放置

27、将接受瓶放置1000C水浴中蒸去醚液后，置于水浴中蒸去醚液后，置于100-1050C烘箱干燥烘箱干燥2小时，取出置干燥器中，冷却室温后称量，反复小时，取出置干燥器中，冷却室温后称量，反复操作直至恒重。操作直至恒重。m2 5、结果计算、结果计算 m2m1 粗脂肪（粗脂肪（%）= x 100 m样样 m2接受瓶和脂肪的质量，接受瓶和脂肪的质量，g m1接受瓶质量，接受瓶质量，g m样样品质量，样样品质量，g 用浓硫酸溶解乳中的用浓硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白质等非脂成乳糖和蛋白质等非脂成分，将牛奶中的酪蛋白钙分，将牛奶中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重硫酸盐转变成可溶性的重硫酸酪蛋白，使脂肪球膜被破酪蛋白

28、，使脂肪球膜被破坏，脂肪游离出来，再利坏，脂肪游离出来，再利用加热离心，使脂肪完全用加热离心，使脂肪完全迅速分离，直接读取脂肪迅速分离，直接读取脂肪层的数值，便可知被测乳层的数值，便可知被测乳的含脂率。的含脂率。1、原理、原理l这两种方法都是这两种方法都是测定乳脂肪的标准方法测定乳脂肪的标准方法，适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。对含糖多适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。对含糖多的乳品（如甜炼乳、加糖乳粉等），采用此的乳品（如甜炼乳、加糖乳粉等），采用此方法时糖易焦化，使结果误差较大，故不适方法时糖易焦化，使结果误差较大，故不适宜。宜。l此法操作简便，迅速。对大多数样品来说此法操作简便，迅速。对大多数

29、样品来说测定精度可满足要求，但不如重量法准确。测定精度可满足要求，但不如重量法准确。3、仪器、仪器 6、说明及讨论、说明及讨论 硫酸的浓度要严格遵守规定的要求，如过浓会使乳硫酸的浓度要严格遵守规定的要求，如过浓会使乳炭化呈黑色溶液而影响读数；过稀则不能使酪蛋白完全溶炭化呈黑色溶液而影响读数；过稀则不能使酪蛋白完全溶解，会使测定值偏低或使脂肪层混浊。解，会使测定值偏低或使脂肪层混浊。 硫酸硫酸除可除可 破坏脂肪球膜，使脂肪游离出来外，还可破坏脂肪球膜，使脂肪游离出来外，还可增加液体相对密度，使脂肪容易浮出。增加液体相对密度，使脂肪容易浮出。 盖勃法中所用盖勃法中所用异戊醇异戊醇的作用是的作用是促

30、使脂肪析出促使脂肪析出，并能，并能降低脂肪球的表面张力，以利于形成连续的脂肪层。降低脂肪球的表面张力，以利于形成连续的脂肪层。 加热加热（6570C水浴中）和水浴中）和离心离心的目的是的目的是促使脂肪促使脂肪离析。离析。 巴布科克法中采用巴布科克法中采用17.6ml标准吸管取样标准吸管取样，实际上注入巴，实际上注入巴氏瓶中的样品只有氏瓶中的样品只有17.5ml，牛乳的相对密度为牛乳的相对密度为1.03，故样品重，故样品重量为量为17.51.03=18g。巴氏瓶颈的刻度（巴氏瓶颈的刻度（010%）共）共10个大个大格，每大格容积为格，每大格容积为0.2ml，在在60C左右，脂肪的平均相对密度左右

31、，脂肪的平均相对密度为为0.9，故当整个刻度部分充满脂肪时，其脂肪重量为，故当整个刻度部分充满脂肪时，其脂肪重量为0.2100.9=1.8g。18g样品中含有样品中含有1.8g脂肪，即瓶颈全部刻度脂肪，即瓶颈全部刻度表示为脂肪含量表示为脂肪含量10%，每一大格代表每一大格代表1%的脂肪。的脂肪。故瓶颈刻度故瓶颈刻度读数即为样品中脂肪百分含量。读数即为样品中脂肪百分含量。 每组样品只取两格乳脂瓶进行测定。放入离心机时，必每组样品只取两格乳脂瓶进行测定。放入离心机时，必须对称放置。须对称放置。 硫酸的浓度和用量必须严格按照规定硫酸的浓度和用量必须严格按照规定，沿瓶壁缓慢加，沿瓶壁缓慢加入，回旋摇动

32、，使充分混合入，回旋摇动，使充分混合 ，否则易时脂肪层产生黑色块粒。，否则易时脂肪层产生黑色块粒。 氯仿氯仿-甲醇提取法的原理是将试样分散于氯仿甲醇提取法的原理是将试样分散于氯仿-甲醇混合甲醇混合液中，于水浴上轻微沸腾，氯仿液中，于水浴上轻微沸腾，氯仿-甲醇混合液与一定的水分甲醇混合液与一定的水分形成提取脂类的有效溶剂，在使试样组织中结合态脂类游离形成提取脂类的有效溶剂，在使试样组织中结合态脂类游离出来的同时与磷脂等极性脂类的亲合性增大，从而有效地提出来的同时与磷脂等极性脂类的亲合性增大，从而有效地提取出全部脂类。再经过滤，除去非脂成分，然后回收溶剂，取出全部脂类。再经过滤，除去非脂成分，然后回收溶剂，对于残留脂类要用石油醚提取，定量。对于残留脂类要