磷酸盐缓冲液配制方法

1、磷酸盐缓冲液(PBS配制方法0.01M PBSPBS 135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4 ，pH 7.2PBS缓冲液pH7.2 7.4 : NaCI 137mmol/L, KCI 2.7mmol/L , Na2HP0组.3mmol/L , KH2PO41.4mmol/L称 7.9g NaCI , 0.2g KCI , 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和 1.8g K2HPO4，溶于 800 ml 蒸馏水中，用HCI调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至 1 L。保存于4C冰箱中即 可。

2、需要注意的是，通常所说的浓度 0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非 Na 离 子或 K 离子的浓度， Na 离子和 K 离子只是用来调节渗透压的。母液的配制：0.2M Na2HPO4 称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4 称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于 1000ml 水各种浓度 PB(pH=7.4) 的配制：先配 0.2M PB(pH=7.4 ，100ml) ：取 19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将 0.2M PB (pH

3、=7.4) 按相应比例适当稀释 即可，如：0.1M PBPH=7.4：取 500ml 0.2M PB ，加水稀释至1000ml即可。0.01M PB PH=7.4：取 50ml 0.2M PB ，加水稀释至1000ml即可。0.02M PB PH=7.4：取 100ml 0.2 M PB ，加水稀释至1000m即可。假设需要 NaCl 的话，参加 NaCl 至 0.9%(g/100ml )即可。另：其它各种另 PH 值的 0.2M PB(100ml)配方：pH0.2M NaH2PO4ml0.2M Na2HPO4ml5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.1851

4、56.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.590.57.88.591.57.97938.05.394.70.01M磷酸盐缓冲液PBS配制方法称取 8g NaCl 、0.2g KCl 、1.44g Na2HPO4 和 0.24g KH2PO4, 溶于 800ml 蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至 1L即可。在15lbf/in21

5、034X 105Pa高压下蒸气灭菌至少20分钟，保存存于室温或 4 C冰箱中。需要注意的是， 通常所说的浓度 0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度， 而非 Na 离子 或 K 离子的浓度， Na 离子和 K 离子只是用来调节渗透压的。 如果是用于免疫组化的话， 那么 需要在配置的时候分别参加 100 u/ml青霉素和链霉素之后再调 PH定容、灭菌消毒。PH7.67.47.27.0H2O1000100010001000NaCl8.58.58.58.5Na2HPO4 2.22.22.22.2NaH2PO4 0.10.20.30.4根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.

6、4 之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变我亲自测过偏酸。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气， 要加强实验条件控制问题。 每次使用前最好用试纸测一下过 夜了的PBS如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS缓冲液称取 NaCI 8g , KCl 0.2g , Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于 900ml 双蒸水中, 用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L,常温保存备用。PBST缓冲液取300卩l Tween-20 参加PBS 100m

7、l中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍， 配置为浓缩液， 工作时候十倍稀释， 那么， 在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的 方法。十倍稀释以后， PH 自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一 试，配好之后再测一次 PH8.0的PBS配方详细1. NaCl 137mmol/L ， KCl 2.7mmol/L ， Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L 2. 向烧杯中参加约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。4. 高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述PBS

8、Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mMCaCI2和0.5 mMMgCI2。0.05mol/L PBS磷酸缓冲液 Phosphate Buffer Solution ，PBS的配制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4液：称取磷酸氢二钠 9.465g 7.099g,加蒸 馏水至1000ml ;乙液： 0.05mol/L KH2P04 溶液 : 称取磷酸二氢钾 , 9.07g 6.803g, 加蒸馏水至 1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内，于4C冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液，见下表：pH甲液 ml乙液 mI5.292.597.55.595.095.05.9110.090.06.2420.080.