西门子WalkAway40全自动细菌鉴定及药敏仪培训

1、邵邵 柏柏2012.72012.7西门子西门子WalkAway40全自动细全自动细菌鉴定及药敏仪培训菌鉴定及药敏仪培训吴吴 李李 培培南通大学附属东台医院南通大学附属东台医院 20152015年年1 1月月8 8日日WalkAway40全自动细菌鉴定及药敏仪全自动细菌鉴定及药敏仪 一、结构与原理一、结构与原理 二、操作流程二、操作流程 三、保养及维护三、保养及维护2021-9-212基基 本本 结结 构构1、基本结构、基本结构由WalkAway40仪器、测试板、快速接种系统和数据管理系统四部分组成。2021-9-213基基 本本 结结 构构 MicroScan测试板的类型测试板的类型 1、革兰

2、阳性板 2、革兰阴性板 3、厌氧菌板 4、酵母菌板 5、苛养菌板原原 理理2、原理：、原理： MicroScan的WalkAway系列则采用8进制计算法分别将28个生化反应转换成8位生物数码。计算机系统自动将这些生物数码与编码数据库进行对比获得相似系统鉴定值。快速荧光革兰阳(阴)性板则根据荧光法的鉴定原理荧光物质均匀地混在培养基中将菌种接种到鉴定板后通过检测荧光底物的水解、底物被利用后的pH变化、特殊代谢产物的生成和某些代谢产物的生成率来进行菌种鉴定。 2021-9-215原原 理理 1、WalkAwav96仪器部分测试板放入孵育箱后在20min到3h内(山测试板的型号决定)系统要对测试板进行

3、一次初读初读的结果将作为以后读板结果的对照。通过比色法测定的测试板经适当的孵育后有些测试孔需添加试剂，此时Walk -Away系统会自动添加并延长孵育的时间，一般为5-30min。通过荧光法测定的测试板不需添加试剂孵育完成后系统立即读板并将各孔的检测数据自动保存起来。原原 理理 WalkAway的荧光测定系统可直接对荧光测试板各孔中产生的荧光进行测定，并将荧光信号转换成电信号数据管理系统将这些电信号转换成数码。与原已储存的对照值相比较，推断出菌种的类型及药敏结果。常规测试板则直接检测电信号，从干涉滤光片过滤的光通过光导纤维导入测试板上的96个测试孔，光感受二极管测定通过每个测试孔的光量。产生相

4、应的电信号，从而推断出菌种的类型及药敏结果。 在特殊情况下，药敏测试板会出现读板失败的现象，此时可以用肉眼来校读。直接观察各孔中细菌的生长情况。若长菌，则记为阳性；若不长菌，则记为阴性，将结果输入微机中数据管理系统会得出药敏结果。原原 理理 2. 测试板采用96孔塑料板作为测试板，孔内包被有用于菌种鉴定的生化反应的底物，或是用于测定MIC的不同稀释浓度的各种抗生素，每孔可容纳120l的液体。每个板中均设有对照孔和生长孔。若读板时检测到生长孔中的细菌生长量不够，就会给出“生长不充分”的提示。系统自动延长孵育时间。MicroScan测试板的类型各测试板上都附有条形码，上机前经条形码扫描器扫描后可被

5、系统识别，系统会自动给测试板编号，以防标本混淆。原原 理理 3快速接种系统 系统配有真空接种器，可一次完成96孔菌液的接种。需指出的是，有许多细菌自动鉴定系统都配有自动接种器。大致可分为两类：真空接种器和活塞接种器，以真空接种器应用较多。并且接种器上一般都配有标准麦氏浓度比浊仪，操作时只需将稀释好的菌液放入比浊仪中确定浓度即可。原原 理理 4数据管理系统负责数据的转换及分析处理，并具有强大的统计功能，可进行菌种发生率、菌种分离率、抗生素耐药率等流行病学统计。 打印条码步骤：接种接种常用接种方法有二种：1、Prompt快速接种法：2、Direct turbidity直接比浊法： 方法： 使用一校

6、准过的专用取菌针去沾取相同的菌落3次，然后用环状的盖帽将针边缘上多余的细菌刮掉，将取菌针插入专用的30ml Prompt接种水瓶中，彻底混匀接种，用RENOK和接种槽接种到检测板上。适用： 最适用于快速生长的细菌；菌落的大小要足够大于取菌针的针尖，并且有散在的菌落。优点： 快速不需进行比浊。注意事项： 小的菌落（小于取菌针的针尖），不建议用此方法接种。 方法：方法： 用棉签或接种环挑取足够的菌落到3ml的灭菌蒸馏水中，比浊至浓度与0.5麦氏浊度标准相当（0.5McFarland Std.）(用标准比浊管目测或比浊计测定)；然后取100ul此菌悬液加入到25ml的PluronicD水中，混匀，用

7、RENOK和接种槽接种到测定板上。操操 作作 流流 程程适用： 快速生长的细菌、葡萄球菌（有助于更准确的检测出苯唑西林耐药株Oxacillin Resistance）。优点： 快速，可得到标准浓度的悬液。注意事项： 生长缓慢的细菌和呈明显粘液状的细菌，效果可能不好。操操 作作 流流 程程 放板步骤放板步骤操操 作作 流流 程程 查看样本和保存结果查看样本和保存结果操操 作作 流流 程程 查看样本和保存结果查看样本和保存结果操操 作作 流流 程程 报告传输步骤报告传输步骤操操 作作 流流 程程 修改结果步骤修改结果步骤操操 作作 流流 程程 实验室质量控制实验室质量控制:1、实验室间质控；按常规

8、样本操作程序进行2、实验室室内质控；每日打印当天仪器自身诊断报告操操 作作 流流 程程仪器自身诊断报告仪器自身诊断报告步骤步骤操操 作作 流流 程程 输入和编辑质控订单输入和编辑质控订单步骤步骤操操 作作 流流 程程打印已存储的质控结果打印已存储的质控结果步骤步骤操操 作作 流流 程程查看已存储的质控结果查看已存储的质控结果步骤步骤操操 作作 流流 程程 搜索方式：搜索方式：保保 养养 及及 维维 护护 维护保养: 1、日常维护保养 2、定期维护保保 养养 及及 维维 护护日常维护保养1、打印Walkaway质控诊断报告.至少每天打印一次Walkaway 质控诊断报告。2、备份数据库。3、查看

9、仪器温度，温度必须为 35 C 1 C.内部和外部温度读数相 差应0.5 C。4、检查储水器并在必要时加注(内盛无菌去离子水或无菌蒸馏水)。5、检查试剂液位，并在需要时更换或加注试剂瓶。6、检查试剂分配压力，并在需要时冲洗分配管路。保保 养养 及及 维维 护护7、检查试剂分配管路，并清洁分配吸头。8、清洁试剂废料漏斗。9、检查废料储存器液位，并在需要时更换废料袋。10、检查输油管.并在需要时冲洗输油管路。11、检查油位,并在需要时更换或加注油瓶。12、清洁参照盘和荧光计保护片。13、检查光电二极管保护片和毛玻璃片，并在必要时进行清洁。保保 养养 及及 维维 护护 定期维护 1、至少每周清洁一次光电二极管保护片。 2、至少每周清洁一次毛玻璃片。 3、至少每月检查并清洁一次进气过滤器。保保 养养 及及 维维 护护 注意事项