灭菌与无菌操作课件

1、灭菌与无菌操作课件 教教 师：罗国平师：罗国平 2012.09灭菌与无菌操作课件第九章 灭菌法 灭菌法：（Sterilization）指杀死或除去所有微生物的方法。微生物包括：细菌、真菌、病毒等。细菌的芽胞具有较强的抗热能力，因此灭菌效果，常以杀灭芽胞为准。 消毒（Disinfection）：是指用物理和化学方法将病原微生物杀死。 防腐（Antisepsis）：是指低温或化学药品防止和抑制微生物生长繁殖。 灭菌与无菌操作课件 一、物理灭菌法一、物理灭菌法 （一）干热灭菌法（一）干热灭菌法 1、火焰灭菌法、火焰灭菌法火焰上加热火焰上加热20秒以上。秒以上。 灼烧是最迅速、可靠、简便的灭菌方法，适

2、用耐灼烧是最迅速、可靠、简便的灭菌方法，适用耐火焰材质的物品、金属制品（药刀）、玻璃器皿火焰材质的物品、金属制品（药刀）、玻璃器皿（玻璃棒）以及瓷器等用具的灭菌。（玻璃棒）以及瓷器等用具的灭菌。灭菌与无菌操作课件 2、干热空气灭菌、干热空气灭菌在高温干热空气中灭菌的在高温干热空气中灭菌的方法。方法。 此法适用于耐高温的玻璃制品、金属制品以及不此法适用于耐高温的玻璃制品、金属制品以及不允许湿气穿透的油脂类和耐高温的粉末化学药品允许湿气穿透的油脂类和耐高温的粉末化学药品等。粉针剂用无菌瓶的干燥就采用干热灭菌法。等。粉针剂用无菌瓶的干燥就采用干热灭菌法。 缺点：穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度缺

3、点：穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于橡胶、塑料及大部较高，灭菌时间较长，不适于橡胶、塑料及大部分药品。分药品。 灭菌与无菌操作课件 （二）湿热灭菌法（二）湿热灭菌法是在饱和蒸气或沸水或流通是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气中进行灭菌的方法。由于蒸气潜热大，穿透力蒸气中进行灭菌的方法。由于蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以灭菌效率比干强，容易使蛋白质变性或凝固，所以灭菌效率比干热灭菌法高。热灭菌法高。 特点：温度低，时间短，可靠，最常用。特点：温度低，时间短，可靠，最常用。 蒸气性质：饱和蒸气蒸气性质：饱和蒸气湿饱和蒸气、过热蒸气、不饱湿饱和蒸气、过热蒸气

4、、不饱和蒸气和蒸气 灭菌与无菌操作课件灭菌与无菌操作课件 （2）使用热压灭菌器注意事项）使用热压灭菌器注意事项 必须采用饱和蒸气，在灭菌前加入足量的水，必须采用饱和蒸气，在灭菌前加入足量的水，以防产生过热蒸气；以防产生过热蒸气； 必须将灭菌器内的空气排尽；必须将灭菌器内的空气排尽； 灭菌时间必须从全部内容物均已达到规定温度灭菌时间必须从全部内容物均已达到规定温度时开始计算；时开始计算；灭菌与无菌操作课件 避免压力骤然下降或遇冷，防止容器炸裂；如：避免压力骤然下降或遇冷，防止容器炸裂；如：放气时不能过快；放完气后先将锅门打开放气时不能过快；放完气后先将锅门打开10cm，使冷空气逐渐进入冷却，再逐

5、渐开大；灭菌后喷使冷空气逐渐进入冷却，再逐渐开大；灭菌后喷淋冷却水快速降温也会有危险；淋冷却水快速降温也会有危险； 压力表和温度表应灵敏、准确，两表数值应相压力表和温度表应灵敏、准确，两表数值应相互对应；不同海拔高度，不应使用同一表压；互对应；不同海拔高度，不应使用同一表压； 及时清扫异物，防止疏水器和排水管堵塞。及时清扫异物，防止疏水器和排水管堵塞。 灭菌与无菌操作课件 3、流通蒸气灭菌常压、流通蒸气灭菌常压100流通蒸气，加热流通蒸气，加热30-60min。 缺点：不能保证杀灭所有的芽胞。缺点：不能保证杀灭所有的芽胞。 适用情况：消毒及不耐高热的制剂的灭菌。适用情况：消毒及不耐高热的制剂的

6、灭菌。 4、煮沸灭菌法：、煮沸灭菌法：100沸水，加热沸水，加热30-60min。本。本法灭菌效果差，常用于注射器、注射针等器皿的法灭菌效果差，常用于注射器、注射针等器皿的消毒。必要时加入适当的抑菌剂，可杀死芽胞细消毒。必要时加入适当的抑菌剂，可杀死芽胞细菌。菌。灭菌与无菌操作课件 5、低温间歇灭菌法、低温间歇灭菌法 80加热加热1小时小时20-25保持保持24小时（让芽胞变小时（让芽胞变为增殖体）为增殖体）再加热，放置，反复三次，直至消再加热，放置，反复三次，直至消灭芽胞为止。灭芽胞为止。 本法适用于不耐高温的制剂的灭菌。本法适用于不耐高温的制剂的灭菌。灭菌与无菌操作课件（三）紫外线灭菌法（

7、三）紫外线灭菌法254nm灭菌力最强灭菌力最强（200-300nm） 适用于：室内空气或表面灭菌。适用于：室内空气或表面灭菌。 注：紫外线对人体照射过久，能产生结合膜炎、红注：紫外线对人体照射过久，能产生结合膜炎、红斑及皮肤灼伤等。所以应对工作者的皮肤及眼睛作斑及皮肤灼伤等。所以应对工作者的皮肤及眼睛作适当防护。适当防护。灭菌与无菌操作课件 （四）滤过除菌法：用滤过的方法除去活的或死（四）滤过除菌法：用滤过的方法除去活的或死的微生物的方法，是一种机械除菌的方法。的微生物的方法，是一种机械除菌的方法。 除菌滤过器：微孔滤膜除菌滤过器：微孔滤膜0.22-0.45m（0.22，0.3） 适用于：不耐

8、热药液（如：生物制品，抗生素适用于：不耐热药液（如：生物制品，抗生素等）、气体、水等的灭菌。等）、气体、水等的灭菌。灭菌与无菌操作课件 （五）辐射灭菌（五）辐射灭菌 射线（射线（60Co）不升温，穿透性强，特别适不升温，穿透性强，特别适于已经包装好的产品。缺点：设备费用高，对某于已经包装好的产品。缺点：设备费用高，对某些药品可能产生药效降低、产生毒性物质或发热些药品可能产生药效降低、产生毒性物质或发热物质，同时还要注意安全防护。物质，同时还要注意安全防护。 中药材以及中成药中的应用。中药材以及中成药中的应用。 （六）微波灭菌，高速热风灭菌（六）微波灭菌，高速热风灭菌灭菌与无菌操作课件 二、化学

9、灭菌法二、化学灭菌法 （一）气体灭菌法（一）气体灭菌法 1、环氧乙烷、环氧乙烷 机理：为烷化剂，与菌体蛋白质中的机理：为烷化剂，与菌体蛋白质中的-COOH，-NH2，-SH，-OH基结合，使之产生不可逆性破坏。基结合，使之产生不可逆性破坏。 适用于：一次性注射器、输液器、注射针头、敷料，适用于：一次性注射器、输液器、注射针头、敷料，对热敏感固体药物等。对热敏感固体药物等。 2、臭氧：空间清毒，原水消毒。、臭氧：空间清毒，原水消毒。 3、甲醛、丙二醇、乳酸熏蒸、甲醛、丙二醇、乳酸熏蒸室内空间的灭菌。室内空间的灭菌。 灭菌与无菌操作课件 （二）化学杀菌剂（二）化学杀菌剂物体表面灭菌。物体表面灭菌。 1、0.1%-0.2%新洁尔灭新洁尔灭 2、2%苯酚或甲酚皂溶液苯酚或甲酚皂溶液 3、75%乙醇乙醇 4、2%碱性戊二醛碱性戊二醛 灭菌与无菌操作课件三、无菌操作法：整个制备过程控制在无三、无菌操作法：整个制备过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法。菌条件下进行的一种操作方法。灭菌与无菌操作课件 无菌检查：参照中国药典，对所有注射剂均要做此项目 方法： 1、直接接种法：取一定量供试品，以无菌操作将该供试品分别接种于需气菌、厌气菌培养基培养数日，在培养期间应逐日观