机能实验：影响血液凝固的因素.doc

1、机能实验：影响血液凝固的因素（此作业得分94 分仅供参考）一、实验目的1、学习家兔的基本手术操作。2、观察血液凝固的现象。3、了解血液凝固的基本过程。4、观察某些因素对血液凝固的影响。二、实验原理1、血液凝固 : 血液由流动液体状态变成不流动的胶冻状态，需要多种凝血因子的参与一系列复杂的酶促反应过程。2、分为凝血酶原激活物的形成、凝血酶原激活生成凝血酶和纤维蛋白原转变为纤维蛋白等三个阶段。3、分为内源性凝血途径和外源性凝血途径。三、实验材料1、实验对象：家兔。2、实验器材与药品：哺乳动物实验手术器械一套，25ml 小烧杯 2 个，竹签，清洁小试管 9 支，水浴装置一套，冰块，棉花，石蜡油，肝素

2、，草酸钾， L 的 CaCl2 溶液，肺组织悬液，富血小板血浆，少血小板血浆，生理盐水等。四、实验方法和观察项目1、动物手术（ 1）将家兔称重后，按 5ml/kg 的剂量自耳缘静脉缓慢注射20%乌拉坦。（ 2）麻醉完成后将家兔以仰卧位固定于兔手术台上，将颈部被毛用粗剪剪去。（3）在颈部腹面正中从甲状软骨水平向后至胸骨上缘做5-7cm 的纵行切口，一次钝性分离皮下组织、肌肉及气管表面结缔组织直至暴露气管。分离气管，行气管插管术。（ 4）分离一侧的颈总动脉，将颈总动脉游离 2-3cm，穿双线备用。用其中一线结扎劲总动脉远心端，近心端用动脉夹闭。用眼科剪在颈总动脉靠近远心端结扎线处剪一斜口（约45）

3、，将动脉插管向心脏方向插入动脉内约1cm，用另一线结扎，已备取血。2、实验准备按结果记录表准备好8 个试管，并对人员进行分工。3、取血 打开动脉夹，经颈总动脉插管放血入个试管中，每支试管采血约 15ml。注意及时记录采血完成时间并将各试管尽快置于其实验条件下， 所有试管加入血液后都要充分摇匀。4、理化因素对血液凝固的影响及其结果观察接触面粗糙程度、温度以及试剂对血液凝固的影响 观察各试管内血液凝固所所需时间。在每支试管采血完成后开始计时， 每隔 30s 将试管轻轻倾斜 1 次，观察试管中的血液是否凝固， 发现血液呈凝胶状不再流动时停止计时， 以此得到各试管血液凝固所需时间。 在本实验条件下，超

4、过 30min 血液未凝可视为“不凝” 。五、实验结果表 1不同理化环境中血液凝固的时间编号实验条件凝血所需时间1无（对照管）402”2加少许棉花310”3用液体石蜡润滑试管内表面830”4置于冰水混合物中543”5置于 37水浴槽中349”6加肝素 8U不凝7加 2%草酸钾溶液 1-2ml不凝8加肺组织液149”六、实验讨论与反思1、影响血液凝固的因素有哪些，他们影响血液凝固的机制是什么1）血凝加快：棉花作为异物启动内源性凝血途径；肺组织液悬液中的组织因子启动外源性凝血途径；适当升温使酶促反应活性增加；2）血凝减慢：液态石蜡使试管壁变得光滑，不利于凝血；冰水混合物使酶促反应活性降低； 草酸钠与血液中的钙离子反应形成草酸钙沉淀，使促凝血的钙离子被消耗；肝素带强负电荷，使凝血过程受到干扰。2、三支加入血浆的试管中，第一管与第二管的凝血时间有何差别第二管和第三管有何差别第二支（棉花）比第一支的凝固时间较短，第三支（石蜡）比第二支的凝血时间明显增长。3、关于实验操作：1）在兔子耳缘出的多次麻醉造成麻醉剂从其他针孔漏出，麻醉不彻底；2）实验器具应提前检查，采血用的玻璃针筒密封性不佳