酶活性的影响因素

1、酶活性的影响因素 vanevane知识背景知识背景 ph、温度、紫外线、重金属盐、抑制剂、激活剂等通过影响酶的活性来影响酶促反应的速率；酶的浓度、底物的浓度等不会影响酶活性，但可以影响酶促反应的速率。 纳氏试剂（nessler）是指一种利用红外可见分光光度法原理用于测定空气中、水体中氨氮含量的试剂。 碘离子和汞离子在强碱性条件下，会与氨反应生成红棕色胶态化合物，此颜色在波长420nm左右会有强烈的吸收。而生成的这类红棕色胶态化合物的量会与其溶液的吸收值成正比，可用测试反应液的吸收值而测定氨氮的含量。 实验原理： 尿素在酸、碱、酶作用下（酸、碱需加热）能水解成氨和二氧化碳 新鲜大豆中含有较高活性

2、的尿素酶，可以水解尿素生成nh3 co(nh2)2 + h2o -2nh3 + co2 尿素养在尿素酶作用下，在中性或酸性环境下生成碳酸胺，在naoh环境下生成na2co3和nh3、nh3与纳氏试剂作用，生成棕黄色碘化双汞胺 尿素酶 naoh co(nh2)2 + h2o - ( nh4 )2co3 - nh3 nh3 + 纳氏试剂(hgi2.2ki) - nh2.hg2i3 (棕黄色)实验材料： 器材： 控温水浴锅（每个实验室3个），制冰机，电磁灶，不锈钢锅，白瓷板，试管、滴管、移液管（1-2ml） 试剂：蒸馏水，1%淀粉液，1%蔗糖液，0.1%尿素液，大豆尿素酶溶液，0.1%cuso4，0

3、.1%hgcl2，0.1%nacl，1m naoh，0.5m h2so4，纳氏试剂，班氏试剂，各种ph缓冲液：5.0；6.8；8.0酶活性的影响因素假设酶活性的影响因素假设 1、酶的活性受、酶的活性受ph的影响的影响 2、酶的活性受底物特异性的影响、酶的活性受底物特异性的影响 3、酶的活性受温度的影响、酶的活性受温度的影响 4、酶的活性受重金属离子的影响、酶的活性受重金属离子的影响1、酶的活性受、酶的活性受ph的影响的影响 步骤 1、向四支10ml试管，分别标号1，2，3，4 2、将1%尿素液3ml分别倒入四支试管中 3、向前三支支试管中分别倒入1ml的ph为5.0，6.8，8.0的缓冲液，四

4、号试管加入1ml的蒸馏水 4、向四支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴，轻摇后静置3分钟 5、向四支试管中加入等量的纳氏试剂 2ml，摇匀。 6、观察并记录实验现象实验记录项目底物（/ml）加入的ph和蒸馏水（/ml）纳氏试剂（/ml）实验现象试管1试管2试管3试管42、酶的活性受底物的特异性的影响、酶的活性受底物的特异性的影响 步骤 1、向四支10ml试管，分别标号1，2，3，4 2、向四支试管中分别加入3ml的蒸馏水，1%淀粉液，1%蔗糖液， 0.1%尿素液 3、向四支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴，轻摇后静置3分钟 4、向四支试管中加入等量的纳氏试剂2ml，摇匀。 5、观察并记录实验

5、现象实验记录项目底物（/ml）大豆尿素酶溶液 （/ml）纳氏试剂（/ml）实验现象试管1试管2试管3试管43、酶的活性受温度的影响、酶的活性受温度的影响 步骤 1、向四支10ml试管，分别标号1，2，3，4 2、向四支试管中分别加入3ml0.1%尿素液 3、将四支试管分别置于0c，30c，100c，室温的水浴中预温10分钟 3、向四支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴，轻摇后静置3分钟 4、向四支试管中加入等量的纳氏试剂2ml，摇匀。 5、观察并记录实验现象实验记录项目底物（/ml）温度（/c）大豆尿素酶溶液 （/ml）纳氏试剂（/ml）实验现象试管1试管2试管3试管44、酶的活性受重金属离子的影响、酶的活性受重金属离子的影响 步骤 1、向六支10ml试管，分别标号1，2，3，4，5，6 2、向六支试管中分别加入3ml0.1%尿素液 3、将六支试管分别加入0.1%cuso4 0.1%hgcl2 0.1%nacl 1m naoh 0.5m h2so4，蒸馏水各2ml 3、向六支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴，轻摇后静置3分钟 4、向六支试管中加入等量的纳氏试剂2ml，