实验一环境因素对植物水分状态的影响

1、生科楼生科楼c2016 c202036学时，学时，2学分。学分。除第除第1个实验自学外，第个实验自学外，第2周开始安排周开始安排8个个实验，每个实验实验，每个实验8.5分，合计分，合计8.58+2=70（平时实验及实验报告成绩）。（平时实验及实验报告成绩）。期末考试成绩期末考试成绩30分。分。1新鲜和萎蔫植物组织新鲜和萎蔫植物组织含水量含水量和组织和组织水势水势的比较的比较 2光和光和k+对对气孔气孔运动的调节运动的调节 3硝酸还原酶硝酸还原酶（nr）活性活性的测定的测定 4叶绿体色素叶绿体色素的测定和分析的测定和分析 5萌动萌动种子呼吸种子呼吸对温度的响应对温度的响应 6快速测定快速测定种子

2、活力种子活力的方法和比较的方法和比较 7植物植物生长激素生长激素作用的部位和浓度效应比较分析、激素检测方法作用的部位和浓度效应比较分析、激素检测方法 8逆境逆境胁迫下植物胁迫下植物细胞膜透性细胞膜透性及脯氨酸含量的变化分析及脯氨酸含量的变化分析 植物生理学实验安排植物生理学实验安排一一. . 实验题目实验题目二二. . 实验目的及原理实验目的及原理三三. . 实验步骤实验步骤四四. . 结果与分析结果与分析五五. . 注意事项注意事项( (自己体会）自己体会）六六. . 思考题思考题植物生理学实验报告植物生理学实验报告(独立完成，交学委独立完成，交学委) 在老师指导下，合理、安全地使用实验仪器

3、；在老师指导下，合理、安全地使用实验仪器； 实验前，分组查看器皿；实验前，分组查看器皿； 实验后，彻底清洗器皿，按实验前摆放归位；实验后，彻底清洗器皿，按实验前摆放归位； 一旦损坏物品，及时登记；一旦损坏物品，及时登记； 严禁将任何器皿插入洗液瓶中；严禁将任何器皿插入洗液瓶中； 每次实验结束后，由班长安排每次实验结束后，由班长安排3-4位同学清洁打扫。位同学清洁打扫。注意事项注意事项 一一) ) 植物组织植物组织含水量含水量的测定的测定二二) ) 植物组织植物组织水势水势的测定的测定一) 植物组织含水量的测定1. 实验目的实验目的 2. 实验原理实验原理 水遇热蒸发为水蒸汽，可以用水遇热蒸发为

4、水蒸汽，可以用烘干法烘干法来测定植物组来测定植物组 织中的含水量。织中的含水量。 植物组织含水量的表示方法，常以鲜重或干重植物组织含水量的表示方法，常以鲜重或干重%表表 示，有时也以相对含水量示，有时也以相对含水量%表示。表示。 植物组织含水量（植物组织含水量（%） = （鲜重（鲜重-干重）干重）/鲜重鲜重 100材料：材料：小白菜（新鲜叶片，高温贮藏萎蔫叶片）。小白菜（新鲜叶片，高温贮藏萎蔫叶片）。仪器：仪器：打孔器、橡胶垫、称样铝盒、打孔器、橡胶垫、称样铝盒、 烘箱、搪瓷盆、烘箱、搪瓷盆、棉布手套、天平，等。棉布手套、天平，等。3. 材料、仪器设备与试剂材料、仪器设备与试剂1) 铝盒干燥、

5、标记、称重：铝盒干燥、标记、称重：a1、a2， b1、b2;2) 打取叶圆片：打取叶圆片：新鲜叶和萎蔫叶各打约新鲜叶和萎蔫叶各打约60片叶圆片片叶圆片（注（注意避开大的叶脉），意避开大的叶脉），放至铝盒中，混合均匀。每个铝盒放至铝盒中，混合均匀。每个铝盒各放各放30片，片，2次重复；次重复；3) 称鲜重称鲜重: 铝盒铝盒+叶圆片；叶圆片；4) 烘干：烘干：105，2h左右。（左右。（打开盖子，盖子放打开盖子，盖子放各自各自铝盒铝盒下面下面）；）；5) 称干重：称干重：取出取出室温，称重（铝盒室温，称重（铝盒+叶圆片）。叶圆片）。4. 实验步骤实验步骤材料材料新鲜叶片新鲜叶片萎蔫叶片萎蔫叶片铝盒

6、号铝盒号a1a2平均平均b1b2平均平均铝盒重铝盒重(w0)鲜重鲜重(w1，盒盒+叶圆片叶圆片)干重干重(w2 ，盒盒+叶圆片叶圆片)含水量含水量(%)含水量（含水量（%） =（w1-w2）/ (w1-w0）1005. 结果与分析结果与分析二) 植物组织水势的测定1. 实验目的实验目的 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，植物组织的水势植物组织的水势溶液的渗透势，组织吸水而使溶液浓度变大；溶液的渗透势，组织吸水而使溶液浓度变大；植物组织的水势植物组织的水势溶液的渗透势，组织水分外流而使溶液浓度变溶液的渗透势，组织水分外流而使溶液浓度变小；小；植物

7、组织的水势植物组织的水势=溶液的渗透势，外部溶液浓度不变。溶液的渗透势，外部溶液浓度不变。 当某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，该浓当某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，该浓度溶液为此植物组织的等渗溶液，植物组织地水势等于该溶液的度溶液为此植物组织的等渗溶液，植物组织地水势等于该溶液的渗透势。渗透势。2. 实验原理实验原理 在渗透系统中，水总是从水势高处流向水势低处。在渗透系统中，水总是从水势高处流向水势低处。用溶液的渗透势用溶液的渗透势()代表植物水势代表植物水势(w)。 w-icrt（单位：兆帕，（单位：兆帕，mpa）i：为解离系数（蔗糖：为解离系数（蔗糖=1.0

8、0；cacl2=2.60；nacl=1.80）c：为等渗浓度：为等渗浓度（mol/l)r：为气体常数：为气体常数0.008314 l mpa /（mol k）t：为绝对温度（：为绝对温度（273+摄氏温度）摄氏温度） 材料：材料：小白菜（新鲜叶组和萎蔫叶组）；小白菜（新鲜叶组和萎蔫叶组）；仪器设备仪器设备：注射针头、打孔器、试管，等；：注射针头、打孔器、试管，等；试剂：试剂：1 m 蔗糖，纯水，甲烯蓝粉。蔗糖，纯水，甲烯蓝粉。3. 材料、仪器设备与试剂材料、仪器设备与试剂1）打取叶圆片）打取叶圆片4. 实验步骤实验步骤 新鲜叶和萎蔫叶各打约新鲜叶和萎蔫叶各打约60片叶圆片片叶圆片（注意避开大的

9、叶（注意避开大的叶脉），脉），放至铝盒中，混合均匀。放至铝盒中，混合均匀。2）配制蔗糖溶液梯度）配制蔗糖溶液梯度 把试管分成两组，每组大试管和小试管各把试管分成两组，每组大试管和小试管各6支；在每一支；在每一组中，用组中，用6支大试管分别配制支大试管分别配制10ml不同浓度的蔗糖溶液不同浓度的蔗糖溶液(mol/l) ： 0.05、0.1、0.2、0.3 、0.4、0.5 ，（用浓度为，（用浓度为1mol/l的蔗糖溶液稀释）；然后，分别取的蔗糖溶液稀释）；然后，分别取2ml放入对应的小放入对应的小试管中。试管中。（注意：试管刻度不准确，用移液管来量取。）（注意：试管刻度不准确，用移液管来量取。）

10、3） 浸泡浸泡 每支小试管中分别放入每支小试管中分别放入10个叶圆片，个叶圆片，充分浸泡充分浸泡30分钟，其间摇晃几次。分钟，其间摇晃几次。4）染色）染色 浸泡完毕后，向小试管中投入尽量少浸泡完毕后，向小试管中投入尽量少的甲烯蓝，染色。的甲烯蓝，染色。5）液流操作与观察）液流操作与观察 用针头吸取小试管中的溶液少许，插入用针头吸取小试管中的溶液少许，插入对应浓对应浓度大试管度大试管溶液的中部，小心的放出少量液流，观察溶液的中部，小心的放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向，并记录。蓝色液流的升降动向，并记录。蓝色液流上升：蓝色液流上升：浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小了浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小了

11、（即植物组织失水），表明叶片组织的水势高于该（即植物组织失水），表明叶片组织的水势高于该蔗糖溶液的渗透势；蔗糖溶液的渗透势；蓝色液流下降：蓝色液流下降：变大；变大；蓝色液流静止不动：蓝色液流静止不动：等渗浓度。等渗浓度。轻捏吸管轻捏吸管, ,放放入刻度试管入刻度试管深入溶液中部深入溶液中部, ,挤出小液滴挤出小液滴实验步骤实验步骤1）打取叶圆片：）打取叶圆片： 新鲜叶和萎蔫叶各打约新鲜叶和萎蔫叶各打约60片叶圆片（注意避开大片叶圆片（注意避开大的叶脉），放至铝盒中，混合均匀。的叶脉），放至铝盒中，混合均匀。2）配制蔗糖溶液梯度：）配制蔗糖溶液梯度：把试管分成两组，每组大试管和小试管各把试管分成

12、两组，每组大试管和小试管各6支；在每一组中，用支；在每一组中，用6支大试管分别配制支大试管分别配制10ml不同浓度的蔗糖溶不同浓度的蔗糖溶液液(mol/l) ：0.05、0.1、0.2、0.3 、0.4、0.5 ；然后，分别取；然后，分别取2ml放入对应的小试管中。放入对应的小试管中。3）浸泡）浸泡： 每支小试管中分别放入每支小试管中分别放入10个叶圆片，充分浸泡个叶圆片，充分浸泡30分钟，分钟，其间摇晃几次。其间摇晃几次。4）染色）染色：浸泡完毕后，向小试管中投入尽量少的甲烯蓝，染色。：浸泡完毕后，向小试管中投入尽量少的甲烯蓝，染色。5）液流操作与观察）液流操作与观察：用针头吸取小试管中的溶

13、液少许，插入对应浓：用针头吸取小试管中的溶液少许，插入对应浓度大试管的中部，小心的放出少量液流，观察蓝色液流的升降动度大试管的中部，小心的放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向，并记录。向，并记录。5. 结果分析结果分析 w -icrt （单位：兆帕，（单位：兆帕，mpa）1. 分别计算新鲜和萎焉叶片的含水量，并进行比较分析。分别计算新鲜和萎焉叶片的含水量，并进行比较分析。2. 记录记录3. 计算两组叶片的水势，并结合其含水量比较分析。计算两组叶片的水势，并结合其含水量比较分析。 蔗糖溶液浓度蔗糖溶液浓度 (mol l-1) 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 w (mpa)新鲜叶

14、新鲜叶萎蔫叶萎蔫叶蔗糖溶液浓度蔗糖溶液浓度(mol/l)0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向c = 0.2mol/lc = 0.2mol/l蔗糖溶液浓度蔗糖溶液浓度(mol/l)0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向c (0.2+0.3)/2c (0.2+0.3)/2蔗糖溶液浓度蔗糖溶液浓度(mol/l)0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向蔗糖溶液浓度蔗糖溶液浓度(mol/l)0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向严重萎蔫叶片的严重萎蔫叶片的 c c 可能可能 0.5 0.5 幼嫩新鲜叶片的幼嫩

15、新鲜叶片的 c c 可能可能 0.05 0.05蔗糖溶液浓度蔗糖溶液浓度(mol/l)0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向错误结果错误结果1) 1) 称鲜重前确定铝盒是否干燥干净；称鲜重前确定铝盒是否干燥干净；2) 2) 拭干叶表水分和泥渍；拭干叶表水分和泥渍；3) 3) 避开大的叶脉打叶圆片避开大的叶脉打叶圆片, ,混合均匀；混合均匀；4) 4) 移液管取溶液和纯水；移液管取溶液和纯水；5) 5) 配制的蔗糖溶液要上下颠倒混匀；配制的蔗糖溶液要上下颠倒混匀；6) 6) 润洗移液管和针头（放回原液）；润洗移液管和针头（放回原液）；7) 7) 叶圆片浸入液面下；叶圆片浸入液面下；8) 8) 浸泡浸泡3030分钟后再加甲烯蓝染色；分钟后再加甲烯蓝染色；9) 9) 尽量少加甲烯蓝；尽量少加甲烯蓝；10)10)轻压胶管使针筒少量吸入染色溶液；轻压胶管使针筒少量吸入染色溶液；11)11)滴入后，停止挤压或放松胶管。滴入后，停止挤压或放松胶管。6. 注意事项注意事项增加或减少蔗糖溶液中叶圆片数目是否会影响增加或减少蔗糖溶液中叶圆片数目是否会影响水势