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文档简介
1、脚H震暑泰、动物细胞融合:融合1、概念:选修3P. 52动物细胞融合也称细胞杂 交,是指两个或多个动物 细胞结合形应一个细胞的 过程。2、原理:不同DNA的 两个细胞细胞膜具有一定的流动性3、过程:物理法:离心、电激、振动 化学法聚乙二醇生物法:灭活的病毒(特有的方法:细胞完成融合的标志:细胞核融合为核融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,成为 杂交细胞意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可熊,5、动物细胞融合的应用:成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段制备单克隆抗体(重要应用)植物、动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融
2、合的方法细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 酶解法去除细胞壁后 诱导原生质体融合细胞膜的流动性诱导方法物理(离心、 振动、电刺激) 化学(聚乙二醇)用途获得杂种植株用胰蛋白酶处理使细 胞分散后诱导细胞融 合霸理、化学方法(同左)生物再灭活釣病耒主要用于制备单克隆抗体二、单克隆抗体:关于抗体其由何种细胞产生?主要分布在哪里?如何得到抗体?效应B»抗原动物体内抗体»抗原动物体内詬*抗体A不仅产量低、纯度低而且制备的抗体特异 性差,灵敏度低效应E z抗体不纯筛选单一的效应B细胞抗原不纯B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原1每一个B淋巴细胞只能分泌一种特q异性抗体,不同种类的B淋巴细胞分泌
3、的抗体不同 2、B淋巴细胞在体外培养时不能无限增值,骨髓瘤细胞能够无限增值制备*单隆抗体2、单克隆抗体的制备过程:获得杂交瘤细朋 将抗原注入小 淋巴细胞 效应B淋巴细月 融合用特定培养基I选出所需要的细 + »,继续培养动物细胞培养(輪选能够产生I再在培养液或提取单克隆抗体从培养液或小鼠川体外培养体内培养/从腹水中提取单克隆抗体细胞融合后培养液中有几种细朋未融合的细胞:B细胞、自身融合的细胞:骨髓瘤细胞B与B融合、瘤瘤融合杂交瘤细胞:B细胞与骨髓瘤细胞融合在韭个制备的过租中耍经过几次歸选? 實戈Z和帥培竺w二»傲白这即I筛选得到杂交瘤 细胞,II筛拡先在多孔培 养板上”在每孔只 有一个杂支轲如胞 下培养筛选出特异 抗体的细胞群 H桝巴细脳® O ® O#神朵交细腮 II (EiUl W作川 I的焰农地H川團7盈I克降匕述朵交绷胞楡不同种余2测竈分开 H m抗体檢冀阳性细脳lfi2 24 乂克肾杭体制苗过种示倉;00lfi2 24 乂克肾杭体制苗过种示倉;00忖 心克侔抗体抵*录咖小駄后帰s 乂护嶄、2丫"务克障抗那lfi2 24 乂克肾杭体制苗过种示倉;003. 单克隆制备过程中用到的生物技术手段动物细胞融合 4动物细胞培养4、单克隆抗体的应用:应用:疾病的诊断、治疗和预防。优点:特异性强、灵敏度咼,产量大
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