微生物复习题答案

1、第一、二、三章复习题一、名词解释微生物：各种各样以单细胞或多细胞群体、以及无细胞结构群体存在的低等生物微生物学：研究微生物在一定条件下的形态结构，生理生化特征，遗传变异以及进化、分类、生态等生命活动规律及其应用的一门学科。原核生物：不具有典型的细胞核（核质体），无核膜、核仁，遗传物质DNA不与组蛋白结合形成典型的染色体，无减数分裂和有丝分裂繁殖特征的细胞型生物。真核生物：具有典型的细胞核，有核膜、核仁，遗传物质DNA与组蛋白结合形成典型的染色体，有减数分裂和有丝分裂繁殖特征的细胞型生物。生物工程， 微生物工程，利用微生物的特点、性状、使微生物产生有用物质或直接用于生产的技术。培养物，在人为规定

2、的条件下培养、繁殖得到的微生物群体。纯培养物，只有一种微生物的培养物。纯培养，把特定的微生物从自然界混杂存在的状态中分离、纯化出来的技术，是进行微生物学研究的基础。显微技术，是进行显微观察时，显微镜的使用技术、标本制作技术、观察技术及生物体组成成分定性和定量分析技术菌落，单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的，有一定形态结构的子细胞生长群体。培养基，人工配制的、适合不同生物生长繁殖、积累代谢产物的营养基质及条件。无菌操作，用接种环或接种针，在无菌条件下把微生物由一个培养器皿转接到另一个培养容器。培养平板，溶化的培养基倒入无菌空平皿中，冷却凝固后盛有培养基的

3、平皿。二元培养物，只含有两种微生物，且有意识保持二者之间关系的培养物，这是具有寄生、共生关系微生物的最有效保存途径。显微镜分辨率，能辨别两点之间最小距离的能力。细菌畸型，理化因素刺激，阻碍了生长发育，引起形态的异常变化。细菌衰颓型，培养时间过长，营养成分贫乏，代谢产物积累等原因造成中毒，引起形态异常；转移到新鲜培养基内，条件适宜，可恢复原来形态基内菌丝，又称营养菌丝，吸收营养，排泄废物。气生菌丝，基内菌丝长到一定时期，长出培养基外，伸向空间的菌丝。孢子丝，气生菌丝生长发育到一定阶段，气生菌丝上分化出的可形成孢子的菌丝。孢子的形状及在气生菌丝上排列的方式随种而异。霉菌，也称丝状真菌，指生长在营养

4、基质上形成绒毛状，蜘蛛网状或絮状菌丝体的真菌酵母菌，是一群以芽殖或裂殖进行无性繁殖的单细胞真菌藻类，除苔藓植物和维管束植物以外，基本上有叶绿素，可进行光合作用，并伴随放出氧气的一大类真核生物原生动物，是一类缺少真正细胞壁，细胞通常无色，具有运动能力，并进行吞噬营养的单细胞真核生物。磷壁酸（垣酸），是G+细菌细胞壁特有的一种酸性多糖;甘油磷壁酸和核糖醇磷壁酸是五种磷壁酸的主要两种形式;壁磷壁酸通过磷酸基团与N-乙酰胞壁酸六碳羟基相连;膜磷壁酸(脂磷壁酸)跨壁层与细胞膜磷脂相连.细胞周质空间，也称壁膜间隙； G-细菌常指外膜与细胞壁之间的狭窄空间，1215nm，呈胶状，主要成分是周质蛋白，如水解酶

5、类、合成酶类（肽聚糖）、结合蛋白（运输）及受体蛋白（与细胞的趋化性相关），可通过渗透休克法（osmotic shock）或称冷休克法释放，这是基因工程蛋白质表达方式的一种。细胞壁缺陷细菌，形态多形性；染色革兰阴性；培养高滲培养基；菌落油煎蛋样。细胞质膜，是紧贴在细胞壁内侧，包围着细胞质的一层柔软、脆弱、富有弹性的半透性薄膜；细胞贮藏物，是一类由不同化学成分累积而成的不溶性沉淀颗粒细菌芽孢，某些细菌在其生长发育后期，于细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体伴孢晶体，产芽孢细菌在形成芽孢同时，在芽孢旁形成的碱性蛋白晶体内含物。生物农药糖被，包被于某些细胞壁外层、厚度不定的

6、胶状物，依有无固定层次、厚薄、包被细胞多少分为：荚膜、微荚膜、粘液层及菌胶团。荚膜可通过负染色在显微镜下观察到。鞭毛，生长在某些细菌体表、长丝状、波曲的蛋白附属物；可通过鞭毛染色法，于光学显微镜下观察或在电子显微镜下观察；也可在水浸片下观察运动方式或半固体培养基上生长的菌落状态判断是否有鞭毛存在。菌毛，也称伞毛、纤毛、线毛，是一种长在细菌体表纤细、中空、短直、数量较多的蛋白质类附属物性毛。构造和成分与菌毛相同，比菌毛长；数量仅一至少数几根。性毛一般见于革兰氏阴性细菌的雄性菌珠中；功能是向雌性菌珠（受体菌）传递遗传物质。二、问答题1.微生物特点？个体微小，结构简单；种类多，真菌10万，细菌100

7、0种以上，放线菌500种以上；分布广，无处不在，无处不有。 繁殖速度快； 代谢能力强，1mg大肠杆菌与等重人体比表面积之比为30万：1； 容易培养；易于变异。2.举例说明微生物学在生命科学研究领域中所做出的贡献。微生物基本问题：微生物分类学、生理学、生态学、遗传学、分子微生物学、细胞微生物学等；3.五界生物分类系统、三域（界）分类系统微生物组成？具有细胞结构的五界生物分类系统（Whittaker，1969）：原核生物界，细菌、放线菌、蓝藻等；真核原生生物界，藻类、原生动物等；真菌界，酵母菌、霉菌等；植物界；动物界。具有细胞结构的三域（界）分类系统（woese，1977）：细菌(Bacteria

8、)、古生菌(Archaea)、真核生物（Eukarya）。4.法国科学家Pasteur微生物学之父，卓越贡献？证实了微生物的活动，否认了自然发生学说；明确提出酒精酿造是由微生物引起的发酵；证明传染病是由病原微生物引起，提出了接种疫苗的预防方法及免疫学理论思想。发明了沿用至今的杀死有害微生物的Pasteur消毒法。5.德国科学家Koch细菌学之父，伟大功绩？首先分离、纯化、培养出炭疽杆菌、霍乱弧菌等病原微生物，并建立了一套微生物学实验研究技术；证实了病害的病原菌学说。提出了柯赫法则微生物是否是某种疾病病原体。6.荷兰人Antony van leeuwanhock划时代贡献？7.用固体培养基分离纯

9、培养物方法及特点。（1）涂布平板法（Spread plate method）适于大多数好氧微生物。（2）稀释倒平皿法（Pour plate method）（3）平板划线法（Streak plate method）适于大多数非蔓延性的微生物。（4）稀释摇管法（dilution shake culture method）不常用，适于厌氧微生物的分离。8.选择培养分离纯培养物方法及特点。设计特定的环境条件，使之适合所需微生物的生长，从而使所需微生物能从自然界混杂的群体中分离得到。 （1）利用选择培养基进行直接分离 （2）富集培养：利用不同微生物间生命活动特点的不同，在特定条件下使仅适应于该环境的微生

10、物旺盛生长，从而增加其在群落中的数量，以便从自然界中分离得到所需微生物。9.微生物菌种保藏的原理及常用方法。原理：根据微生物生理、生化特点，人工创造条件，使微生物的代谢处于不活泼，生长繁殖受抑制的休眠状态；主要三个条件是：低温、干燥和缺氧。（2）保藏方法 传代培养保藏：斜面，半固体穿刺，液体等，可密封后冷藏。 沙土保藏：霉菌孢子及产芽孢细菌。 真空冷冻干燥法保藏 冷冻法：低温冷冻（-20），超低温，液氮；液体培养物中常加15%左右甘油，速冻后保藏。 其他保藏方法：曲法，麦粒法，无水硅胶法等。10.影响光学显微镜观察效果的因素？采用那些方法改善微生物标本的观察效果？分辨率&反差；油镜。1

11、1.电子显微镜的种类及特点？与光学显微镜的异同？透射电镜、扫描电镜；电子显微镜是由电子束为“光源”的显微镜（电镜镜筒要求高真空、用电磁圈是光线汇聚、需要用荧光屏来显示或感光胶片做记录）12.光学显微镜的样本制备方法有哪些？活体观察：压片（滴）法；悬滴法；菌丝埋片法。 染色观察13.电子显微镜的样品制备常用技术？负染色技术 投影技术 超薄切片技术 冷冻蚀刻技术 整装细胞技术14.细菌的个体形态有几种？与环境条件的关系。球状：单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌，葡萄球菌； 杆状：长杆菌、短杆菌；螺旋状：弧菌、螺旋菌。柄杆菌：有柄、菌丝附器等胞质伸出物；球衣菌能形成衣鞘；支原体、变形菌具有高

12、度多型性。细菌的形态明显受环境条件的影响，培养时间、温度、培养基组成、浓度等发生改变，均引起形态的改变。幼龄阶段和生长条件适宜时，形态正常，在较老的培养基中或不正常条件下，出现异常形态。15.典型微生物菌落形态的主要特征。大小、形状、光泽、颜色、硬度、透明度、光滑度等特征。这些特征由组成菌落细胞的结构、生长行为及理化因素决定16.细菌细胞的结构。细菌的结构，可分为两部分：一是不变部分或一般结构，如细胞壁、细胞膜、细胞核、核糖体等为全部细菌细胞所共有；二是可变部分或特殊结构，如鞭毛、纤毛、荚膜、芽孢和气泡等17.细菌细胞壁功能、结构及组成？功能：固定细胞外形，保护细胞免受外力的损伤；细胞生长、分

13、裂、鞭毛运动所必须；物质运输的屏障，可以免于溶菌酶、抗生素、消化酶等对细胞的损害；与细菌的抗原性、致病性和对抗生素、噬菌体的敏感性密切相关。组成 革兰氏阳性菌的细胞壁 厚度20-80nm，化学成分简单，90%肽聚糖，10%磷壁酸。 肽聚糖层23nm，含量10%， G-细菌细胞壁的特殊组分外膜（outer membrane，由脂多糖、磷质和脂蛋白等组成，也称外壁18.磷壁酸的功能。因带负电荷，故可与环境中的Mg等阳离子结合，提高这些离子的浓度，以保证细胞膜上一些合成酶维持高活性的需要。保证革兰氏阳性菌与其宿主间的粘连。赋于革兰氏阳性细菌以特异的表面抗原。提供某些噬菌体以特异的吸附受体。贮藏磷原素

14、。调节细胞内自溶素（autolysin）的活力防止细胞死亡。19.脂多糖功能及组成。组成：类脂A&核心多糖区&o-特异侧链 是革兰氏阴性细菌致病物质内毒素的物质基础；与磷酸相似，也有吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高这 些离子在细胞表面的浓度的作用；由于LPS结构的变化，决定了革兰氏阴性细胞表面 抗原决定簇的多样性；是许多噬菌体在细胞表面的吸附受体。具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障功能。20.细胞壁缺陷细菌种类、特点及及实践意义。自发缺壁突变&人工方法去壁&自然界长期进化中形成 生物学特性：形态多形性；染色革兰阴性；培养高滲培养基；菌落油煎蛋样。实践意

15、义：壁正常有壁细菌更易导入外源遗传物质。是研究遗传规律和进行原生质体融合育种的良好实验材料21.溶菌酶和青霉素抑菌的机理。前者是溶去原有的细胞壁，后者是抑制新生细胞壁合成。22.革兰氏染色的原理。通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性菌因为细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联紧密，故遇乙醇脱色时，因失水反而是网孔缩小再加上不含类脂，故乙醇处理不会溶出缝隙。故能够呈现紫色。反之，革兰氏阴性菌因其壁薄、外膜类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，因此遇乙醇脱色后细胞退成无色，再经番红复染就成了红色。23.古生菌的细胞壁，细胞膜有哪些特征？古生菌中，除热源体属（Th

16、ermoplasma）没有细胞壁外，其余都具有与细菌类似的细胞壁，但化学成分差异较大，无真正的肽聚糖。如甲烷杆菌属的多糖骨架是由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰塔罗糖醛酸以-1,3-糖苷键连接而成，在N-乙酰塔罗糖醛酸上连接的短肽是L-Glu、L-Ala和L-Lys，肽桥是L-Glu；甲烷八叠球菌细胞壁组分是杂多糖，不含磷酸和硫酸；盐球菌属组分是糖蛋白，蛋白质中氨基酸主要是酸性Aa，可平衡环境中Na+。少数产甲烷菌的组分是蛋白质，有的是不同蛋白质，有的是同种蛋白的多聚体。24.芽孢的构造及研究芽孢的意义？某些细菌在其生长发育后期，于细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体，是

17、细菌细胞的特殊构造；由于一个营养细胞内仅生成一个芽孢，无繁殖功能 ；芽孢是生物界中抗性最强的生命体、研究芽孢的意义 菌种保藏；制定灭菌参数；细菌分类、鉴定中的重要形态学指标。25.细菌荚膜依据其存在特点可分为几种类型？荚膜&微荚膜26.细胞质膜的组成及功能？ 功能：选择性物质运输屏障；细胞维持及保护屏障；细胞壁各种组分和荚膜等大分子的合成场所；细胞代谢场所；鞭毛着生和提供其运动所需能量场所等。组成：磷脂2030%，蛋白质5070%；磷脂甘油的C3上连接的是磷脂酰乙醇胺（甘油、胆碱、丝氨酸、肌醇）及磷脂酸，不饱和脂肪酸在C2，其种类、长短及不饱和度决定膜的流动性。蛋白质分整合蛋白、周边蛋

18、白。27.贮藏物种类及特点。种类：碳源及能源类的有糖原、聚-B-羟丁酸（细胞质内、贮藏能量、降低细胞内渗透压等作用）、硫粒；氮源类：藻青素、藻清蛋白；磷源 主要功能是贮存营养28.磁小体的本质、功能及意义。主要成分是Fe3O4外被为一层磷脂、蛋白或糖蛋白膜，是单磁畴晶体，无毒，大小20100nm，每个细胞有220颗，形状为平截八面体、平行六面体或六棱柱体等；功能：导向作用，即借助鞭毛游向泥、水界面微氧环境处生活；生产磁性定向药物或抗体，以及制造生物传感器。29.荚膜的组成、功能及应用。功能：保护作用、贮藏养料，保护细菌免受金属离子的侵害；表面附着作用，细菌间的信息识别作用，堆积代谢物30.鞭毛

19、功能、着生方式？生长在某些细菌体表、长丝状、波曲的蛋白附属物；可通过鞭毛染色法，于光学显微镜下观察或在电子显微镜下观察；也可在水浸片下观察运动方式或半固体培养基上生长的菌落状态判断是否有鞭毛存在。着生方式有：一端生（一束、一根）；两端生（一束、一根）；周生、侧生31.叶绿体、线粒体、核糖体、内质网、高尔基体的功能、结构及特点。内质网 细胞质中，由脂质双分子层构成，与细胞基质相隔离，但彼此相通的囊腔和微管系统；内侧与核被膜外侧相连。膜上附有核糖体，称粗面内质网，合成和运输蛋白；不含核糖体，称滑面内质网，与脂类代谢、钙代谢相关。核糖体 一切细胞中，无膜包裹的颗粒状细胞器，功能是合成蛋白质，成分是蛋

20、白质40%、RNA60%；旺盛生长的细胞中可含107个，真核生物为80S，原核生物为70S。.高尔基体 平行堆放的平膜囊和大小不等囊泡组成的膜聚体。功能是合成、分泌糖蛋白、脂蛋白；对一些无生物活性蛋白原的酶切加工；为细胞壁及质膜的合成提供原料线粒体 真核生物氧化磷酸化反应的重要细胞器，囊状，由内外双膜包裹，囊内充满液态基质；外膜平整、内膜褶皱成嵴管状和板状；内膜和嵴中的空间除与ATP生成相关的各种蛋白质外，还含有特殊的封闭环状DNA和70S核糖体，用于自身部分蛋白的合成。.叶绿体 一种由双膜包裹，能把光能转化为化学能的绿色颗粒状细胞器，只存在于绿色植物、藻类细胞中。功能是通过光合作用，把CO2

21、和H2O合成糖，并产生氧。由叶绿体膜、类囊体基质中由单位膜封闭而成的扁平小囊、基质三部分组成。基质中含有双链环状DNA、70S核糖体、RNA、内含物及1, 5二磷酸核酮糖羧化酶。32.核小体组成及功能。是染色质的基本单位33.真核生物与原核生物鞭毛的异同。原核生物：基体、钩形鞘、鞭毛丝；真核生物：鞭杆、基体、过渡区第四章 病毒一、名词解释病毒是一类超显微的、无细胞结构的、专性活细胞寄生的生物大分子微生物，在宿主体外以成熟的毒粒存在，具有一般大分子特征；进入宿主细胞后，具有生命特征。蚀斑或空斑，病毒可在培养的细胞单层上形成肉眼可见的局部病损区域；病毒的感染单位，能够引起宿主或宿主细胞一定特异性反

22、应的病毒最小剂量病毒的效价，单位体积内病毒的感染单位数目（IU/ml）半数效应剂量，病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起 50% 发生死亡或病变的最小量。ID50 （感染性核酸，从病毒颗粒或病毒感染的细胞提取分离的核酸，导入宿主细胞，能启动病毒复制，产生子代病毒。反之为非感染性核酸。核酸的结构特征：有内含子，ORF间有重叠，较大的遗传不稳定性。）病毒的复制周期，吸附-侵入-脱壳-病毒大分子的合成（包括病毒基因的表达和复制）-装配与释放病毒的一步生长曲线，适量的病毒接种于标准培养的高浓度敏感细胞，待病毒吸附后，或高浓度稀释，或以抗病毒抗血清处理，以建立同步感染，然后继续培养，定时取样测定培养物中的病

23、毒效价，以感染时间为横坐标，病毒感染效价为纵坐标，得到的病毒特征性繁殖曲线。病毒的裂解量，每个感染细胞所产生子代病毒的平均数目；等于稳定期与潜伏期病毒效价之比，也等于稳定期受感染细胞所产生的子代病毒颗粒之和除以潜伏期受感染细胞数。噬菌体为几十至几百，动物病毒、植物病毒可达数百乃至上万病毒的非增殖性感染，病毒对敏感细胞的感染不能导致病毒繁殖，产生子代感染性毒粒。卫星病毒，寄生于与自己无关辅助病毒基因产物的病毒，是自然界存在的绝对缺损病毒，形态、结构、抗原性等均与辅助病毒不同，如HDV的辅助病毒是HBV。整合感染，某些病毒感染宿主后，其基因组整合到宿主染色体上，并随宿主分裂传递给子代细胞；通常无感

24、染性毒粒产生，但在一定条件下，可产生有感染性的病毒颗粒。溶源性，噬菌体基因组长期存在于宿主细胞内，无成熟噬菌体颗粒产生的现象。溶源性细菌，细胞中有以原噬菌体存在的噬菌体基因组的细菌。温和（溶源性）噬菌体，导致溶源性发生的噬菌体，大部分基因组整合到宿主染色体上，少数以质粒形式存在。原噬菌体，以整合于细菌染色体或以质粒存在的温和噬菌体。烈性噬菌体，感染宿主细胞的噬菌体能在细胞内正常复制并最终杀死细胞。二、问答题1、病毒的应用。昆虫病毒做为生物农药2、噬菌体污染的特征、检测方法、预防措施。发酵周期明显延长；碳源消耗缓慢 ；发酵液清淡；发酵产物形成缓慢或根本不形成；噬菌体检测会发现大量噬菌斑；电镜可看

25、到噬菌体；后果：减产， 倒罐。噬菌体检测-噬菌斑决不使用可疑菌种；严格环境卫生；活菌液严禁排放；通气加料严控；严格执行会客制度 ；设备灭菌；使用抗噬菌体菌株。 补救方法： 尽快提取产品； 加药抑制 及时更换菌种 。3、昆虫病毒做为生物农药优点。性高，毒力大，后效长，使用方便，对人畜安全，无公害，缺点危害经济动物。4、按核酸类型和结构进行的病毒分类。dsDNA病毒、ssDNA病毒、DNA和RNA逆转录病毒、dsRNA病毒、负意ssRNA病毒、正意ssRNA病毒、裸露RNA病毒和亚病毒因子 5、亚病毒因子的种类及特点。包括卫星病毒、卫星RNA、类病毒和朊病毒 6、病毒感染对细胞的影响。对原核细胞：

26、（1）抑制宿主细胞大分子合成：产生关闭蛋白，抑制DNA复制、基因转录、蛋白质合成。（2）宿主限制系统改变：噬菌体编码的酶破坏宿主限制酶系统。（3）噬菌体颗粒释放对宿主细胞的影响：分泌方式释放的噬菌体，由于壳体蛋白与宿主细胞膜结合，造成宿主细胞的免疫学性质改变；裂解释放，造成宿主细胞死亡。（4）溶源性感染对细胞的影响：免疫性，对同源噬菌体有特异免疫力；溶源转变，除免疫性外表型的改变，如致病性。对真核细胞：（1）病毒感染的致细胞病变效应：病毒基因表达产物引起，病毒复制的次级效应，毒性致死或活化程序死亡途径。（2）病毒感染对宿主大分子合成的影响：宿主细胞转录的抑制；宿主细胞翻译的抑制；宿主细胞DNA

27、复制的抑制（3）病毒对细胞结构的影响：病毒对宿主细胞膜的影响；病毒对细胞骨架的影响；包涵体，复制、转录产物或毒粒累积在宿主细胞的特定区域；细胞凋亡，关闭或干扰正常合成代谢诱发凋亡、蛋白因子作用于凋亡相关蛋白，细胞抵制病毒感染的方式之一。7、温和性噬菌体的存在方式。8、缺损病毒的种类。干扰缺陷颗粒；卫星病毒；条件缺损病毒；整合的病毒基因组9、非增殖性感染的类型。流产感染、局限性感染、潜伏感染10、病毒的复制过程。病毒进入细胞后，具有感染的毒粒消失，存在于宿主内的是具有繁殖性的病毒基因组；繁殖方式是复制，即接管宿主的生物合成机构，按病毒的基因组特性，合成大分子，组装成成熟的病毒毒粒，然后释放到胞外

28、。11、病毒的结构、核衣壳的对称形式。核衣壳的对称形式 A 螺旋对称型 C 二十面体立体对称型 B 复合对称型 12、噬菌体的种类。13、病毒蛋白质的种类。结构蛋白（衣壳蛋白、包膜蛋白、基质蛋白、毒粒酶）；非结构蛋白14、病毒核酸的种类。DNA，RNA之分：一种病毒只含有一种核酸；动物病毒DNA、RNA均有，植物病毒大部分为RNA，少数为DNA，微生物病毒大部分为DNA，少数为RNA； 环状，线状之分（闭合、开放）：除dsRNA外，其它均有；基因组单、双倍体：逆转录病毒为双倍体，其它为单倍体。 单双链（single strsnd，ss/double strand，ds）之分：ssDNA、ssR

29、NA，dsDNA、dsRNA；正负链之分：+ssRNAmRNA、-ssRNA、±RNA；+ssDNAmRNA、-ssDNA。15、动物病毒培养的常用宿主。鸡胚、组织培养、胚胎培养16、病毒的特征。形态极其微小，必须在电镜下才能观察，一般具过滤性；没有细胞构造，称分子生物；主要成分是核酸和蛋白质两种；每一种病毒只含一种核酸，DNA或RNA；既无产能酶系，也无蛋白合成系统;利用宿主细胞设施进行增殖，不存在个体生长和二均分裂等细胞繁殖方式；在宿主活细胞内营专性寄生；在离体条件下，能以无生命的化学大分子状态存在，并可形成结晶；对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感。第五章 微生物的营养名词解释微

30、生物营养，微生物吸取和利用营养物质的过程。碳源，构成微生物细胞或代谢产物中碳架来源的营养物质。 功能：（1）C素构成细胞及代谢产物的骨架；（2）C素是大多数微生物代谢所需的能量来源。氮源，构成微生物细胞和代谢产物中氮素来源的营养物质。 功能：为微生物提供合成细胞物质、代谢产物的原料，氮源一般不做能源，只有硝化细菌利用铵盐，亚硝酸盐做氮源，同时也做能源。生长因子（生长因素），微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生长因素基础培养基，满足大多数微生物营养需要的培养基。选择培养基，在基础培养基内加入某种化学物质以抑制不需要微生物的生长，从而促进某种微生物的生长，如马丁氏培养基。加富培养基，根据某一微生物

31、的营养物质要求，在基础培养基中加入该种微生物所需特定营养物，以便该种微生物生长良好。鉴别培养基，在基础培养基内加入某种试剂，以便培养后发生某种变化，从而区别不同类型的微生物，如伊红美兰培养基。单纯扩散，物理扩散作用，被运输的物质是靠细胞内外的浓度差或电位差来驱动，不消耗能量，气体、水、脂溶性物质都是通过这种方式进出细胞内。促进扩散，促进扩散以物质的浓度梯度为动力，由载体蛋白（透性酶：特异性较强；运输的过程中，本身不发生变化；加快物质运输的速度）帮助完成，速度快，特异性较强。主动运输，在能量参与下，由膜载体逆浓度梯度在细胞内积累营养物质过程。基团转位。 主动运输的另一种方式，在能量参与下，由膜载

32、体逆浓度梯度在细胞内积累营养物质过程，同时被运输的物质发生化学变化。许多糖靠基团移位进行运输，如微生物是通过磷酸转移酶系统来运输的。问答题1、 胞吞和胞饮的异同。胞吞作用：膜泡中包含的是固体；胞饮作用：膜泡中包含的是液体。 形成过程：吸附期，膜伸展期，膜泡迅速形成期，附着膜泡形成期，膜泡释放期。2、 磷酸转移酶系统的基团转位过程。3、 主动运输的特点。 被运送的物质可逆浓度梯度进入细胞内；必需有能量参加；有膜载体参加，膜载体发生构型变化；被运送物质不发生任何变化。4、 单纯扩散和促进扩散的异同。单纯扩散特点：物质进出细胞的动力是细胞内外的浓度差。不消耗能量。 没有特异性，被运输物质不与膜上物质

33、发生任何反应，物质不发生化学变化。促进扩散特点：物质运输动力是细胞外的浓度差； 运输过程不消耗能量；有膜载体参加，多发生在真核微生物，原核生物少见。5、 配制培养基的原则及注意事项。（1） 微生物的营养特点（2）培养微生物的目的（3）营养成分配比适当：主要是C/N，菌体生长与代谢物积累、速效与迟效（4）控制微生物的培养条件 pH值：不同微生物要求不同；加缓冲液；加碳酸钙；流加酸碱。 调节培养基的渗透压：加盐、分别灭菌以免沉淀产生。 氧化还原电位适当。6、 不同固体培养基的凝固剂要求。 固体培养基：在液体培养若加入凝固剂；常用于微生物分类鉴定和保藏菌种。琼脂固体培养基、明胶培养基、硅胶固体培养基

34、、天然固体基质。 半固体培养基：液体培养基中加入少量琼脂（0.30.6%），用于观察带鞭毛细菌的生长。 液体培养基：不加凝固剂的培养基，营养物质分布均匀，微生物能与营养物质充分接触，利用适合积累代谢产物。多用于生理研究和发酵工业生产中。7、合成培养基、天然培养基、半合成培养基的特点。合成培养基：营养物质的成分及其浓度完全清楚，重复性强，适合定量研究工作，但微生物生长缓慢。天然培养基：生物组织、浸出物或生物制品配制而成；化学成分复杂、不详、营养丰富，不稳定、不精确。微生物生长良好，成本低廉，适于生产。半合成培养基：天然培养基中加入某种已知的无机盐类或合成培养基中加入某些天然有机成分。能更有效的满

35、足微生物的营养要求，应用广泛。8、不同种类微生物的常用培养基。细菌培养基：LB、 牛肉膏蛋白胨培养基等；放线菌培养：高氏一号培养基等； 霉菌培养基：查氏培养基，土豆蔗糖培养基等；酵母培养基：麦芽，YPD培养基等。9、微生物的营养类型及特点。自养微生物光能自养微生物（光能无机营养型）、化能自养微生物；异养微生物（有机营养型）光能异养微生物、化能异养微生物（化能有机营养型）10、营养物质的功能。11、如何理解生理酸性、生理碱性氮源?生理酸性氮源：有机氮源，氨盐； 生理碱性氮源：硝酸盐。第六章、微生物代谢名词解释初级代谢，通过分解和合成代谢，生成维持生命活动物质和能量的过程次级代谢，以初级代谢产物为

36、前体，合成一些对生命活动无明确功能的物质过程。生物氧化，微生物在细胞内酶的催化下，把获得的营养物质氧化，产生能量的过程。工业发酵，利用微生物的代谢作用，把底物转化成中间产物，获得某种工业产品或进行有益的过程。发酵，发酵是指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。有氧呼吸，以分子氧为最终电子受体的生物氧化过程。无氧呼吸。以无机物为最终电子受体的生物氧化过程。问答题1、 次级代谢的特点及调节方式。特点： 通常在对数生长后期产生，与生长不偶联； 催化反应的酶专一性不高； 易受环境条件的影响； 初级代谢产物是前体；物种不同，代谢产

37、物不同。调节方式：谢对次级代谢的调节：酶活性调节、酶量调节； 碳、氮代谢物的调节-生长与代谢物形成不偶联； 膜透性调节； 能荷调节； 诱导作用：类似物诱导； 磷酸盐调节。2、 分支合成途径的调节方式。1）、同功酶调节2）协同反馈抑制（末端产物均过量3）积累反馈抑制：末端产物过量时，有抑制作用；均过量时，抑制作用累加。4）顺序反馈抑制3、 酶活性的调节方式。（1）变构调节（2）共价修饰（3）酶原激活（4）同功酶调节4、 微生物CO2的同化方式。乙醛酸循环 丙酮酸羧化支路 甘油酸途径：乙醇酸、草酸、甘氨酸底物，转化为乙醛酸，缩合成羟基丙酮酸半醛，还原成甘油酸进入EMP途径。5、 固氮微生物的种类。

38、自生固氮菌：好氧自生固氮菌（固氮菌属）；兼性厌氧自生固氮菌；厌氧自生固氮菌（巴氏芽孢梭菌）。 共生固氮菌：根瘤（豆科植物）；植物（地衣，满江红，鱼腥藻）联合固氮菌：根际、叶面、动物肠道等处的固氮微生物。6、 微生物CO2的固定方式。 尔文循环 还原性三羧酸循环固定CO2 还原单酸循环7、 能量转换方式。（1）底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation)：物质在生物氧化过程中，生成一些含有高能键的化合物直接偶联ATP或GTP的合成；存在与发酵过程中及呼吸过程中。 （2）氧化磷酸化 生物氧化过程与电子传递链偶联产生ATP的过程。 （3）光合磷酸化 环式光合磷酸化

39、：只有一个光反应系统，有光反应和暗反应；不放氧；产生ATP不产还原剂NADH2，固定CO2所需NADH2来自电子传递。8、同型乳酸发酵与异型乳酸发酵的异同点。同型乳酸发酵：EMP途径，产物只有乳酸； 异型乳酸发酵：己糖，HMP途径， HK途径产生3-磷酸甘油醛、乙酰磷酸，终产物乙酸、乳酸；戊糖， HMP途径， PK途径产生3-磷酸甘油醛、乙酰磷酸。9、底物脱氢的四种途径。EMP、HMP、ED、磷酸解酮酶途径。10、细菌酒精发酵与酵母酒精发酵的异同。11、酵母发酵类型。酵母一型发酵：产物为乙醇； 酵母二型发酵：甘油发酵（磷酸二羟丙酮）；酵母三型发酵；乙醇、乙酸（歧化反应）、甘油。第七章、微生物的

40、生长繁殖及其控制名词解释：微生物生长，微生物通过代谢作用，将不断吸收的营养物质变成细胞物质，原生质量增加，体积增大的生物学过程。微生物繁殖，微生物个体数目增加的生物学过程。微生物发育，微生物生长到微生物繁殖这一量变到质变的过程。微生物群体生长，在一定时间和一定条件下细胞数量的增加。微生物生长曲线，分批培养过程中，以细胞数的对数或增长速率为纵坐标，以培养时间为横坐标绘制的反映细胞增值规律的曲线。同步培养使群体中微生物转换成同时进行生长或分裂群体细胞的培养方法。同步生长：群体细胞处于同一生长阶段，并同时进行分裂的生长方式。连续培养，在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物以恒定的比生长速率生

41、长并能持续下去的培养方法。品温，发酵工业培养微生物的温度。微生物最适（最低、最高）生长温度，最低生长温度：微生物群体能进行生长繁殖的最低温度界限。最适生长温度：微生物群体生长繁殖速度最快的温度。致死温度，在一定时间内（10分钟）完全杀死某一微生物的最低温度。致死时间，在一定基质中， 121.1，加热杀死一定数量微生物所需的最短时间。嗜热微生物，化学疗剂，能直接干扰病原微生物的生长繁殖，用于治疗感染性疾病的化学药物。 特点：选择性毒性。抗代谢物，结构上与生物必须的代谢物类似，可以和特定的酶结合，阻碍酶的功能；只有正常代谢物量少时，才有效。抗生（菌）素，微生物产生的，具有特异性抗生作用的一类次生代

42、谢产物。灭菌，杀死物体上全部微生物的方法。商业灭菌，经过杀菌处理后，按规定的微生物检验方法，无活微生物检出，或仅能检出非病原微生物，但符合卫生要求。消毒，杀死或消除物体上的病原微生物的方法；消毒剂。防腐，用理化方法防止、抑制微生物生长繁殖的方法；防腐剂。化疗，利用对病源菌具有高度毒力而对宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病源微生物的生长繁殖。巴斯德灭菌法，61.762.8º处理30min或71.6º度处理15min；是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的方法。酚价（石炭酸系数）：定时间内，杀死全部供试微生物的最高稀释度与达到同样效果的石炭酸最高稀释度的比值。是微生物学的杀

43、菌力标准。问答题：1、 直接计数法与平皿菌落计数法的异同直接计数；利用特定的细菌计数板或血球计数板，在显微镜下计数一定容积里的样品中微生物数量。 特点：总数，不分死活平皿菌落计数，也称活菌计数：每个活细胞在适宜的培养基和良好的生长条件下生长形成一个菌落。 特点：活细胞数，污染，烫死，未长出，不适合丝状微生物。2、 细菌的群体生长规律及特点。延滞期（特点：生长速率常数等于零，体积增长快，代谢活力强，RNA含量增加，对不良条件抵抗能力降低。）、指数期（特点： 活菌数和总菌数接近； 酶系活跃，代谢旺盛。生长速率最大，generation time最短； 细胞的化学组成及形态，生理特性比较一致。）、稳

44、定期（活菌数保持相对稳定，总菌数达最高水平；初级代谢物积累达到最高峰；芽孢杆菌这时开始形成芽孢。细胞及初级代谢生产收获时期）、衰亡期（细菌死亡数大于增殖数,活菌数明显减少,群体衰落；细胞出现多形态,大小不等的 畸形,变成衰退型；细胞死亡,出现自溶现象。）3、 微生物同步培养的方法及特点。（1）选择法，或称机械法（密度梯度离心法 过滤分离法 硝酸纤维素滤膜法特点：不影响菌体代谢，生命活动正常；同一生长阶段大小不一致的微生物不适宜。）（2）诱导法，也称调节生理条件法（温度诱导、 营养成分控制、DNA合成控制、光照与暗培养，芽孢菌的培养与加热。 特点：影响菌体代谢，生命活动不正常；同一生长阶段大小不

45、一致的微生物较适宜。）4、 连续培养的方法及特点。恒化连续培养 恒浊连续培养 优点：缩短发酵周期；便于自动控制；产物质量均一； 缺点：菌种易退化；易染杂菌。5、 微生物高密度培养的目的及措施。目的主要是用于基因工程菌生产多肽类药物 措施：微生物在液体培养基中细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术。6、 丝状真菌的生长繁殖方式。断裂繁殖、无性孢子繁殖、有性孢子繁殖7、 丝状真菌的无性及有性孢子种类。无性孢子：分生孢子（曲霉、青霉）；孢囊孢子（根霉、毛霉；游动孢子，水霉）；节孢子（白地霉）；后垣孢子（总状毛霉）。有性孢子：卵孢子（同丝水霉）；接合孢子（根霉、毛霉；同宗配合，异宗配

46、合）；子囊孢子（子囊菌纲）；担孢子（担子菌纲）。8、 酵母菌的生长繁殖方式、孢子种类。无性繁殖 芽殖：主要繁殖方式； 裂殖：八孢裂殖酵母；无性孢子：掷孢子（掷孢酵母）；节孢子（白地霉）；厚垣孢子（假丝酵母）。有性繁殖 子囊孢子：酵母菌生长后期，通过细胞核的减数分裂，在细胞内产生两种性质不同的四个单倍体细胞-子囊孢子，含有两个细胞，两个细胞的酵母菌称子囊。9、 微生物生长测定有哪些方法？10、 黄胺类药物抗菌的机制。11、 在微生物培养中，如何缩短其生长的延迟期，可以在菌种培养基和其他方面采取哪些措施？12乙醇杀菌机理?脱水剂、蛋白质变性剂、脂溶剂；70乙醇杀菌效果最好。浓度50%以下只能抑菌；

47、浓度高使蛋白凝固于菌体表面形成膜；抑制乙醇进入细胞。13影响灭菌消毒的因素？菌种特性：种类、菌龄、数量； 环境因素：温度、时间、介质成分、pH值等； 消毒、防腐剂特性：种类、浓度。14、常用灭菌方法及特点。高温灭菌、热灭菌、焚烧灭菌法、烘烤（干热空气）灭菌法：、火焰灭菌：接种工具、湿热灭菌、间歇灭菌法15、常用消毒剂、防腐剂种类及特点。 机理：改变膜透性，影响物质交换；氧化作用；原生质凝固、沉淀。要求：杀菌、抑菌能力强；有效期长；价格便宜；溶解度大；无腐蚀性；无毒或刺激性小。 种类 重金属盐：HgCL2（升汞），常用0.1%，但腐蚀性强；有机汞，硫柳汞、袂塔酚（metaphon）等用于血清、疫

48、苗保存。 AgNO3，0.1%-1%用于皮肤消毒，防止淋球菌。16、抗药性产生的原因。菌体内产生了钝化或分解药物的酶；改变细胞膜的透性而导致抗药性；救护途径；泵出机制；细胞内被药物作用的部位发生了改变，目前典型的例子是核糖体发生了改变。 抗生素 核糖体结合 蛋白质不能合成氧化剂 K2MnO4，0·13用于皮肤，果品、餐具消毒。 H2O2，3%用于清洗伤口、口腔粘膜消毒。 卤素：氯，碘是常用的消毒剂。 碘，杀菌力强，37碘溶于7083的乙醇中成碘酒。机理：Tyr+I2二碘酪氨酸。氯及氯化物常用于水及食品消毒，与水结合放出原子氧（O）用于消毒; 次氯酸钙0.5-1%用于饮水、厕所粪便处理

49、，碱性强； 氯，0.2-1ppm用于饮水消毒。 氟，30%硒氟酸,可防止霉菌的生长。表面活性剂： 新洁尔灭，0.05-0.1%用于皮肤、器械表面消毒。 杜灭酚， 0.05-0.1%也用于消毒。其他消毒防腐剂 硫磺，还原作用，2-3g/m3直接燃烧。 石灰，CaO+水（4:1）。影响灭菌消毒的因素17、主要抗菌素的抑菌机制。青霉素：抑制细胞壁合成； 多粘菌素、制霉菌毒：影响膜透性； 链霉素、氯霉素：抑制蛋白质合成；争光霉素、博来霉素：与DNA结合，干扰DNA复制；丝裂（自力）霉素：与DNA交联，破坏DNA复制；放线菌素D（更生）：与DNA结合，阻止转录。18、实验室及生产中常用的微生物培养方法及

50、特点。19、理化因素对微生物生长繁殖的影响。第八章 微生物遗传变异及育种名词解释：遗传性，亲代生物通过传递给子代的一套遗传信息而保持其相同形状的特性，遗传是相对稳定的。变异性，在遗传物质水平上发生改变，而引起相应性状发生改变的特性，变异是可以遗传的。基因型（遗传型、因子型），决定生物遗传性的物质基础特征，即全部遗传因子特征。基因，具有特定核苷酸序列，能自我复制的遗传功能单位；结构基因、调节基因。密码子，遗传的信息单位，核苷酸的排列顺序，三联密码；64种。质粒，核外环状小型DNA，独立复制稳定遗传突变，生物体表型突然发生了可遗传的变化；包括基因突变和染色体畸变基因突变，DNA链上的一对或少数几对

51、碱基发生改变而引起的表型改变；分为自发突变和诱变自发突变，某些微生物在没有人工参与下所发生的突变。染色体畸变，某些理化因子，如射线，紫外线，亚硝酸等，除能引起点突变外，还会引起DNA分子大损伤，包括染色体易位，倒位，缺失，重复等，即为染色体畸变。诱变，突变率，一个细胞在每一世代中发生突变的机率，或单位群体繁殖一代过程中所形成突变体的个数；移码突变，由于诱变剂引起DNA分子中缺失或增加少数几个碱基对，造成突变点以后全部遗传密码转录与转释发生错误。诱变育种，利用理化因素处理微生物细胞群体，促使突变频率大幅度提高，然后选出少数优良性状的菌株，供科研及生产使用基本培养基，完全培养基，补充培养基，野生型

52、，原养型，菌种退化，是群体中一个从量变到质变的逐步演变过程菌种复壮，狭义：菌种已退化，通过纯种分离、性能测定等方法，找出未退化少数个体，恢复菌种原有典性状。广义：未退化菌种的纯化分离、性能测定工作，以便性能提高。基因重组（遗传重组），把两个不同性状个体细胞内的遗传物质转移到一个个体细胞内并使之发生遗传变异的过程。转化，受体细胞直接吸收来自供体细胞的DNA片断，并把它整合到自己的基因组中，从而获得供体细胞部分遗传性状。感受态，受体细胞能接受转化的生理状态。转化因子，游离的片断；由供体提供；自然情况下可由细菌细胞自行裂解产生；实验室里通过提取获得；双链有转化能力，单链没有。转导，遗传物质通过噬菌体

53、携带而转移的基因重组。普遍性转导，噬菌体DNA不结合到寄主染色体；噬菌体蛋白质包裹寄主任何一部分DNA片段。局限性转导，噬菌体DNA整合到寄主染色体上；噬菌体DNA与寄主染色体特定基因发生交换转染，用噬菌体或病毒（包括载体）去感染感受态细胞，进而产生后代溶源转变，温和噬菌体的基因整合到宿主核基因组上，而使宿主获得除免疫外的新性状现象接合，供体、受体完整细胞直接接触而传递遗传物质，进行基因重组有性杂交，性细胞接合后随之发生染色体重组，并产生遗传性后代的一种基因重组方式。准性生殖，：同生物不同来源的体细胞融合后，不通过减数分裂而导致低频率的基因重组。性导，原生质体融合. 通过人工方法，使遗传性状不

54、同细胞的原生质体发生融合，并产生重组子的过程。1、什么是菌种衰退？衰退有哪些表现？应如何预防菌种衰退？见名词解释，表现措施：菌种保藏方法；传代次数；单细胞分离纯化等。2、-BU；亚硝酸如何引起点突变?3、从野生型和营养缺陷型混合菌液中，如何检出营养缺陷型菌珠?介绍四种方法，说明其共同原理。夹层培养法；逐个检出法；影印接种法；菌丝过滤法；限量补充培养法 4、证明核酸是遗传基础的三个经典实验的过程.1928年，Griffith 发现肺炎双球菌间的转化现象。1952年，Hershey和Chase噬菌体的感染试验1956年，Fraenkel-Conrat病毒的拆开及重建实验5、转化，接合，转导各有何特

55、点？转化：不需两个细胞直接接触，供体DNA提取出来，注入受体即可。接合：? 转导：需要噬菌体做媒介，不需要细胞间直接接触7、 普遍性转导和局限性转导各有何特点？7、原生质体融合的过程。亲本菌株的选择；原生质体制备；原生质体融合；融合子再生；融合子检出。8、 大肠杆菌的接合类型及接合结果。9、 重组与杂交有何异同？重组：分子水平上的概念；不仅限于杂交一种；杂交：细胞水平上的概念；杂交必然重组。10、营养缺陷型筛选的四个环节？诱变；淘汰野生型；检出营养缺陷型；鉴定营养缺陷型。11、 DNA损伤的修复方式？光复活、切补修复、重组修复、SOS修复。12、 基因突变规律？不对应性，稀有性，独立性，诱变性

56、，稳定性，可逆性，自发性13、 基因突变类型？碱基对置换，移码突变，染色体畸变 14、 证明基因突变结果与原因不对应的三个经典试验。15、 如何理解微生物是遗传学研究的最好材料和对象？16、已完成基因组测序工作的第一个独立生活生物是什么？第一个真核生物？第一个自养生物？17、诱变育种的过程。出发菌株的选择菌悬液的制备诱变剂及处理的剂量和方法变异菌株的分离和筛选第九章 微生物生态名词解释：生态系统，一定空间内生物成分和非生物成分通过物质循环和能量流动互相作用、互相依存而构成的一个生态学功能单位。微生物生态，环境中的微生物及与各种环境因子的相互作用。生物地球化学循环，生物圈中各种化学元素，经生物化学作用在生物圈中的转化和运动。固氮，大气中的氮被转化成氨的生化过程氨化作用，有机氮化物转化成氨的过程。硝化作用，无机化能硝化细菌在好氧条件下将氨氧化成硝酸盐的过程。同化硝酸盐还原，硝酸盐