分光光度法测定水果中Vc的含量

1、综合性、设计性实验报告（本科学生姓 名：杨道林学 号：2011021157王丽萍2011021143杨文英2011021144张崇斌2011021160专 业：化学班 级：2011 级实验课程名称：分光光度法测定 水果中 Vc 的含 量指导教 师及职 称：郭老师 高级实 验师开课学期：2012 至 2013 学年 下 学期上课时2013 年 6 月 9间：日一、实验设计方案实验序号及名称：分光光度法测定水果中 Vc 的含量小组合作： 是 否实验时间：2013.6.182013.6.19小组号： 4 号 成员：杨道 林、杨丽萍、 杨文英、张崇 斌、实验目的：1. 了解柠檬、荔枝中 Vc 的含量2

2、. 学习如何选择吸光度分析的实验条件3. 巩固分光光度法的应用实验设备及仪器组成：1、实验试剂： a、Vc 溶液（称取 0.1gVc ）配成 500ml 的储备 液，移取 25.00ml（ 储备液稀释至 250ml b 、铁标准溶液( 100ug/ml )(准确称取 0.04317gNH4Fe(SO42.12H2O, 置于 烧杯中，加入 10ml,6mol/L 的盐酸和适量蒸馏水，转至 500ml 容量瓶中，稀释至刻度 c、邻二氮菲： 1.5g/L.d 、HAc 溶液 .e、 NaOH 溶液， 0.1mol/L仪器：分光光度计、 50ml 比色管、 500ml,250ml 容量瓶、吸 量管、移

3、液管三、理论依据及实验原理：Vc 分子中有烯二醇基能还原三价铁为二价铁，二价铁与 phen 生成橙红色络合物反应如下 :2Fe3+ +C6H8O6=2Fe2+ +C6H6O6 +2H+二价铁与 phen 生成的橙红色络合物，此物在 510nm 处有最 大吸收，其颜色的深浅在一定范围内与 Vc 含量成正比。查阅资料知酸度控制在 PH4.3 至 6.2 ，反应时间控制在 15min 为宜。4、实验内容、步骤 (用流程图表示及注意事项：1. 吸收曲线的绘制：两支比色管， 0.00mlvc 标液 2.00ml 标液 分别加入2.00ml phen和 4mlFe3+标液， 1mol/LHAc 定容 暗处

4、放 置 15min 440-560nm 间每隔 10nm 测一次 号的吸光度 A2. 显色剂容量的确定： 7 支 50ml 比色管 分别加入 4mlFe3+标液、 2mlVc液和 0.3ml 、0.5ml 、0.8ml 、 1.0ml 、 1.5ml 、2ml、 4ml、 6 ml 1.5g/Lphen 液， 1mol/LHAc 定容，暗处放 15min，测吸光度。3. 溶液酸度的影响： 8支50ml比色管 各加入 4mlFe3+ 标液， 2mlVc液， 2ml phen再分别加入 NaOH 0ml,0.2ml.0.5ml,1.0ml,1.5ml,2ml,2.5ml,3.0ml.1mol/LH

5、Ac 定容，暗处放置 15min,侧吸光度。4. 显色时间的影响： 1 支比色管 加入 4mlFe3+标液， 2mlVc 标液， 2mlphen1mol/L HAc 定容空白试剂作参比 ,立即侧吸光度 放置 5min,10min,15min,20min， 30min,40 min ，60min, 100min ， 120min 分别侧吸光度。5. 标准曲线的绘制： 10 支比色管 各加入 4mlFe3+标 液， 2mlphen分别加入 0ml,0.5ml,1ml,2ml,4ml,6ml,8ml,10ml Vc 标液 1mol/LHAc 定容暗处放 15min,测吸光度。6. 柠檬、梨中 Vc

6、含量的测定： 去皮、去籽的柠檬、梨分别榨汁各称 50g 定容 250ml 容量瓶 抽滤 取 5ml50ml 比色管中 加入 4mlFe3+标液， 2mlphen1mol/LHAc 定容暗处放置 15min 空白试剂作参比，测 吸光度（每种样品各测 3 次）1 参考文献：分析化学实验（第五版）上册2 河南教育学院学报3 叶世柏，食品理化方法检验指南。北京：北京大学出版社， 19916、指导教师对实验设计方案的意见：指导教师签名：年月日二、实验报告1、实验目的、设备与材料、理论依据、实验方法步骤见实验设计方案2、实验现象、数据或图谱记录：1、 吸收曲线的绘制测定时间：30min比色皿：1cm参比液

7、：水 测定人：杨 文英、王丽 萍、杨道 林、张崇斌波长（ nm）440450460470480490500吸光度（ A）0.0690.080.0880.120.1220.1240.132波长（ nm）510520530540550560吸光度（ A）0.1360.1230.090.060.0310.023Vc的吸光光度曲线波长（ nm）A（度光吸2、显色剂用量的确定测定时比色参比测定波测定间：皿：液：水长：人：杨30min1cm510nm文英、王丽萍杨道林、张崇斌显色剂 用量 （ml）0.30.50.811.5246吸光度（A）0.0230.0520.0960.1280.1330.1360.1

8、390.138显色剂用量的确定（ 度 光 吸phen（mL）系列13、显色时间对吸光度的影响比色皿：1cm参比液：水测定波长：510nm测定人：杨 文英、王丽 萍、杨道 林、张崇斌时间（min05101520吸光度（A）0.1280.1320.1480.1470.137时间（min304060100120吸光度（A）0.1360.1360.1360.1360.136显色时间与吸光度关系曲线图)A（度光1、 Vc 标准曲线的绘制2、测定时比色参比测定波测定间：皿：液：空长：人：杨30min1cm白试剂510nm文英、王丽 萍、杨 道林、张崇斌Vc 含量 00.5 1 24 6 8 10ml)Ao

9、0.0030.0030.0030.0030.0030.0030.0030.003A0.0030.0220.0340.0590.1040.1510.1960.238A-Ao00.0190.0310.0560.1010.1480.1930.235Vc标准曲线（ 度 光 吸Vc体积（ ml）3、数据处理：称取得柠檬汁质量为 50.4024g ，所测得三组吸光度值为 A=0.0225,B=0.225C=0.226 计算得柠檬汁中 vc 含量为 46.71mg100g。称取得荔枝汁质量为 50.1598g ，准确量取三份 3ml 荔枝汁实验所测得三组吸光 度值为 A=0.121,B=0.0.122 ，C

10、=0.121 计算得荔枝汁中 vc含量为 41.04mg100g。4. 注意事项 、分光光度计使用前应先预热 30 分钟； 、手拿比色皿的毛玻璃面； 、试剂加入顺序不能随意改动； 、反应时间应控制足够长，保证反应完全； 、 测定顺序从稀到浓。5、结论：分光光度法测得柠檬中 Vc 含量为 47.4mg/100g ；荔枝汁 中 vc 含量为41.04mg100g6、实验总结（1、本次实验成败之处及其原因分析：本次实验系统、完整的完成了设计实验。并使自己的动手能力、解决问题的能力等得到了训练。但也有不足之处：提前准备不充分，导致试样预处理不是很顺利；操作不规范等。总得来说，是考虑不 周、准备不充分等原因造成。（2、本实验的关键环节及改进措施：做好本实验需要把握的关键环节：铁标准曲线的绘制、试样（柠 檬）的溶解及相关处理、分光光度计的正确使用等。若重做实验，为实现预期效果，仪器操作和实验步骤应如何改进：A、规范操作实验仪器（分光光度计），使测定结果更加精