第2章-药物的鉴别试验

1、1第二章 药物的鉴别试验2主要内容主要内容第一节第一节 药物鉴别试验的定义与目的药物鉴别试验的定义与目的第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目第三节第三节 鉴别方法鉴别方法第四节第四节 鉴别试验的条件及方法验证鉴别试验的条件及方法验证3第一节第一节 药物鉴别试验的定义与目的药物鉴别试验的定义与目的p 根据药物的分子结构，采用化学、物理化学或生根据药物的分子结构，采用化学、物理化学或生物学方法来判断其物学方法来判断其真伪真伪。 p 鉴别试验用方法仅用于证实贮藏在有标签容器中鉴别试验用方法仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而非对未知物的的药物是否为其所标示的药物，而非对未

2、知物的定性。定性。 p 鉴别试验方法应专属，每个品种一般鉴别试验方法应专属，每个品种一般2 23 3条条。性状项和物理常数确认性状项和物理常数确认 鉴别项下规定的试验鉴别项下规定的试验 原原料料药药鉴鉴别别制制剂剂鉴鉴别别第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目5第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目p性状性状p一般鉴别试验一般鉴别试验p专属鉴别试验专属鉴别试验性性 状状 （Description）定义：定义： 反映药物特有的物理性质，如外观、溶解度和反映药物特有的物理性质，如外观、溶解度和物理常数等物理常数等。外 观溶解度物理常数第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目外观：外观：指

3、药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。等性质。维生素维生素B1“本品为白色本品为白色 结晶或结晶粉末；结晶或结晶粉末； 有微弱的特臭，味苦；有微弱的特臭，味苦； 干燥品在空气中迅即吸收约干燥品在空气中迅即吸收约4%的水分的水分” 性性 状状 （Description）第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目（味）（味）（色泽）（色泽）（聚集状态）（聚集状态）（臭）（臭）（色泽）（色泽）溶解度：溶解度：药品的一种物理性质，药品的一种物理性质，一定程度上反映了一定程度上反映了药品的药品的纯度、晶型或粒度纯度、晶型或粒度。药品在不同溶剂中的溶。药品在不同

4、溶剂中的溶解性能用解性能用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述。来描述。测定方法：见凡例测定方法：见凡例 性性 状状 （Description）第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目物理常数：物理常数：用于药品鉴别，反映其纯杂程度。用于药品鉴别，反映其纯杂程度。ChP2010版收载的物理常数包括：相对密度、馏程、版收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、吸收系数、黏度、熔点、凝点、比旋度、折光率、吸收系数、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值等。酸值、皂化值、羟值、碘值等。 性性 状

5、状 （Description）第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目物理常数：物理常数：用于药品鉴别，反映其纯杂程度。用于药品鉴别，反映其纯杂程度。 性性 状状 （Description）第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目熔点熔点：多数固体有机药物的重要物理常数。：多数固体有机药物的重要物理常数。鉴别鉴别方法和纯度检查手段。方法和纯度检查手段。比旋度比旋度：反映手性药物特性及其纯度的主要指标，：反映手性药物特性及其纯度的主要指标，可用区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。可用区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。吸收系数吸收系数：吸光物质的重要物理常数，用于考查：吸光物质的重要物理常数

6、，用于考查原料药的质量，原料药的质量，UV测定含量时的依据。测定方法测定含量时的依据。测定方法应按药典规定方法进行。应按药典规定方法进行。11是指依据某一类药物的共同的是指依据某一类药物的共同的化学结构化学结构或相同的或相同的理理化特性化特性，通过，通过化学反应化学反应来鉴别药物的来鉴别药物的真伪真伪。一般鉴别试验一般鉴别试验第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目有机药物有机药物-典型的官能团反应典型的官能团反应无机药物无机药物-阴离子、阳离子阴离子、阳离子一般鉴别试验一般鉴别试验第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目ChP2010ChP2010附录收载一般鉴别试验附录收载一般鉴别试验

7、： 丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类 有机氟化物类、有机酸盐有机氟化物类、有机酸盐 无机酸盐无机酸盐 (Cl- 、 SO42- 、 NO3-) 无机金属盐类无机金属盐类（Na+, K+, Ca2+, Ba2+, Li+, Fe3+ , Al3+ , Zn2+,Cu 2+, Ag+, Hg2+等）等）14第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目一般鉴别试验一般鉴别试验1.有机氟化物有机氟化物有机氟有机氟氧瓶燃烧氧瓶燃烧无机氟离子无机氟离子pH4.3 茜素氟蓝茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸亚铈蓝紫色蓝紫色络合物络合物+F-+Ce3+pH4.3碱液吸收碱液吸收15

8、2. 有机酸盐有机酸盐(1) 水杨酸盐水杨酸盐水杨酸水杨酸 + FeCl3中性条件中性条件弱酸性条件弱酸性条件红色配位化合物红色配位化合物紫色配位化合物紫色配位化合物6 + 4FeCl3+ 12HCl水杨酸盐水杨酸盐+稀盐酸稀盐酸水杨酸（白色沉淀）水杨酸（白色沉淀） 溶于醋酸溶于醋酸铵铵 鉴别方法二：鉴别方法二：鉴别方法一：鉴别方法一：16(2) 酒石酸盐酒石酸盐供试品溶液（中性）供试品溶液（中性）+ 氨制硝酸银氨制硝酸银 银镜银镜水浴中水浴中HOCHCOOHHOCHCOOH+2Ag(NH3)2OHHOCCOONH4HOCCOONH42Ag+2NH3+2H2O 水浴中水浴中173.芳香第一胺类

9、芳香第一胺类供试品供试品+ 稀盐酸稀盐酸0.1mol/L亚硝酸钠亚硝酸钠碱性碱性 - -萘酚试液萘酚试液橙黄色橙黄色到到猩红色猩红色沉淀沉淀N2+Cl-.+NaNO2+2HCl+NaCl+2H2ON2+Cl-.+NaOH+NaCl+2H2O18 4.托烷生物碱类托烷生物碱类此类生物碱中具有莨菪酸结构，此类生物碱中具有莨菪酸结构，有有Vitali反应反应,显紫色显紫色。 水解水解3HNO3HNO3 3三硝基衍生物三硝基衍生物KOHKOH(C(C2 2H H5 5OH)OH)KOHKOH深紫色深紫色莨菪酸莨菪酸托烷类托烷类195.无机金属盐无机金属盐（Na, K, Ca, NH4+)(1) (1)

10、 钠盐、钾盐、钙盐、钡盐的焰色反应钠盐、钾盐、钙盐、钡盐的焰色反应 焰色反应：焰色反应：Na显鲜黄色显鲜黄色；K显紫色显紫色；CaCa显砖红色显砖红色 Ba Ba：黄绿色黄绿色，自绿色玻璃中透视，火焰呈，自绿色玻璃中透视，火焰呈蓝色蓝色 供试品供试品 + NaOH 氨气氨气使湿润的使湿润的红色红色石蕊石蕊试纸变试纸变蓝蓝使硝酸亚汞试液湿使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显润的滤纸显黑色黑色(2) (2) 铵盐铵盐206. 无机酸根无机酸根 氯化物：氯化物：Cl- + Ag+ AgCl 白色乳状白色乳状 Cl- + MnO2 Mn2+ + Cl2 硫酸盐：硫酸盐： SO42- + Ba2+ BaSO4 白

11、色白色 SO42- + Pb2+ PbSO4 白色白色 加盐酸，无白色沉淀加盐酸，无白色沉淀(与硫代硫酸盐区别与硫代硫酸盐区别) 硝酸盐硝酸盐: Cu + NO3- Cu(NO3)2+2NO（红棕色红棕色） Fe2+ +NO3- Fe 3+ +NO（棕色环棕色环） 区分区分 NO3- 、NO2- H2SO4使湿润的使湿润的KI_ _淀淀粉试纸变蓝粉试纸变蓝KMnO4褪色褪色 NO2- 不褪色不褪色 NO3-H2SO4H2SO4在醋酸铵试液或在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中氢氧化钠试液中溶解溶解21第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目 是证实是证实某一种某一种药物的依据。药物的依据。 根据一类

12、药物中根据一类药物中每一种每一种药物化学结构的差异及理药物化学结构的差异及理化特性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴化特性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。别药物的真伪。专属鉴别试验专属鉴别试验22共性共性丙二酰脲丙二酰脲-CONHCONHCO- 可与某些金属离子（可与某些金属离子（Ag+、Cu2+、Hg2+等）反应呈色或产生沉淀等）反应呈色或产生沉淀巴比妥类药物巴比妥类药物R+2AgNO3+2HNO3一般鉴别试验一般鉴别试验23与与Pb2+反应生成黑色反应生成黑色PbS甲醛硫酸反应甲醛硫酸反应碘取代反应碘取代反应专属鉴别试验专属鉴别试验 硫喷妥钠硫喷妥钠司可巴司可巴比妥比妥

13、苯巴苯巴比妥比妥 24第二节第二节 药物试验的项目药物试验的项目 是证实是证实某一种某一种药物的依据。药物的依据。 根据一类药物中根据一类药物中每一种每一种药物化学结构的差异及理药物化学结构的差异及理化特性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴化特性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。别药物的真伪。 一般鉴别试验依据某类药物共同的特点，区别不一般鉴别试验依据某类药物共同的特点，区别不同类药物。同类药物。 专属鉴别试验在一般鉴别试验的基础上，利用各专属鉴别试验在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，鉴别各个药物单体。种药物的化学结构差异，鉴别各个药物单体。专属鉴别试验专属

14、鉴别试验25指纹图谱与特征图谱鉴别法指纹图谱与特征图谱鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 显微鉴别法显微鉴别法 生物学法生物学法 第三节第三节 鉴别方法鉴别方法26（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 供试品加入适当的试剂，在一定条件下，发生化学反应，通供试品加入适当的试剂，在一定条件下，发生化学反应，通过产生可观测到的明显现象，来鉴别药物真伪的方法。过产生可观测到的明显现象，来鉴别药物真伪的方法。化学鉴别法特点化学鉴别法特点反应原理应明确反应原理应明确操作简便、反应快速、实验成本低、应用广操作简便、反应快速、实验成本低、应用广但专属性比仪器分析法差但专属性比仪器分析法差第三节第三节 鉴别方法鉴别方法2

15、7指纹图谱与特征图谱鉴别法指纹图谱与特征图谱鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 显微鉴别法显微鉴别法 生物学法生物学法 呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 使试剂褪色鉴别法使试剂褪色鉴别法荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 测定生成物的熔点测定生成物的熔点28第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。应，生成易于观测的有色产物。呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 酚羟基的三氯化铁呈色反应：酚羟

16、基的三氯化铁呈色反应：用于酚羟基或水解后产生酚羟基用于酚羟基或水解后产生酚羟基 有机氟化物的茜素氟蓝法有机氟化物的茜素氟蓝法 芳香第一胺类重氮化芳香第一胺类重氮化-偶合反应：偶合反应：用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基托烷生物碱类托烷生物碱类-Vitali反应反应肾上腺皮质激素类的四氮唑肾上腺皮质激素类的四氮唑含羰基结构的苯肼反应含羰基结构的苯肼反应氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应双缩脲反应双缩脲反应29三氯化铁呈色反应（酚羟基）三氯化铁呈色反应（酚羟基）蓝紫色对乙酰氨基酚呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 30肾上腺皮质激素类的四氮唑肾上腺皮质

17、激素类的四氮唑+2e+2eHH四氮唑四氮唑甲甲臜臜 皮质激素具有还原性，能将四氮唑还原为有色皮质激素具有还原性，能将四氮唑还原为有色甲甲臜臜 呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 31含羰基结构的苯肼反应含羰基结构的苯肼反应+ +H+H2 2O O苯肼苯肼苯腙苯腙呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 32氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应左旋多巴左旋多巴+CO2+3H2O+例如：例如：呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 33双缩脲反应双缩脲反应紫内酰胺类碱性酒石酸铜（开环分解）（开环分解）2O HCON H2C uC O H NCC H3C O O N aC H3SNH NC H3

18、C H3C O O N aCSNOH OH OOC H2N H2C H2HH蓝紫色蓝紫色呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 34第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成沉淀供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成沉淀沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 还原性基团的银镜反应（异烟肼）还原性基团的银镜反应（异烟肼）丙二酰脲类的硝酸银反应丙二酰脲类的硝酸银反应氯化物的银盐沉淀氯化物的银盐沉淀含氮杂环类与生物碱沉淀剂（碘化铋钾、硅钨酸）含氮杂环类与生物碱沉淀剂（碘化铋钾、硅钨酸）的沉淀反应的沉淀反应苯甲酸盐类的三氯化铁反应苯甲酸盐类的三

19、氯化铁反应生成氧化亚铜红色沉淀反应生成氧化亚铜红色沉淀反应（如肾上腺皮质激素类、葡萄糖）如肾上腺皮质激素类、葡萄糖）与重金属离子的沉淀反应（利多卡因）与重金属离子的沉淀反应（利多卡因）磺胺类药物的铜盐反应磺胺类药物的铜盐反应35丙二酰脲类的硝酸银反应丙二酰脲类的硝酸银反应+2AgNO3+2HNO3Cl- +Ag+AgCl 氯化物的银盐沉淀氯化物的银盐沉淀36含有还原性基团的药物含有还原性基团的药物银镜反应银镜反应+AgNO3+NH3H2OAg异烟肼异烟肼葡萄糖葡萄糖+碱性酒石酸铜试液碱性酒石酸铜试液（Fehling试液试液 ）氧化亚铜氧化亚铜+葡萄糖酸葡萄糖酸 生成氧化亚铜红色沉淀反应生成氧化

20、亚铜红色沉淀反应37苯甲酸盐类的三氯化铁反应苯甲酸盐类的三氯化铁反应+3FeCl3+OH-+7NaCl+2Cl-赭色沉淀赭色沉淀38利多卡因与重金属离子反应利多卡因与重金属离子反应2+CoCl2H+亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色细小钴盐沉淀39含氮杂环类的生物碱的沉淀反应含氮杂环类的生物碱的沉淀反应苯并二氮杂苯并二氮杂 类类 +BiI3 橙红色沉淀橙红色沉淀 氯氮氯氮氟西泮氟西泮氯硝西泮氯硝西泮+ 12W03Si02 灰白色沉淀灰白色沉淀4KI C2H5OH白色白色C2H5OH黄色黄色阿托品阿托品+HgCl2东莨菪碱东莨菪碱+HgCl2托烷类生物碱托烷类生物碱40吡啶环类吡啶环类2+CuSO4+2N

21、H4SCNCu(SCN)2 +(NH4)2SO4草绿色配合物沉淀草绿色配合物沉淀41磺胺类药物的成铜盐反应磺胺类药物的成铜盐反应 磺酰氨基上的活泼氢原子，可被某些金属离子取代，磺酰氨基上的活泼氢原子，可被某些金属离子取代，生成有色的金属盐沉淀。磺胺类药物钠盐溶液，加硫酸生成有色的金属盐沉淀。磺胺类药物钠盐溶液，加硫酸铜试液生成不同颜色的铜盐沉淀，可供区别及鉴别。铜试液生成不同颜色的铜盐沉淀，可供区别及鉴别。42第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法药物本身在可见光下发射荧光药物本身在可见光下发射荧光 如：硫酸奎宁溶液显蓝色荧光如：硫酸奎宁溶液显蓝色荧光药物与适当试剂反应

22、后发射荧光药物与适当试剂反应后发射荧光如：氯普噻吨如：氯普噻吨+HNO+HNO3 3后，紫外下显绿色后，紫外下显绿色荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 VB1硫色素（蓝色荧光）硫色素（蓝色荧光）碱性碱性K3Fe(CN)643第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰胺类药物，大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后加热产生氨气。可经强碱处理后加热产生氨气。红色石蕊试纸变蓝红色石蕊试纸变蓝硝酸亚汞试液湿润的试纸显黑色硝酸亚汞试液湿润的试纸显黑色气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 44第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（一

23、）化学鉴别法（一）化学鉴别法化学结构含硫药物，可经强酸处理后加热产生硫化氢气体化学结构含硫药物，可经强酸处理后加热产生硫化氢气体气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 硫鸟嘌呤硫鸟嘌呤7H2O强酸强酸H2S（臭鸡蛋气味）（臭鸡蛋气味）使醋酸铅试纸变黑使醋酸铅试纸变黑45第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸汽含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸汽含醋酸酯和乙酰胺类的药物，经硫酸水解后，加乙醇含醋酸酯和乙酰胺类的药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。可产生醋酸乙酯的香味。46第三节第三节 鉴

24、别方法鉴别方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法使试剂褪色的鉴别法使试剂褪色的鉴别法 维生素维生素C的二氯靛酚反应的二氯靛酚反应氧烯洛尔的高锰酸钾反应氧烯洛尔的高锰酸钾反应司可巴比妥那的碘试液反应司可巴比妥那的碘试液反应47维生素维生素C C与二氯靛酚反应与二氯靛酚反应48第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法测定生成物的熔点测定生成物的熔点制备衍生物测定熔点法制备衍生物测定熔点法操作繁琐费时间，应用较少。操作繁琐费时间，应用较少。49指纹图谱与特征图谱鉴别法指纹图谱与特征图谱鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 显微鉴别法显微鉴别法 生物学法生物学法 第三节第三节 鉴别方法鉴别

25、方法紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 近红外光谱法近红外光谱法 原子吸收法原子吸收法 核磁共振法核磁共振法 (NMR) 质谱鉴别法质谱鉴别法 (MS)X射线粉末衍射法射线粉末衍射法 50第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法紫外光谱法操作简便、快速。紫外光谱法操作简便、快速。用作鉴别的专属性远不如红外光谱法。用作鉴别的专属性远不如红外光谱法。紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 51第三节第三节 鉴别方法鉴别方法测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长；测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长；规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度；规定浓度的供试液

26、在最大吸收波长测定吸收度；规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸光度比值法；规定吸收波长和吸光度比值法；经化学处理后经化学处理后, 测定其反应产物吸收光谱特性测定其反应产物吸收光谱特性以上方法可单用，也可几个结合起来使用，以上方法可单用，也可几个结合起来使用，以提高专属性以提高专属性（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法52测定最大吸收波长测定最大吸收波长, ,或同时测定最小吸收波长或同时测定最小吸收波长 乙胺嘧啶乙胺嘧啶 供试品在供试品在0.1mol/L0.1mol/L盐酸介质盐酸介质中的紫外吸收在中的紫外吸收在272nm272nm处为峰处为峰,216nm,216nm

27、处为谷。处为谷。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 53规定吸收波长和吸光度比值法规定吸收波长和吸光度比值法第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 54 ChP2010版示例版示例示例一示例一 盐酸布比卡因的鉴别试验盐酸布比卡因的鉴别试验0.40mg/ml max: 263nm、271nm A: 0.530.58;0.430.48规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度示例二示例二 地蒽酚的鉴别试验地蒽酚的鉴别试验max: 257nm、28

28、9nm、 356nmA257/ A289=1.061.10A356/ A289=0.900.94规定最大吸收波长和吸光度比值法规定最大吸收波长和吸光度比值法55示例三示例三 氯贝丁酯的鉴别试验氯贝丁酯的鉴别试验 0.10mg/ml max: 280nm、288nm 10g/ml max: 226nm规定一定浓度下的供试液的最大吸收波长规定一定浓度下的供试液的最大吸收波长示例二示例二 专属性相对较好专属性相对较好56各国紫外鉴别法比较各国紫外鉴别法比较USPBPChP JP供试药与其对照品按同一方法处理，在同样条件下紫外光谱图一致。规定一定波长范围内扫描，寻找最大吸收，并测定其吸收系数。均采用与

29、标准图谱特征比对紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 57 特点特点l 专属性强、准确度高的特点，应用广（固、专属性强、准确度高的特点，应用广（固、液、气）液、气）l 主要用于组分单一、结构明确的原料药以及主要用于组分单一、结构明确的原料药以及结构相近的同类物质。结构相近的同类物质。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 58 标准图谱法标准图谱法：Ch.P要求按指定条件绘制供试品的红要求按指定条件绘制供试品的红外光吸收图谱，与药品红外光谱集中的相应外光吸收图谱，与药品红外光谱集中的相应标准图谱对比，如果峰位、峰形、相对强度都一标准图谱对比，如果峰位

30、、峰形、相对强度都一致时，即为同一种药物。致时，即为同一种药物。对照品法对照品法：将供试品与对照品在同样的条件下绘制：将供试品与对照品在同样的条件下绘制红外图谱，彼此对比是否一致的方法。可消除不红外图谱，彼此对比是否一致的方法。可消除不同仪器和操作条件造成的误差。同仪器和操作条件造成的误差。USP多采用对照多采用对照品法。品法。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 59各国药典红外鉴别法比较各国药典红外鉴别法比较USPBPJPChP 对照品法 对照品法标准图谱法(EP和BP)对照品法标准图谱法吸收波数法标准图谱法红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法

31、 601.试样制备方法试样制备方法(1) 压片法压片法(2) 糊法糊法(3) 膜法膜法(4) 溶液法溶液法第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 611.试样制备方法试样制备方法 压片法压片法第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法供试品（约供试品（约1mg) + 干燥干燥KBr/KCl (约约200mg) 研磨均匀研磨均匀 （玛瑙研钵）（玛瑙研钵） 置压模中置压模中真空真空加压至加压至0.8-1GPa2-3min均匀透明片均匀透明片无明显颗粒无明显颗粒供试片供试片同法制空白同法制空白KBr/KCl片，做空白校正，扣除背

32、景干扰片，做空白校正，扣除背景干扰622.原料药的鉴别原料药的鉴别(1) 多晶现象多晶现象(2) 如未规定该品供药用的晶型或预处理方法，则可如未规定该品供药用的晶型或预处理方法，则可使用对照品，并采用适当的溶剂对供试品与对照使用对照品，并采用适当的溶剂对供试品与对照品在相同的条件下同时进行重结晶，再绘制光谱，品在相同的条件下同时进行重结晶，再绘制光谱，比对。比对。(3) 如已规定特定的药用晶型，则应采用相应晶型的如已规定特定的药用晶型，则应采用相应晶型的对照品依法比对。对照品依法比对。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 633.制剂的鉴别

33、制剂的鉴别(1) ChP2010也收载了制剂的也收载了制剂的IR鉴别法。鉴别法。(2) 制剂的制剂的IR鉴别一般需采用提取分离、经适当干燥鉴别一般需采用提取分离、经适当干燥后再压片绘制图谱。后再压片绘制图谱。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 643.制剂的鉴别制剂的鉴别第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 辅料无干扰，晶型不变化辅料无干扰，晶型不变化与原料药标准光谱比对与原料药标准光谱比对辅料无干扰，晶型变化辅料无干扰，晶型变化对照品经同法处理后光谱比对对照品经同法处理后光谱比对辅料

34、干扰，晶型不变化辅料干扰，晶型不变化35个不受干扰的特征谱带个不受干扰的特征谱带辅料干扰，晶型变化辅料干扰，晶型变化不宜采用不宜采用IR鉴别鉴别653.制剂的鉴别制剂的鉴别(1) 直接用有机溶剂提取主成分，去除干扰后做红外直接用有机溶剂提取主成分，去除干扰后做红外图谱与对照图谱比较；图谱与对照图谱比较；(2) 对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，可以相应的对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，可以相应的加酸液或碱液来使有机酸或碱游离沉淀，直接取加酸液或碱液来使有机酸或碱游离沉淀，直接取沉淀干燥或采用有机溶剂提取有机酸或碱并干燥沉淀干燥或采用有机溶剂提取有机酸或碱并干燥后制作红外光谱与相应的有机酸或碱对照

35、谱图比后制作红外光谱与相应的有机酸或碱对照谱图比较；较；第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法663.制剂的鉴别制剂的鉴别(3)对于主成分为有机酸的品种，可先加碱使主成分对于主成分为有机酸的品种，可先加碱使主成分溶解，再加过量的酸使主成分游离并沉淀，干燥溶解，再加过量的酸使主成分游离并沉淀，干燥后做红外图谱与对照图谱比较；后做红外图谱与对照图谱比较；(4)对于未加辅料或辅料干扰比较小得制剂，可直接对于未加辅料或辅料干扰比较小得制剂，可直接取样品制作红外图谱与对照图谱比较。取样品制作红外图谱与对照图谱比较。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法67

36、4.注意事项注意事项1）固体药品应按规定的方法进行预处理）固体药品应按规定的方法进行预处理2）盐酸盐类的药品制片时一般使用）盐酸盐类的药品制片时一般使用KCl做基质做基质3）注意仪器自身的影响，可与标准的聚苯乙烯薄膜）注意仪器自身的影响，可与标准的聚苯乙烯薄膜比对，校正比对，校正4）不适用多组分、多晶形药物）不适用多组分、多晶形药物5）以新版）以新版药品红外光谱集药品红外光谱集为准为准6）制剂鉴别，应消除辅料干扰，提取分离后再制片）制剂鉴别，应消除辅料干扰，提取分离后再制片第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法68通过测定被测物在近红外区通过测定被测物在近红外区7502

37、500 nm(128004000 cm-1)的特征光谱并利用适宜的化学计量学方法提取相关信息后，的特征光谱并利用适宜的化学计量学方法提取相关信息后，进行定性、定量分析的一种分析技术。进行定性、定量分析的一种分析技术。特点特点1、获得信息多、获得信息多: 密度、粒子尺寸、直径、大分子聚合度等密度、粒子尺寸、直径、大分子聚合度等2、不破坏样品，可不破坏样品，可“在线在线”检测检测3、分析速度要快、分析速度要快 扫描：扫描：5次次/s，一般扫描，一般扫描50次次 分析一次分析一次2-3min4、灵敏度高，应用范围广、灵敏度高，应用范围广 第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法

38、近红外光谱法近红外光谱法 69 利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进行定量、定性分析。度进行定量、定性分析。 主要用于元素分析主要用于元素分析第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法原子吸收法原子吸收法 70 通过测定供试品指定基团上的质子峰的化学位移通过测定供试品指定基团上的质子峰的化学位移和偶合常数进行鉴别。和偶合常数进行鉴别。 NMR技术已在技术已在

39、BP和和USP中用于药物的鉴别。中用于药物的鉴别。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（二）光谱鉴别法（二）光谱鉴别法核磁共振法核磁共振法 质谱鉴别法质谱鉴别法 (MS)X射线粉末衍射法射线粉末衍射法 71指纹图谱与特征图谱鉴别法指纹图谱与特征图谱鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 显微鉴别法显微鉴别法 生物学法生物学法 第三节第三节 鉴别方法鉴别方法薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 HPLC、GC鉴别法鉴别法72第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（三）色谱鉴别法（三）色谱鉴别法 利用不同物质在不同的色谱条件下，产生各自的特利用不同物质在不同的色谱条件下，产生各自的特征征色谱行为（保留时间，比移值）色谱行为（保留

40、时间，比移值）进行的鉴别试验。进行的鉴别试验。 常采用对比法（与对照品、已知药品，在相同条件常采用对比法（与对照品、已知药品，在相同条件下进行色谱分离并比较。）下进行色谱分离并比较。）73 薄层色谱法具有专属性强、操作简便、实验成本低薄层色谱法具有专属性强、操作简便、实验成本低等优点。等优点。在鉴别试验中，薄层色谱法是色谱法中应用最广的在鉴别试验中，薄层色谱法是色谱法中应用最广的一种方法。一种方法。 通过通过Rf值，斑点颜色进行定性。值，斑点颜色进行定性。第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（三）色谱鉴别法（三）色谱鉴别法薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 74第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（三）色谱鉴别

41、法（三）色谱鉴别法薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 75第三节第三节 鉴别方法鉴别方法（三）色谱鉴别法（三）色谱鉴别法HPLC、GC鉴别法鉴别法 供试品和对照色谱峰供试品和对照色谱峰保留时间保留时间一致。一致。在鉴别试验中，通常含量测定同时用于鉴别的一种方法。在鉴别试验中，通常含量测定同时用于鉴别的一种方法。76色谱谱鉴别法小结色谱谱鉴别法小结 适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别, ,具具有分离、分析同时进行的特点有分离、分析同时进行的特点. . 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)(HPLC)、气相色谱法、气相色谱法(GC)(GC)供试品和对照品色谱

42、峰保留时间一致供试品和对照品色谱峰保留时间一致. . 薄层扫描法薄层扫描法(TLC)(TLC)对照品比较法，供试对照品比较法，供试品斑点与对照品的品斑点与对照品的R Rf f值及斑点的颜色应一致值及斑点的颜色应一致. .色谱法（色谱法（ HPLC GC TLC)HPLC GC TLC)77指纹图谱与特征图谱鉴别法指纹图谱与特征图谱鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 显微鉴别法显微鉴别法 生物学法生物学法 第三节第三节 鉴别方法鉴别方法78 主要用于主要用于中药及其制剂的鉴别中药及其制剂的鉴别，通常采用显微镜对药，通常采用显微镜对药材的切片、粉末、解离组织或表面制片，以及含饮材的切片、粉末、解离组织或

43、表面制片，以及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。进行鉴别的一种方法。显微鉴别法显微鉴别法 79 利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质的一种方法，主要用于抗生素、生化药物以及中药的一种方法，主要用于抗生素、生化药物以及中药的鉴别。的鉴别。生物学法生物学法 生物效应鉴别法生物效应鉴别法基因基因鉴别法鉴别法80 中药指纹图谱：目的是通过对所得到的能够体现中药整体中药指纹图谱：目的是通过对所得到的能够体现中药整体特性的图谱识别，提供一种能够比较全面的控制中药质量特性的图

44、谱识别，提供一种能够比较全面的控制中药质量的方法，从化学物质基础的角度保证中药制剂的稳定和可的方法，从化学物质基础的角度保证中药制剂的稳定和可靠。靠。 特征图谱：指主要有效成分的特征峰谱图，而指纹图谱除特征图谱：指主要有效成分的特征峰谱图，而指纹图谱除了主要有效成分的特征峰外，还包括更多内容，更具专一了主要有效成分的特征峰外，还包括更多内容，更具专一性。性。指纹图谱与特征图谱鉴别法指纹图谱与特征图谱鉴别法 第三节第三节 鉴别试验的条件及方法验证鉴别试验的条件及方法验证（一）溶液的浓度（一）溶液的浓度 溶液的浓度溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果

45、的判断。果的判断。 （如化学法中要观察沉淀、颜色；（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法法中中max, A, E1%1cm)（二）溶液的温度（二）溶液的温度 温度温度过高过高可使产物分解，导致颜色变浅，沉淀溶解，可使产物分解，导致颜色变浅，沉淀溶解，甚至观察甚至观察 不到结果，故试验中应注意温度的控制。不到结果，故试验中应注意温度的控制。82 （三）溶液的酸碱度（三）溶液的酸碱度 许多鉴别反应都需要在一定酸碱度的条件下进行，许多鉴别反应都需要在一定酸碱度的条件下进行，溶液的酸碱度能够使各反应物有足够的浓度处于活化状溶液的酸碱度能够使各反应物有足够的浓度处于活化状态、使反应产物处于稳定和易于观察状

46、态。态、使反应产物处于稳定和易于观察状态。 （四）试验时间（四）试验时间 有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。和条件。第三节第三节 鉴别试验的条件及方法验证鉴别试验的条件及方法验证83 （五）鉴别方法的验证（五）鉴别方法的验证l 专属性专属性: 是指其他成分（其他药物成分、杂质、是指其他成分（其他药物成分、杂质、降解产物、辅料等）存在的情况的下，采用的鉴降解产物、辅料等）存在的情况的下，采用的鉴别方法也能正确地鉴别出被测物质的特性。别方法也能正确地鉴别出被测物质的特性。 每种鉴别方法都存在一定的局限性，一般至少采每种鉴别方法都存在一定的局限性，一般至少采用两种以上不同类型的方法，如化学法和光谱法。用两种以上不同类型的方法，如化学法和光谱法。l 耐用性：测定条件发生小的变化时，不影响测定耐用性：测定条件发生小的变化时，不影响测定结果。结果。第三节第三节