毕业课题研究心得体会

1、毕业课题研究心得体会枯萎病菌胁迫下三种黑籽南瓜光合特性比较耿盼2012313521我的毕业论文主要研究的是枯萎病菌胁迫下三种黑籽南瓜光合特性比较，实 验从2015年10月开始做，到2016年1月基本结束，期间也出现了很多小插曲。 从选课就一路坎坷，幸好得到了杨止安老师的大力指导，然后就是写开题报告， 期间要大量阅读论文，只有大量阅读论文才能对所要进行的实验有个全而的了 解。首先要了解本课题所涉及的问题在国内（外）的研究现状综述，了解到尖抱镰 刀菌是一种世界性分布的土传病原真菌，寄主范围广泛，可引起瓜类、茄科、香 蕉、棉、豆科及花卉等100多种植物枯萎病的发生。尖砲镰刀菌属半知菌类、从 梗孑包目

2、、瘤座抱科、镰刀菌属，病菌通过根部或根毛顶端细胞侵入。进入维管束 后，因堵塞导管而使植株萎篤，或分泌毒素使植株屮毒死亡。枯萎病是土传的系 统性病害，再侵染也能造成局部危害，但不起主要作用。瓜类枯萎病又称萎蒸病、 蔓割病，是瓜类重要病害之一，在全国各地均有发生，以黄瓜、西瓜发病最重， 冬瓜、甜瓜次之。生产上常利用黑籽南瓜对瓜类枯萎病及其根系对低地温的抗性, 用作嫁接黄瓜，西瓜的砧木。黑籽南瓜在中国南瓜属4个栽培种中最接近野生种, 综合抗性最强，云南黑籽南瓜的种质资源极其丰富，其中包括白皮，绿皮，花皮 黑籽南瓜等品种。生理指标能够反映植物对环境胁迫的耐受性，光合作用是植物 进行牛长发育必不可少的过

3、程，也是植物在外界环境胁迫下被抑制的最重要的牛 理过程之一，现阶段对于其复杂而精密的内部生理生化调节过程尚不明确，研究 表明，在光合作用对环境胁迫响应的过程中，光系统ii （ps ii）能够快速响应外 界环境的变化，净光合速率（巴）等光合数据可以反映植物光合机构ps ii对环 境的响应与适应机制。其次要对课题提出的任务要求及实现预期目标的可行性分析，阅读大量文献 后发现对黑籽南瓜幼苗进行伤根接种法可使黑籽南瓜感染上枯萎病菌，再用 li-6400便携式光合作用分析系统测定相关的光合数据，根据测定的光合数据即 可分析三种黑籽南瓜的抗病机理。整理好具体的实验思路后就开始着手实验。首先要收集黑籽南瓜种

4、质资源期 间的到了老师的全程协助，老师从昆明周边收集到了白皮、绿皮、花皮黑籽南瓜, 然后就要把黑籽南瓜种子挖出来清洗消毒晾干，选择饱满的种子进行实验。之后 就要培养枯萎病菌，对病菌进行扩繁，包括pda培养基的熬制，灭菌；在超净工 作台接菌；将接好菌的平板放在恒温培养箱中培养一般7天菌长满平板，期间接 菌过程中平板里老是长出黏糊糊的细菌，并且发臭，刚开始我们以为是培养慕配 方有问题，还重新熬制了培养基，认真对培养基、平板、接种工具灭菌但还是会 长杂菌，在超净工作台接菌过程中也很注意操作，后来查文献才发现在培养基中 添加链霉素可以解决这种问题，抑制细菌滋牛，链霉素的添加浓度为100mg/lo 培养

5、好了枯萎病菌之后就耍配制砲子悬浮液，期间也尝试过将枯萎病菌接种到液 体培养基中，直接放在摇菌床中摇成抱子悬浮液，可是测定也子悬浮液时浓度没 有固体培养基浓度高，且泡子活力也没有固体培养基培养的高，后來在周丽英师 姐指导下我们就决定用固体培养基培养尖泡镰刀菌，后再用接菌环将平板上的枯 萎病菌刮下用无菌水配成适合侵染黑籽南瓜的浓度，测定浓度时可以用血球计数 板计数，也可用分光光度计测定。黑籽南瓜幼苗在催芽过程中也出现过培养两三 天就发出恶臭，要注意明天都要更换垫在平板上的试纸，并且水分要始终，湿润 就行，湿度不要过大。种子发芽后要种到沙土育苗盘内，胚根要向下。待种子长 出两片子叶u苗势整齐，先用灭

6、过菌的剪刀对黑籽南瓜苗的主根和须根进行伤 根，后用配制好的泡子悬浮液侵泡黑籽南瓜幼苗30min,将接种了枯萎病菌的黑 籽南瓜栽种在装有育苗基质的营养钵里，基质的配比是询问了专门上无土栽培课 的老师，刚开始我们也试过用水培培养接种的黑籽南瓜幼苗，具体做法是用剪刀 对黑籽南瓜进行伤根后放入加有孑包子悬浮液的1/2园试配方水培系统屮，可是黑 籽南瓜难以表现出感病症状，后师姐决定采用基质栽种接种的黑籽南瓜幼苗，这 样更接近自然条件下黑籽南瓜感染枯萎病菌的环境。我们将营养钵放到云南农业 大学后山的温室大棚中培养，并每天浇清水和营养液，第七天的时候用li-6400 便携式光合作用分析系统测定相关的光合数据。本文是在导师杨正安老师和周丽英师姐的精心指导下完成的,老师和师姐严 谨的科研态度和悉心指导，为试验的顺利开展提供了有力的指导与帮助。并得到 了潘玉婷同学的热情支持和帮