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文档简介
1、 重组dna技术的重大突破带动了现代生物技术的兴起，并很快产生了许多生命科学的高技术产业。 重组dna技术，又称为基因或分子克隆技术，是基因工程的核心技术。该技术包括了一系列的分子生物学操作步骤。 所谓基因工程(genetic engineering)就是有意识地把一个生物体中有用的目的基因转入另一个生物体中，使后者获得新的遗传性状或表达所需要的产物。11.1重组dna技术是基因工程的核心技术 生物技术获得需要的目的基因常用的方法：（1）直接从生物体中提取总dna，构建基因文库(gene library)，从中调用目的基因；（2）以mrna为模板，反转录合成互补的dna片段；（3）利用聚合酶链
2、式反应（pcr）特异性地扩增所需要的目的基因片段，等等。11.2 获得需要的目的基因（外源基因）n 细胞内总dna的提取分离与基因文库的构建l 细胞内总dna的提取分离程序n 反转录人工合成互补dna 构建基因文库获取目的基因存在的问题费时费事 内含子序列n 聚合酶链式反应（pcr）l pcr技术就是在体外中通过酶促反应有选择地大量扩增（包括分离）一段目的基因的技术。l 加入4种物质： （1）作为模板的dna序列；（2）与被分离的目的基因两条链 各自5端序列相互补的dna引物（20个左右碱基的短dna单链）；（3）taqdna聚合酶；（4）dntp（datp, dttp, dgtp和dctp）n 聚合酶链式反应（pcr）l变性、退火、延伸三步曲变性：双链dna解链成为单链dna退火：部分引物与模板的单链dna的特定互补部位相配对和结合延伸：以目的基因为模板，合成互补的新dna链n 聚合酶链式反应（pcr）l每一轮聚合酶链式反应可使目的基因片段增加一倍30轮循环可获得 230（1.07109)个基因片段l pcr技术的发明 pcr的发明是dna操作技术的革命 美国mullis教授 开汽车
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