药物定量分析与分析方法验证

1、第四章药物定量分析与分析方法验证第四章药物定量分析与分析方法验证第一节第一节定量分析样品的前处理方法定量分析样品的前处理方法 一、概述一、概述 分析含金属或含分析含金属或含卤素、氮、硫、磷、硒卤素、氮、硫、磷、硒等特殊元素药等特殊元素药物分析的前处理方法。物分析的前处理方法。 含金属或卤素的药物，如葡萄糖酸锑钠，硬脂酸镁、含金属或卤素的药物，如葡萄糖酸锑钠，硬脂酸镁、碘苯酯、磺溴酞钠等，处理方法因金属或卤素在分子碘苯酯、磺溴酞钠等，处理方法因金属或卤素在分子中结合的牢固程度而异，如：中结合的牢固程度而异，如：有机卤素药物，有机卤素药物，所含卤所含卤素原子均直接与碳原子相连，但不同药物中卤素所处

2、素原子均直接与碳原子相连，但不同药物中卤素所处的位置不同，则与碳原子结合的牢固程度就有差异。的位置不同，则与碳原子结合的牢固程度就有差异。如果卤素和芳环相连接，则结合牢固，与脂肪链的碳如果卤素和芳环相连接，则结合牢固，与脂肪链的碳原子相连接，则结合不牢固；原子相连接，则结合不牢固；而含金属的有机药物，有两种情况：而含金属的有机药物，有两种情况：一是金属原子不直接与碳原子相连一是金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸及酚的金属，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物，称为含金属的有机化合物，其分子结构中的盐或配位化合物，称为含金属的有机化合物，其分子结构中的金属原子结合不够牢固，在水溶液中既可离

3、解出金属离子，可金属原子结合不够牢固，在水溶液中既可离解出金属离子，可在溶液中直接进行其金属的鉴别或含量定；在溶液中直接进行其金属的鉴别或含量定；二是金属原子直接与碳原子以共价键相连接二是金属原子直接与碳原子以共价键相连接，结合状态比，结合状态比较牢，称为有机金属药物较牢，称为有机金属药物.在溶液中其金属一般不能解离成离在溶液中其金属一般不能解离成离子状态，经适当处理，将其金属转变为适于分析的状态（多转子状态，经适当处理，将其金属转变为适于分析的状态（多转变为无机的金属盐或离子），方可进行其金属的鉴别或含量测变为无机的金属盐或离子），方可进行其金属的鉴别或含量测定。定。二、不经有机破坏的分析方

4、法二、不经有机破坏的分析方法（一）（一）直接测定法直接测定法 凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些c-m（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中可以电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方在水溶液中可以电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方法进行测定法进行测定。（二）经水解后测定法（二）经水解后测定法1直接回流后测定法直接回流后测定法2用硫酸水解后测定法用硫酸水解后测定法（三）经氧化还原后测定法（三）经氧化还原后测定法1碱性还原后测定碱性还原后测定2酸

5、性还原后测定酸性还原后测定3利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量三、三、经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法（一）（一）湿法破坏湿法破坏1硝酸硝酸-高氯酸法高氯酸法2硝酸硝酸-硫酸法硫酸法3硫酸硫酸-硫酸盐法硫酸盐法4其它湿法其它湿法（二）（二）干法破坏干法破坏（三）（三）氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法（氧瓶燃烧法（oxygenflaskcombustionmethod）系将有）系将有机药物放入充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，并将机药物放入充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的欲测物质吸收于适当的吸收液中，然后根燃烧所产生的欲测

6、物质吸收于适当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、硒等其它元素检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、硒等其它元素的有机药物。的有机药物。本法是快速分解有机物的简单方法，它不需本法是快速分解有机物的简单方法，它不需要复杂设备，就能使有机化合物中的待测元素定要复杂设备，就能使有机化合物中的待测元素定量分解成离子型。该方法被各国药典所收载。量分解成离子型。该方法被各国药典所收载。1仪器装置仪器装置燃烧瓶为燃烧瓶为500ml、1000ml、或、或2000ml磨口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞应严密、空磨

7、口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞应严密、空心、底部熔封铂丝一根（直径为心、底部熔封铂丝一根（直径为1mm），铂丝下），铂丝下端做成网状或螺旋状，长度约为瓶身长度的端做成网状或螺旋状，长度约为瓶身长度的23，如图如图2称样称样3燃烧分解操作法燃烧分解操作法4吸收液的选择吸收液的选择（2）仪器与材料仪器与材料仪器装置仪器装置燃烧瓶为燃烧瓶为250、500、1000或或2000ml无色、磨口、厚无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞塞空心，底部熔封铂丝一空心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状根，下端呈螺旋状或网状称样用材料及称样称样用材料及称样a.固体样品固体样品无灰滤纸无灰滤纸b

8、.液体样品液体样品纸袋纸袋 c.软膏类样品：将适量样品置不含被测成分软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹样品的燃烧样品的燃烧点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。合并洗液及吸

9、收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。检查或含量测定。吸收液吸收液a. a. 作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态氧气氧气b.吸收液的选择吸收液的选择氟氟 水水 （hfhf） 氯氯 naohnaoh溶液（溶液（hclhcl) )溴溴 h h2 2o o2 2-naoh(-naoh( naoh naoh饱和溶液饱和溶液-so-so2 2(

10、br(br2,hbr),hbr)碘碘 naohnaoh饱和溶液饱和溶液-so-so2 2(i(i2 2,hi),hi)硫硫 浓浓h h2 2o o2 2溶液溶液 硒硒 硝酸溶液硝酸溶液（3）操作方法）操作方法燃烧瓶燃烧前的准备燃烧瓶燃烧前的准备用洗液洗净后，按各药品项下的规定加用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧气通入氧气1min，立即用表面皿覆盖瓶口。，立即用表面皿覆盖瓶口。样品的准备样品的准备取样品适量，精密称定后按规定方法取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。包裹，固定于铂丝下端的网

11、内或螺旋处。例例磺溴酞钠的含量测定磺溴酞钠的含量测定chp(2000)brbrbrbrccoohoso3naso3naohbrbrbrbrosohhosonaooonaooo燃烧分解燃烧分解o2hbr+s2-+so4+hbr+s2-nabr+na2so4+h2onaoh,h2o2溴溴取本品约取本品约0.2g，照氧瓶燃烧法（附录，照氧瓶燃烧法（附录c）进行有）进行有机破坏，选用机破坏，选用1000ml燃烧瓶，以燃烧瓶，以0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10ml，浓过氧化氢溶液浓过氧化氢溶液0.5ml与水与水10ml作为吸收液，俟生成的烟作为吸收液，俟生成的烟雾完全吸入吸收液后，用水稀释至雾完全吸

12、入吸收液后，用水稀释至100ml，煮沸，煮沸5分钟，分钟，放冷，加稀硝酸使成酸性，精密加硝酸银滴定液放冷，加稀硝酸使成酸性，精密加硝酸银滴定液（0.1mol/l）20ml，摇匀，再加硫酸铁胺指示液，摇匀，再加硫酸铁胺指示液2ml，用，用硫氰酸胺滴定液硫氰酸胺滴定液(0.1mol/l)滴定，并将滴定的结果用空白滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每试验校正。每1ml硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/l)相当于相当于7.990mg的溴的溴(br)。例例碘苯酯的含量测定碘苯酯的含量测定chp（2005）原理原理 碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分解，转变为碘化物，

13、继而氧化为游离的碘，解，转变为碘化物，继而氧化为游离的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氢氧化钠反并被定量地吸收于吸收液中，和氢氧化钠反应，生成碘化物与碘酸盐，加入溴应，生成碘化物与碘酸盐，加入溴- -醋酸溶醋酸溶液，使全部转变为碘酸盐，过量的溴以甲酸液，使全部转变为碘酸盐，过量的溴以甲酸及通空气去除。加入碘化钾，使与碘酸盐反及通空气去除。加入碘化钾，使与碘酸盐反应析出应析出游离碘，用硫代硫酸钠液滴定，碘与游离碘，用硫代硫酸钠液滴定，碘与淀粉结合所显的蓝色消失即为终点淀粉结合所显的蓝色消失即为终点 取本品约取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用氢氧化钠试

14、液进行有机破坏，用氢氧化钠试液2ml与水与水l0ml为为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液(取醋酸钾取醋酸钾10g，加冰醋酸适量使溶解，加溴，加冰醋酸适量使溶解，加溴0.4ml，再加冰，再加冰醋酸使成醋酸使成1000m1)l0ml，密塞，振摇，放置数分，密塞，振摇，放置数分钟，加甲酸约钟，加甲酸约lml，用水洗涤瓶口，并通入空气流，用水洗涤瓶口，并通入空气流约约35min以除去剩余的溴蒸气，加碘化钾以除去剩余的溴蒸气，加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/l)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定，至近终

15、点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每正。每lml的硫代硫酸钠滴定液的硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/l)相当于相当于1.388mg的的c19h29io2。 滴定度的计算滴定度的计算放大反应放大反应2mol碘苯酯碘苯酯1moli21moli21molnaio+1molnai1molnaio1/3molnaio3+2/3molnai321molnai+br2321molnaio3即即2mol碘苯酯碘苯酯2molnaio32molnaio3+10i- -6moli2即即2mol碘苯酯碘苯酯1moli26moli212mo

16、li12molna2s2o3反应摩尔比为反应摩尔比为1 6mlmgncmt/388. 1634.41602. 098：140. 氧瓶燃烧法中的装置有a. 磨口硬质玻璃锥形瓶b. 磨口软质玻璃锥形瓶c. 铂丝d. 铁丝e. 铝丝选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品a. 磨口硬质玻璃锥形瓶b. 铂丝c. 普通滤纸d. 氢气 e. 无灰滤纸99：76氧瓶燃烧法测定含氯有机药物时所用的吸收液多数为a. h2o2溶液b. h2o2naoh溶液c. naoh溶液d硫酸肼饱和液e. naoh硫酸肼饱和液.氧瓶燃烧法可用于a. 含卤素有机药物的含量测定b. 醚类药物的含量测定c. 检查甾体激素类药物中的氟d. 检查

17、甾体激素类药物中的硒e. 芳酸类药物的含量测定第二节第二节定量分析方法特点定量分析方法特点一、一、容量分析法容量分析法（一）（一）容量分析法的特点容量分析法的特点（二）（二）容量分析法的计算问题容量分析法的计算问题1滴定度滴定度2滴定度（滴定度（t）的计算）的计算3百分含量计算百分含量计算（1）直接滴定法直接滴定法 （2 2）回滴定法（剩余滴定法）回滴定法（剩余滴定法）a:被测药物，被测药物，b：滴定剂：滴定剂ababbaabbaaabbccddwwambmwwambmanmbm滴定液的摩尔浓度滴定液的摩尔浓度（mol/l)滴定度滴定度t例：用碘量法测定例：用碘量法测定vitc(176.13v

18、itc(176.13）m(im(i2 2)=0.05mol/l)=0.05mol/laatmmb68626662c h oic h ohi10.05176.118.806(/)aatmmbmg ml aabbccddama bwa mbvabaawtmmbv t% =100%w含量（ ）t:t:药典规定的摩尔浓度的滴定度药典规定的摩尔浓度的滴定度f =t =f t实际摩尔浓度校正因子（ ）规定摩尔浓度v t% =100%wv tf=100%w含量（ ）剩余滴定法：剩余滴定法：药物药物+定量过量的滴定液定量过量的滴定液a，用另一滴定液，用另一滴定液b回滴；回滴；空白实验空白实验 剩余滴定法：剩余

19、滴定法：0sbbbav -vft% =100%w（）含量（ ） 二、二、 光谱分析法光谱分析法（一）紫外-可见分光光度法1特点紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为200nm760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的光谱分析方法。主要特点如下：（1）灵敏度高，可达10-4g/ml10-7g/ml 。（2）准确度高，相对误差为2% 5%。（3）仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。 2郎伯郎伯-比耳定律比耳定律3仪器校正和检定仪器校正和检定4对溶剂的要求对溶剂的要求5测定方法测定方法1)对照品比较法对照品比较法d(%)=100%wd:xxxrsrsxaacccaac含量供试品溶液稀释体

20、积标示量（标示量（%）：）：制剂含量相当于标示量的百分数制剂含量相当于标示量的百分数 单位制剂的平均装量，如：单位制剂的平均装量，如：g/g/片，片，g/g/粒，粒，g/ml, ml/mlg/ml, ml/mlb:b:标示量标示量: :单位制剂的标示量（单位制剂的标示量（ g/g/片，片，g/g/粒，粒，g/ml, ml/ml g/ml, ml/ml ）dw(%)=100%wbxc 标示量w50 100d=2500ml)2（22x5ml ch cl2ml361nmaa20v ml50ml100ml 移取测异维 胶囊粒，精密称取定容量瓶定容d v(%)=100%vbxc 标示量2）吸收系数法）吸

21、收系数法x1%1cma=e100 xcx1%1cmdw(%)=100%wbadw=100%e100wbxc 标示量x1%1cmd(%)=100%wad=100%e100wxc 含量 （二）（二）荧光分析法荧光分析法 1特点特点 2荧光分析仪荧光分析仪 3含量测定含量测定00 xxxbxsrsrrbffrrcccffrr-三、三、色谱分析法色谱分析法（一）（一）高效液相色谱法高效液相色谱法1对仪器的一般要求对仪器的一般要求系统适用性实验系统适用性实验（1）色谱柱的理论塔板数（）色谱柱的理论塔板数（n）（2）分离度）分离度.测定法测定法（1）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量：）内标法加校正因

22、子测定供试品中主成分含量：内标法内标法ml lsiismmmaa 溶剂溶解或级过程：（含样品）定容混匀进样测 和iiimfamfa内标内标内标iiissamfma内标物和标准物是同一物质时内标物和标准物是同一物质时%100100iiiiimfacfammafam内标内标内标内标内标 应用示例应用示例（一）黄体酮测定（一）黄体酮测定-hplc 柱柱:c:c1818 流动相流动相: :甲醇甲醇- -水水(65:35)(65:35) 检测波长检测波长:254nm:254nm 内标物内标物: :已烯雌醇已烯雌醇1mg/ml1mg/ml 对照品对照品: :黄体酮标品黄体酮标品方法方法: （1 1）取本品

23、约）取本品约20mg20mg，精密称定，置，精密称定，置25 ml25 ml量瓶中，加甲量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀醇溶解并稀释至刻度，摇匀. .精密量取该溶液与内标溶精密量取该溶液与内标溶液各液各5ml5ml，置另一个，置另一个25ml25ml量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇匀，进样匀，进样20 20 ll 得峰面积分别为得峰面积分别为a a样样和和a a内内， （2 2）另取对照品）另取对照品m m对对同法测定，得峰面积分别为同法测定，得峰面积分别为a a对对和和a a内内 按内标法以峰面积计算含量按内标法以峰面积计算含量. . （1 1）求含量）求含量 （2

24、2）求）求f fi i100%100%100%iiiiiimmfacmmfama fam内标内标内标内标内标(1)求fi/iiisisssimamafmama（黄体酮对已烯雌醇的相对校正因子）（黄体酮对已烯雌醇的相对校正因子）100%100%100%iiiiiimmfacmmfama fam内标内标内标内标内标（2）求药片中黄体酮含量）求药片中黄体酮含量注意注意:mi是指样品中含有纯黄体酮的质量是指样品中含有纯黄体酮的质量/mamafmamaaammaammaamama相对对i对对i样样内内内内内内内内对样对样样内样对内i=fmmaa内i样样内iaammaa样内对对内实际工作中的计算方法实际工

25、作中的计算方法21akaaka样内对内21%100%immkwkw样对样样甾体激素m样样是指称取样品的质量是指称取样品的质量21k%=100kimcw对%100a100aiimcwamaw样，内对对内（）（）对于液体或气体样品对于液体或气体样品21a%c100ak=c100kiaca样样，内对对对内对（）（）（2）外标法测定供试品中主成分含量：）外标法测定供试品中主成分含量：外标法可分为标准曲线法和外标一点法。外标法可分为标准曲线法和外标一点法。1）标准曲线法：）标准曲线法：2）外标一点法：）外标一点法：d(%)=100%wd:xxxrsrsxaacccaac含量供试品溶液稀释体积(二二)气相

26、色谱法气相色谱法1.对仪器的一般要求对仪器的一般要求2.系统适应性实验系统适应性实验3.测定法测定法第三节第三节药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、日间和日内精密验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、日间和日内精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性范围和耐用性。度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性范围和耐用性。一、一、准确度准确度（一）含量测定的准确度（一）含量测定的准确度 准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般以回收率（度，一般以回收率（%）表示。准确

27、度应在规定的范围内建立。）表示。准确度应在规定的范围内建立。回收率的计算可按下式：回收率的计算可按下式：% 测得量回收率加入量原料药原料药-%100测得量 本底值回收率加入量原料药原料药二二、精密度精密度精密度系指在规定的测定条件下，同一个均匀样品，经过多精密度系指在规定的测定条件下，同一个均匀样品，经过多次取样测定所得的结果之间的接近程度。次取样测定所得的结果之间的接近程度。(一一)精密度表示方法精密度表示方法1.偏差偏差(deviation，d) . .标准偏差标准偏差(standarddeviation，sd)s=（xix）2n13.相对标准偏差相对标准偏差(relativestanda

28、rddeviation,rsd),也称变异也称变异系数系数(coefficientofvaration,cv)rsd=标准偏差标准偏差平均值平均值100%=sx100%(二二)重复性、中间精密度及重现性重复性、中间精密度及重现性1.重复性重复性在相同的条件下，由一个分析人员测定所得结果的在相同的条件下，由一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性。精密度称为重复性。2中间精密度中间精密度同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果的精密度，称为中间精密度。同设备测定结果的精密度，称为中间精密度。3重现性重现性 在不同实验室由不同分析人员测定结果

29、的精密度，在不同实验室由不同分析人员测定结果的精密度，称为重现性。称为重现性。(三三)数据要求数据要求三、专属性三、专属性专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的方能准确测定出被测物的特性。能存在下，采用的方能准确测定出被测物的特性。(一一)鉴别反应鉴别反应(二二)含量测定和杂质测定含量测定和杂质测定四、四、检测限检测限检测限（检测限（limitofdetection，lod）是试样中被测物能被检）是试样中被测物能被检测出的测出的最低浓度或量最低浓度或量。lod是一种限度检验效能指标，即反映是一种限度检验效能指标，即反

30、映方法与仪器的灵敏度和噪音方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白的大小，也表明样品经处理后空白（本底）值的高低。它无需定量测定，只要指出高于或低于该（本底）值的高低。它无需定量测定，只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。根据所采用的方法来确定检测限。规定的浓度或量即可。根据所采用的方法来确定检测限。(一一)常用的方法常用的方法1.非仪器分析目视法非仪器分析目视法2.仪器分析时的测定法仪器分析时的测定法（二）数据要求（二）数据要求五、定量限五、定量限 定量限（定量限（limitofquantitation，loq）是指样品中被测）是指样品中被测物能物能被定量测定的最低量被定量测

31、定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密，其测定结果应具一定准确度和精密度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定定量限。度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定定量限。六、线性六、线性 线性线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。度直接呈正比关系的程度。七、范围七、范围范围是指能到达一定精密度、准确度和线性、测试方法适用范围是指能到达一定精密度、准确度和线性、测试方法适用的高低限浓度或量的区间。的高低限浓度或量的区间。八、耐用性八、耐用性耐用性耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响系指在测定条

32、件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。的承受程度，为常规检验提供依据。1用于鉴别试验用于鉴别试验2用于原料药中杂质测定或制剂中的降解产物测定的方法用于原料药中杂质测定或制剂中的降解产物测定的方法3用于原料药中主成分或制剂中有效组分含量测定及溶出用于原料药中主成分或制剂中有效组分含量测定及溶出度测定度测定第四节第四节生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求一、常用样品的种类、采集和储贮藏一、常用样品的种类、采集和储贮藏生物样品包括各种体液和组织，但实际上最常用的是比生物样品包括各种体液和组织，但实际上最常用的是比较容易得到的血液（血浆、血清、全血）尿液、唾液

33、。较容易得到的血液（血浆、血清、全血）尿液、唾液。(一一)血样血样血浆（血浆（plasma）和血清（）和血清（serum）是最常用的生物样品。）是最常用的生物样品。(二二)唾液唾液(三三)尿液尿液二、生物样品分析前处理技术二、生物样品分析前处理技术(一一)去除蛋白质去除蛋白质1加入与水相混溶的有机溶剂加入与水相混溶的有机溶剂2加入中性盐加入中性盐3加入强酸加入强酸4加入含锌盐及铜盐的沉淀剂加入含锌盐及铜盐的沉淀剂5酶解法酶解法（二）缀合物的水解（二）缀合物的水解（三）分离、纯化与浓集（三）分离、纯化与浓集1液液-液提取法液提取法(liquid-liquidextraction,lle)2液液-固提取法固提取法(liquidsolidextraction,lse)3被测组分的浓集被测组分的浓集(四四)化学衍生化化学衍生化1gc中化学衍生化法中化学衍生化法2hplc中化学衍生化法中化学衍生化法三、三、定量分析方法验证定量分析方法验证(一一