植物组织培养教程李浚明4

1、植物器官培养（植物器官培养（organ culture）是指对植物是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。分为营养器官（根、茎、叶）和繁养的技术。分为营养器官（根、茎、叶）和繁殖器官（果实、种子、花器官）培养。殖器官（果实、种子、花器官）培养。组织培养组织培养指对植物组织（分生组织、表皮组织、指对植物组织（分生组织、表皮组织、薄壁组织）及愈伤组织进行离体培养的技术。薄壁组织）及愈伤组织进行离体培养的技术。基本程序：基本程序：一、一、无菌外植体的获得无菌外植体的获得二、初代培养物的建立二、初代培养物的建立三、形态发生和植株再生三、形态发

2、生和植株再生四、培养产物的观察记载四、培养产物的观察记载一、无菌外植体的获得一、无菌外植体的获得二、初代培养物的建立二、初代培养物的建立三、形态发生和植株再生三、形态发生和植株再生植株植株植株植株植株植株植株植株四、培养产物的观察记载四、培养产物的观察记载根段培养根段培养茎段培养茎段培养叶培养叶培养n植物叶培养植物叶培养是指以离体的叶片器官为外植是指以离体的叶片器官为外植体进行培养，再生植株的过程。植物叶培体进行培养，再生植株的过程。植物叶培养常用于研究叶形态发生过程以及进行光养常用于研究叶形态发生过程以及进行光合作用、叶绿素形成、遗传转化等。合作用、叶绿素形成、遗传转化等。n培养过程主要包括

3、：培养过程主要包括：愈伤组织诱导；不定愈伤组织诱导；不定芽分化；无菌苗增殖及生根芽分化；无菌苗增殖及生根等。等。一、植物叶培养一、植物叶培养叶片离体培养过程叶片离体培养过程abec花烛叶片离体培养及植株再生花烛叶片离体培养及植株再生（一）愈伤组织诱导：（一）愈伤组织诱导： 诱导接种的叶片外植体脱分化形成愈伤组诱导接种的叶片外植体脱分化形成愈伤组织的过程。愈伤组织的形成通常经历诱导期、织的过程。愈伤组织的形成通常经历诱导期、分裂期和分化期等阶段。分裂期和分化期等阶段。 高浓度生长素及适当浓度的细胞分裂素可高浓度生长素及适当浓度的细胞分裂素可以促进愈伤组织的形成。以促进愈伤组织的形成。（二）不定芽

4、的分化：（二）不定芽的分化： 由脱分化形成的愈伤组织细胞分化出不由脱分化形成的愈伤组织细胞分化出不定芽及不定根的过程。定芽及不定根的过程。 分化过程受细胞分裂素分化过程受细胞分裂素/生长素比值的生长素比值的影响。通常添加高浓度的细胞分裂素，降低影响。通常添加高浓度的细胞分裂素，降低生长素浓度以诱导不定芽的形成。生长素浓度以诱导不定芽的形成。 （三）不定芽的增殖及生根：（三）不定芽的增殖及生根： 分化形成的不定芽切下后，接种于分化形成的不定芽切下后，接种于增殖培养基中，促进不定芽的增殖，增增殖培养基中，促进不定芽的增殖，增殖的无根苗转接于生根培养基中可以诱殖的无根苗转接于生根培养基中可以诱导不定

5、根的形成。导不定根的形成。二、植物根段培养二、植物根段培养 植物根段培养植物根段培养是指以植物的根切段为是指以植物的根切段为外植体进行离体培养，再生完整植株的过外植体进行离体培养，再生完整植株的过程。是研究根系生理代谢、器官分化及形程。是研究根系生理代谢、器官分化及形态建成的良好实验体系。培养方法与叶片态建成的良好实验体系。培养方法与叶片培养相似。培养相似。 培养过程包括愈伤组织诱导、不定芽培养过程包括愈伤组织诱导、不定芽分化、无菌苗的增殖与生根等。分化、无菌苗的增殖与生根等。大蒜根尖培养及植株再生大蒜根尖培养及植株再生三、植物茎段培养三、植物茎段培养一、植物花器官的培养一、植物花器官的培养(

6、主要见胚胎培主要见胚胎培养和花药培养养和花药培养)二、植物幼果培养二、植物幼果培养(了解了解)三、植物种子培养：三、植物种子培养：定义定义：是指对受精后发育不全的未成熟种子和发：是指对受精后发育不全的未成熟种子和发育完全的成熟种子进行离体培养的技术。育完全的成熟种子进行离体培养的技术。用途用途：打破种子休眠，缩短生活周期；挽救远缘：打破种子休眠，缩短生活周期；挽救远缘杂种，提高杂种萌发率等。杂种，提高杂种萌发率等。对培养的要求对培养的要求：成熟种子萌发培养所用培养基成：成熟种子萌发培养所用培养基成分简单，不需生长调节剂；未成熟种子萌发培养分简单，不需生长调节剂；未成熟种子萌发培养则需要添加一定

7、的营养成分和生长调节剂。若需则需要添加一定的营养成分和生长调节剂。若需要其形成愈伤组织，需要相应的生长调节剂及营要其形成愈伤组织，需要相应的生长调节剂及营养物质。养物质。一、植物分生组织一、植物分生组织(meristem culture)培养：培养：定义：定义：是指对植物的分生组织进行离体培是指对植物的分生组织进行离体培养的技术，包括植物根尖、茎尖等顶端分养的技术，包括植物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。其中茎尖培生组织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。二、植物茎尖二、植物茎尖(stem tip culture)培养：培养： 茎尖培养（茎尖培养（shoot tip culture）指对植物顶端）指对植物顶端的原分生组织和衍生的分生组织的培养。小到的原分生组织和衍生的分生组织的培养。小到10100um的茎尖分生组织，大到几十毫米的茎尖的茎尖分生组织，大到几十毫米的茎尖或更大的芽。茎尖培养的成活率与茎尖大小呈正或更大的芽。茎尖培养的成活率与茎尖大小呈正相关。相关。 茎尖培养广泛应用于种苗快速繁殖，脱毒苗茎尖培养广泛应用于种苗快速繁殖，脱毒苗的生产，品种改良和基础理论研究。快繁可取数的生产，品种改良和基础理论研究。快繁可取数毫米大小，脱病毒培养要求取小于毫米大小，脱病毒培养要求取小于1mm的茎尖。的茎尖。植