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文档简介

1、分子生物学复习资料1、 名词解释1. 表现型:是生物内在遗传因子的外在表现,是生物的一整套显而易见的遗传性状 。 2. 基因型:是某一生物个体全部基因组合的总称。3. 等位基因:基因以不同形式存在4. 中心法则:5. 核酸:是由众多核苷酸聚合而成的多聚核苷酸,包括RNA和DNA。基本单位是核苷酸:有核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸。6. 核苷酸:是由含氮碱基、戊糖和磷酸三部分组成。7. 碱基:由嘌呤和嘧啶。RNA(G、A、U、C),DNA(G、A、T、C)8. 核酸的一级结构:是指构成一个核酸分子的各个核苷酸结构单元的排列次序。9. RNA的二级结构:发夹结构的形成原因:自我配对,在不同区段的互补序

2、列之间形成碱基配对10. 正超螺旋:在一端使绳子向紧缩方向捻转后,将绳子松弛使其处于自然状态,则会产生一个左旋的超螺旋以解除外加的捻转造成的胁变,这样的超螺旋叫做正超螺旋。(双螺旋dna处于拧紧状态时所形成的超螺旋)11. 负超螺旋:在一端使绳子向松缠方向捻转后,将绳子绳子两端连接起来,则会产生一个右旋的超螺旋以解除外加的捻转造成的胁变,这样的超螺旋叫做正超螺旋12. 核酸的变性:在物理和化学因素的作用下,维系核酸二级结构的氢键和碱基堆积力受到破坏,DNA由双链解旋为单链的过程。13. 增色效应:由于DNA变性引起的光吸收增加,也就是变性后DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。14. 核酸的溶

3、解温度(Tm):热变性使DNA分子双链解开一半所需的温度称为溶解温度。(GC含量越高,Tm值越高。经验公式:Tm=69.3+0.41*(G+C)%)15. 核酸的复性:变性DNA在适当条件下,.分开的两条互补单链还可以全部或部分重新形成双螺旋DNA结构的现象称为复性(退火)16. 核酸的分子杂交:利用不同来源的核酸分子按照碱基互补配对的原则形成稳定的杂交双链分子。(升温变性,缓慢退火复性)17. 基因组:细胞或者生物体所携带的一套完整的单倍体序列,包括全套基因和基因间区域。18. 基因:化学本质是DNA,是控制生物性状的基本遗传单位。19. 移动基因(转座因子):细胞中能改变自身位置的一段脱氧

4、核糖核酸( DNA)序列,能从染色体上的一个位置转移到另一个位置,或者从质粒转移到染色体上20. 断裂基因:真核生物结构基因,由若干个编码序列和非编码序列互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码序列再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因(含有内含子的基因)。在编码序列中间插有与氨基酸编码无关的DNA间隔区,这些间隔区称为内含子;而编码区称为外显子。21. 假基因:具有与功能基因相似的序列,但由于有许多突变以致失去了合成有功能蛋白质,所以假基因是没有功能的基因,常用表示。22. 重叠基因:具有独立性但使用部分共同序列的基因23. 结构基因:是能决定某些多肽链(蛋白质)

5、或酶分子一级结构的基因。24. 调控基因:是具有调节控制结构基因表达功能的基因。是调节蛋白质合成的基因。它能使结构基因在需要某种酶时就合成某种酶,不需要时,则停止合成,它对不同染色体上的结构基因有调节作用。25. RNA基因:有的基因之转录不翻译,如核糖体RNA基因和转移RNA基因,产物分别是rRNA和tRNA26. 开放阅读框:是基因序列中的一段无终止序列打断的碱基序列,可编码相应的蛋白。(是结构基因的正常核苷酸序列,从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链,其间不存在使翻译中断的终止密码子)27. 基因家族:真核细胞中,许多相关的基因常按功能成套组合(真核生物基因组中来源相同、结

6、构相似、功能相关的一组基因)28. 基因簇:指基因家族中的各成员紧密成簇排列成大串的重复单位,位于染色体的特殊区域。29. 散布的基因家族:家族成员在DNA上无明显的物理联系,甚至分散在多条染色体上。30. 按序列相似度分:(1)经典的基因家族,家族中个基因的全部序列或至少编码序列具有高度的同源性; 各成员间有高度的序列一致性,甚至完全相同; 拷贝数高,常有几十个甚至几百个拷贝; 非转录的间隔区段而且一致。 (4)超基因家族,家族中各基因序列间没有同源性,但是基因产物的功能相似。31. 重复序列:除了基因家族外,染色体上无转录活性的重复DNA序列家族,主要是基因以外的DNA序列。 分类:串联重

7、复DNA:成簇存在于染色体上的特定区域; 散布的重复DNA:重复单位并不成簇存在,而是分散于染色体的各个位点上,来源于 RNA介导的转座作用。32. 原核生物一般只有一个染色体即一个DNA分子。但是在不同生长条件下,染色体分子可能有一个、两个、甚至更多的拷贝。33. 质粒和噬菌体:质粒是细菌染色体外的可以自主复制的DNA分子。(复制起点、标记基因、多功能位点)34. 生物合成DNA的手段:DNA的复制;逆转录35. DNA复制的基本特征(9个):(1) 以原DNA母链模板,四种脱氧核苷三磷酸为前体,需要镁离子,根据碱基互补配对原则,复制产生新子链。(2) 模板双链DNA分子需要解链,暴露结构内

8、的碱基序列,才能作为模板(3) 为半保留复制:N同位素培养法验证(4) 需要引物:与DNA转录和翻译不同,DNA复制不能从头合成,只能在先合成引物的3-羟基上进行延伸。作为引物一般长度为6nt-15nt的短链RNA,少数为蛋白质。(5) 复制方向总是5 3(6) 复制起始于特定的区域,但终止的位置通常不固定。 复制起始区:体内的DNA复制具有相对固定的起点,作为复制起始点的核苷酸序列。(原核只有一个,真核有多个) 特点:由多个短的重复序列组成;富含有利于DNA双螺旋的AT碱基对;能够被特定的复制起始区结合蛋白识别。 复制叉:DNA复制从起始区启动,该区域的DNA发生解链,形成叉状结构的这种结构

9、形象(7) 一般为双向复制:DNA复制起动后,同时向两个方向展开,进行双向复制,每个复制起始区形成2个复制叉。(少数DNA只进行单向复制,也只有1个复制叉)(8) 半不连续性 冈崎片段:在复制叉中不连续合成的DNA片段 前导链:将连续合成的DNA子链 后导链:不连续合成的DNA子链(9) 具有高度的忠实性:DNA复制出错机会小,忠实性明显高于转录、反转录、RNA复制和翻译36. DNA聚合酶(DNA pol):以DNA为模板,催化DNA合成的聚合酶。 (1)最初由A. Kornberg和Bob Lehman在E.coli中发现。 (2)DNA聚合酶的共同特点是: 需要提供合成模板;不能起始新的

10、DNA链,必须要有引物提供3'OH;合成的方向都是 5'3';除聚合DNA外还有其它功能。 (3)所有原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性,都可以在3'OH上加核苷酸使链延伸 (4)DNA pol由polA基因编码,是一种多功能酶,除了具有5'3'的聚合酶活性外,还具有5'-核酸 外切酶和3'-核酸外切酶的活性 (5)DNA pol:具有聚合酶的活性和3'-核酸外切酶的活性,但无5'-核酸外切酶活性 (6)DNA pol:含多个亚基,具有5'3'的聚合酶活性和3'5'外切酶活

11、性,且由不同亚基承担37. 亚基:是指具有四级结构的蛋白质分子中,由一条多肽链折叠成的三级结构的球蛋白38. 核心酶:由、和亚基组成的,具有单独催化DNA复制作用39. 二聚体:表示相同或同一种类的物质单体,以成双的型态出现及聚合态40. DNA解链酶:催化DNA双链进行解链过程的酶,由两个亚基或六个亚基组成的(环状六聚体)41. 单链结合蛋白:专门与DNA单链区域结合的蛋白质,本身无酶活性 作用:暂时维持DNA单链状态,防止双链复性;防止DNA单链区自发形成链内二级结构,消 除对聚合酶的影响;包被DNA单链区,防止核酸酶的水解;刺激某些酶的活性42. DNA引发酶:一类特殊的催化RNA引物合

12、成的RNA聚合酶。43. DNA拓扑异构酶:一类通过催化DNA链的断裂、旋转和再连接而直接改变DNA拓扑学性质的酶。 作用:清除在染色体重塑、DNA复制、重组和转录过程中产生的正超螺旋,能够细调细胞内DNA 的超螺旋程度,促进DNA与蛋白质的相互作用,防止胞内DNA形成有害的过度超螺旋。44. DNA链接酶:参与DNA复制、修复和重组,是基因工程中的工具酶。复制过程:连接后链上相邻的冈崎片段,是后随链成为一条连续的链;修复和重组中:缝合在DNA链上产生的切口。45. 端粒酶:也称端粒末端转移酶,是真核细胞特有的,位于一条染色体末端的特殊结构,有蛋白质和DNA组成,维持染色体端粒结构的完整性,防

13、止染色体的降解和相互发生不正常的融合或重组。46. 复制子:DNA复制的基本单位,任何一个复制子都含有一个复制起始区,有些复制子还可能含有特定的终止区。(DNA复制:识别、起始、延伸、终止)47. DNA复制的高度忠实性 (1)四种脱氧核苷三磷酸浓度的平衡 (1)DNA pol的自我校对:有DNA本身具有的3'-核酸外切酶的活性来执行 错配修复:是细胞最后一道“防线”专门修复复制中错配的核苷酸。 使用RNA作为引物:似乎既耗能,又耗时;DNA复制的极性也与忠实性相关48. 逆转录:以RNA为模板合成DNA49. 导致DNA损伤的因素与类型 细胞内因:(1)DNA结构本身不稳定; (2)

14、DNA复制过程中自然发生错误,主要是碱基互补配对; (3)细胞内活性氧带来的破坏作用 环境因素:化学(化学诱变剂:黄曲霉素、芥子气、烷基化试剂.)与物理因素(紫外辐射和离子辐射)50. DNA损伤分为:(1)碱基损伤: 碱基丢失,水分子进攻DNA分子上的糖苷键(链接碱基和核糖)引起,以嘌呤为主。危害:导致癌症; 碱基转换,含有氨基的碱基自发或在化学试剂(亚硝酸)的作用下发生脱氨基反应,A和CI和U; 碱基修饰,某些化学试剂、生物试剂或ROS直接作用碱基造成,如:烷基化修饰鸟嘌呤6-烷基鸟嘌呤; 碱基交联,紫外线导致DNA链上相邻的嘧啶碱基,主要是T之间形成环丁烷嘧啶二聚体或6-4光产物; 碱基

15、错配,4中脱氧核苷三磷酸浓度的失调、碱基的互变异构或碱基之间的差别不足以让聚合酶正确区分。(2) DNA链的损伤 链的断裂:离子辐射、化学试剂;DNA链的交联:双功能试剂的作用;DNA与蛋白质之间的交联:UV可以诱导DNA与结合在其上的蛋白质形成共价交联。51. DNA的修复机制(1)直接修复:不需要将受损伤的碱基切除,直接将其逆转为正常的碱基。(嘧啶二聚体、6-烷基鸟嘌呤)(2)切除修复:先切除损伤的碱基或核苷酸,后重新组合成正常的核苷酸,再经连接酶重新连接,经历识别、切除、重新合成合重新连接四个过程。 碱基切除修复和核苷酸切除修复(如何识别损伤) 碱基切除修复BER:直接识别具体的受损伤的

16、碱基,识别的标记是受损伤碱基的化学变化 核苷酸切除修复NER:识别损伤对DNA双螺旋结构造成的扭曲。DNA糖苷酶:具有修复较轻的碱基损伤,并具催化切除功能的酶。所有的DNA糖苷酶都是沿着双螺旋的小沟扫描DNA,发现受损伤的碱基后即与DNA结合,并诱导DNA结构发生歪曲,使损伤碱基被挤出双螺旋进入DNA糖苷酶的活性中心进行切割。AP内切酶:剪切掉DNA 5'端脱嘌呤和脱嘧啶位点的蛋白质酶。(作用位点:DNA分子经DNA核苷酶作用产生的无嘌呤或无嘧啶位点)(3)双键断裂修复(DSBR):同源重组:通过同源重组从同源染色体中获得合适的修复断裂的信息,精确度较高;非同源末端连接(NHEJ):能

17、在无序列同源的情况下,让断裂的末端重新连接起来,精确性低,但是人类修复双链断裂的主要方式。(4)易错修复:由高水平的DNA损伤引起的多种基因的协同诱导作用重组修复(损伤跨越):在DNA进行复制时,由于该损伤部位不能成为模板,不能合成互补的DNA链,所以产生缺口,而从原来DNA的对应部位切出相应的部分将缺口填满,从而产生完整无损的子代DNA的这种修复现象。 重组跨越:利用同源重组的方法将DNA模板进行交换以克服损伤对复制的障碍。 跨越合成:有特殊的DNA pol 取代停留在损伤位点上的催化复制的DNA pol ,在在子链上随机插入核苷酸,以实现对损伤位点无错或易错的跨越。 SOS反应:指细胞在受

18、到潜在致死性压力之后,作出的有利于细胞生存、但以突变为代价的代谢预警反应。52. DNA的突变53. 突变:发生在DNA分子上的可遗传的永久性结构变化54. 突变体:带有一个给定突变的基因、基因组、细胞或个体。DNA突变的本质就是碱基序列上发生的任何变化。根据碱基的变化方式分为:点突变、移码突变。点突变:也称简单突变或单一突变,其最主要的形式为碱基对置换,专指DNA分子单一位点上所发生的碱基对改变,碱基替换又分为转换和颠换两类。点突变具有很高的回复突变率。55. 点突变三种不同结果:沉默突变 TGTTGC CysCys ;错义突变 TGTTGG CysTrp ;无义突变 TGTTGA Cys终

19、止56. 移码突变:又称移框突变,指蛋白质基因的编码区发生的一个或多个核苷酸(非3的整数倍)的缺失或插入。突变将会导致翻译的阅读框发生改变,致使插入点或缺失点下游的氨基酸序列发生根本性的变化,可能导致提前引入终止密码子使多肽链被截断。(隐性突变表现为蛋白质没有活性和和显性突变)57. 突变原:导致DNA突变的内在、外因素总称58. 自发突变:内在因素引起的突变。(自发点突变、自发脱氨基、碱基的烷基化、活性氧类ROS的氧化,对碱基造成的损伤能够改变碱基的配对性质,鸟嘌呤的产物8-氧鸟嘌呤与A配对,导致G:C碱基对到T:A碱基对的颠倒)59. 诱发突变:外在因素引起的突变,碱基类似物、烷基化试剂、

20、脱氨基试剂、羟胺60. 正向突变:指改变了野生型形状的突变(由原始的野生型基因变异为突变型基因的过程)61. 回复突变:突变基因再次发生突变又恢复原来的基因。62. DNA重组:指DNA分子内或分子间核苷酸序列发生的交换、重排和我转移过程。包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型。63. 同源重组:指发生在非姐妹染色单体(sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。由于同源重组严格依赖分子之间的同源性,不依赖于序列的特异性。64. 发生同源重组必须条件:(1)进行重组的交换区域有完全相同或几乎相同的核苷酸序列;(2)两个双链DNA分

21、子之间需要相互靠近,并发生互补配对;(3)需要特定的重组酶的催化,重组酶对碱基无特异性;(4)形成异源双链;(50)发生联会。65. 位点特异性重组:发生在DNA特异性位点上的重组。需要专门的蛋白质识别和结合。(可以发生在2个DNA分子之间:整合或基因重复;也可以发生在1个DNA分子内部:缺失或倒位)66. 位点特异性重组的功能:(1)调节噬菌体DNA与宿主菌染色体DNA的整合;(2)调节特定基因的表达;(3)调节胚胎发育期间程序性的DNA重排。67. 转座重组:指DNA上的核苷酸序列从一个位点转移到另一个位点的现象。转座的机制依赖DNA的交错剪切和复制,但不依赖于同源序列。转座涉及转座酶,解

22、离酶和DNA聚合酶,共分为复制型、非复制及保守型三种类型。转座的过程中会形成共合体。两个转座因子之间的重组会引起缺失和倒位。68. 转座子:基因组中一段可移动的DNA序列,可以通过切割、重新整合等一系列过程从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置。存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。69. 复制型DNA转座子:转座因子在转座期间先复制一份拷贝,而后拷贝转座到新的位置,在原先的位置上仍然保留原来的转座因子。70. 保留型DNA转座子:转座因子直接从原来位置上转座插入新的位置,并留在插入位置上,结果是在原来的位置上丢失了转座因子。71. 自主型转座子:含有开放的阅读框架,编码转座所需的酶

23、或蛋白质,能独立进行转座。72. 非自主型转座子:编码能力不足,不能独立进行转座,但保留了转座所必需的顺式序列。(在自主型转座子编码的转座酶的作用下,可以进行转座)73. 基因表达:转录和翻译的总称。74. 转录:以DNA为模板合成RNA的过程;翻译:以RNA为模板合成蛋白质的过程。75. 转录的一般特征: (1)转录发生在DNA分子上某些特定区域(具有转录活性的区域),也就是说不是所有区域都能被转录,即使能转录也不是每时每刻都在转录。DNA分子上作为模板的那条链称为模板链(无意义链);与模板链互补的链称为编码链(有意义链)。 (2)以四种核苷三磷酸(ATP、GTP、CTP、UTP)为底物,并

24、需要Mg离子的激活; (3)需要模板,需要DNA的解链,但不需要引物; (4)第一个被转录的核苷酸通常是嘌呤核苷酸(占90%左右) (5)与DNA复制一样,转录的方向总是5'3'; (6)转录具有高度的忠实性,指一个特定的基因转录具有固定的起点和固定的终点严格遵守碱基互补配对规则。转录忠实性低于DNA复制,主要原因是RNA pol 缺乏3核酸外切酶活性。 (7)转录是受到严格调控,调控的位点主要发生在转录的其实阶段。76. 转录是一种很复杂的酶促反应,主要由RNA聚合酶催化。RNA聚合酶全名:依赖于DNA的RNA聚合酶,具有高度保守,特别在三维结构上。77. 所有的多亚基RNA

25、 pol 都具有5个核心亚基,真细菌还含有一个识别启动子的因子,真核细胞的三种细胞核RNA pol除具有5个核心亚基外,还有5个共同的亚基。78. 尽管RNA pol与DNA pol都是以DNA 为模板,从5'3'方向催化多聚核苷酸的合成,但是其区别如下:(1)RNA pol只有5'3'的聚合酶活性,没有5'3'核酸外切酶和3'5'核酸外切酶的活性。从而导致丧失自我校对的能力而降低转录的忠实性。(2)真细菌的RNA pol具有解链酶的活性,本身能够促进DNA双链解链;(3)RNA pol能直接催化RNA 的从头合成,不需要引物;(

26、4)RNA pol的底物是核苷三磷酸,而不是脱氧核苷三磷酸;(5)RNA pol使用UTP代替dTTP;(6)RNA pol启动转录需要识别启动子。(7)RNA pol在转录的起始阶段收到多种调节蛋白的调节。79. 转录也划分为识别、(起始)结合、延伸、终止80. 启动子(是识别位点):是基因转录精确和特异性启动所必需的DNA序列。在转录起始点的上游存在启动子序列,具有高度的保守性。作为标记,能够被RNA pol直接或间接识别,并从特定的位点启动基因的转录。原核转录系统RNA pol全酶能直接识别启动子并与之结合,真核转录系统RNA pol不能能直接识别启动子,而是需要特殊的转录因子。81.

27、强启动子:一个基因的启动子序列与一致序列越相近,该启动子的启动效率就越高。(是对转录酶有较高的亲和力,可高效启动转录的启动子,能指导合成大量的mRNA)82. 弱启动子:一个基因的启动子序列与上面的一致序列相差越大,该启动子的启动效率就越低。83. 无效合成:开放复合物内的RNA pol重复催化短RNA分子的合成并释放这样的合成。84. 转录的终止:依赖于因子(同源六聚体蛋白)的蛋白质因子;不需要因子,需要RNA转录物3'-端的终止子的序列。85. 不需要因子的终止机制(简单终止)特征:一是依赖于位于RNA转录物3'-端的一串U序列;二是需要位于紧靠U序列上游的一个富含GC碱基

28、对的发夹结构。(实验证明,凡是影响到富含GC茎稳定的突变与改变dA:rU杂交长度的突变就会影响到终止子的效率。)86. 三种主要的RNA:mRNA、rRNA、tRNA在真核细胞核原核细胞中所经历的后加工反应并不而完全相同,而且同一种RNA前体(一般是mRNA前体)也可能有不相同的加工路线。87. 细胞内,由RNA聚合酶合成的原初转录物转变为成熟的RNA分子所需的一系列变化,该过程称为转录后加工。初级转录物:基因转录的直接产物。88. 原核细胞RNA前体的后加工:mRNA前体的后加工(很少经历后加工)、rRNA前体的后加工(剪切和修剪、核苷酸的修饰)、tRNA前体的后加工(剪切和修剪、核苷酸的修

29、饰)。89. 原核细胞RNA前体的后加工:mRNA前体的后加工、rRNA前体的后加工、tRNA前体的后加工90. mRNA前体的后加工:5-端“加帽”、3-端“加尾”、内部甲基化、拼接和编辑(1)5-端“加帽”(0型(m7GpppN1pN2p)、1型(m7GpppmN1pN2p)、2型(m7GpppmN1pmN2p):加上7-甲基鸟嘌呤 帽子的功能:有助于某些mRNA前体的正确拼接;有助于成熟mRNA转运出细胞核;保护mRNA,避免核酸酶的降解;增强mRNA的可翻译性。(2)3-端“加尾”:尾巴本质是一段多聚腺苷酸序列(poly A),位于绝大多数真核细胞核mRNA的3-端,约由250个左右的

30、腺苷酸组成。poly A尾巴不存在于mRNA的编码链上,也并无相应的poly A序列,是在转录后添加上去的。 顺式元件(内因):位于mRNA前体内部的特殊核苷酸序列,充当加尾信号。 反式元件(外因):是与顺式元件相互作用的蛋白质或催化加尾反应的酶。 尾巴的功能:提高mRNA的稳定性;增强mRNA的可翻译性,提高mRNA翻译的效率;影响最后一个内含子的切除;某些的先天缺乏终止密码子的mRNA通过加尾反应创造终止密码子UGA(在UG序列后加尾产生)或UAA(在UA序列后加尾产生);通过选择性加尾调节基因的表达。(3) 内部甲基化:主要是指mRNA分子内部的某些腺嘌呤碱基C6被甲基化修饰。发生在内含

31、子上,也发生在外显子上,占总腺苷酸的0.1%。(4) 拼接:(5) 编辑:91. 蛋白质的生物合成:翻译92. 参与蛋白质生物合成的主要的成分的有核糖体、mRNA、各种氨酰-tRNA、氨酰-tRNA合成酶和若干辅助性蛋白质因子。93. 核糖体:是催化氨基酸之间形成肽键的分子机器,在翻译过程,与mRNA、可逆结合,按照mRNA的指令,合成具有特定一级结构的多肽链。94. 原生物只有一种核糖体,真生物有很多核糖体(细胞质、线粒体、叶绿体)。任何核糖体,在化学组成上都很相似,都由几种rRNA和几十种蛋白质组成,含有大小两个亚基。95. 小亚基:细菌细胞质核糖体沉降系数30S,rRNA为16S,21种

32、蛋白质;真核生物细胞质核糖体沉降系数40S,rRNA为18S,33中蛋白质,两者都只含1个单一的rRNA。96. 大亚基:E.coli 的沉降系数为50S,34种蛋白质,2种rRNA(5S、23S);真核生物为60S,50种蛋白质,3种rRNA。97. 原核生物16S rRNA的3-端含有的反SD序列能够与mRNA 5-端的SD序列互补配对,这对mRNA识别核糖体上的正确定位和阅读框内起始密码子有着重要作用。98. 反SD序列:99. SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。SD序列在细菌mRNA起始密码子AUG上游7-12个核苷酸处,有一段富含嘌呤的碱基序列,能与细菌16SrRNA

33、3端识别,帮助从起始AUG处开始翻译。100. 核糖体的三维结构及其功能:(1)A部位(A site),即氨酰tRNA 结合部位,也称受体部位(2)P部位(P site),即肽酰tRNA 结合部位,也称供体部位(3)E部位(E site),即空载tRNA在离开核糖体之前与核糖体临时结合部位。(4)肽酰转移酶活性部位,该部位负责催化肽键的形成(5)mRNA的结合部位(6)多肽键离开通道(7)一些可溶性蛋白质因子(起始因子、延伸因子、终止因子)的结合部位101. 同工受体:携带同一种氨基酸的几种不同tRNA分子102. mRNA是翻译的模板,由它知道蛋白质的合成。内部至少含有一个有起始密码子开始、

34、一终止密码子结束的一段连续的核苷酸序列构成的开放阅读框。103. tRNA在翻译中的功能:(1)将氨基酸转运到核糖体上;(2)通过反密码子与mRNA上的密码子之间的相互作用对遗传密码进行解码,将其最终转化成多肽链上的氨基酸序列。tRNA的二级结构:三叶草结构;三级结构:呈胖的倒L型。104. 氨酰tRNA合成酶:氨基酸在参入多肽链之前必须被活化,氨酰tRNA是它的活化形式。105. 辅助因子:在翻译某一阶段与核糖体临时结合。起始因子(IF参与肽链合成起始)、延伸因子(EF参与肽链延伸)、释放因子(RF参与多肽链的释放)、核糖体循环因子(RRF促进核糖体循环)106. 翻译的四个阶段:翻译具有极

35、性、三联一体密码、反密码子决定特异性、摆动规则(1)翻译具有极性:阅读模板时的方向性(翻译时阅读mRNA的方向都是从5'3');多肽链延伸的方向总是从N-端C-端(2)三联体密码(简单性):由3个核苷酸决定1种氨基酸的编码形式107. 遗传密码的主要性质:(1)简并性与兼职;(2)遗传密码是明确的,而不是含糊的(一个指编码一种氨基酸);(3)密码子的选定不是随机的,代表相同或相似氨基酸的密码子在序列上倾向于相似;(4)通用性和例外;(5)不重叠性;(6)无标点;108. 反密码子决定特异性:肽链延伸过程中正确的氨基酸的参入取决于密码子与反密码子之间的相互作用,与tRNA所携带的

36、氨基酸无关。109. 摆动规则:允许某些反密码子不止识别一种密码子。110. 摆动规则的意义:在于翻译时,tRNA和mRNA因为有一对碱基不是严格配对,氢键较弱而更容易分离,从而加快翻译的速度。111. 翻译的详细机制:氨基酸的活化(识别SD序列与识别mRNA上的反SD序列)、起始、延伸、终止和释放及折叠与后加工。112. 翻译的起始:是整个翻译过程的限速步骤。分为:起始密码子的识别、起始复合物的形成。113. 翻译延伸:当起始复合物形成后,进入延伸阶段。多次发生由进位、转肽和移位反应构成循环。114. 翻译后加工的主要方式:多肽链的修剪、剪切或拼接、N-端添加氨基酸、氨基酸残基的修饰(磷酸化

37、、乙酰化、甲基化、羧基化、羟基化、糖基化.)、二硫键的形成、添加肤质因子(金属离子、辅酶或辅基)、多肽链的折叠和四级结构的形成。115. 磷酸化:由蛋白质激酶催化,主要发生在Ser 、Thr 、Tyr 这三种羟基氨基酸上,被修饰的氨基酸主要是His 。反应是可逆的116. 激酶:是一类从高能供体分子(如ATP)转移磷酸基团到特定靶分子(底物)的酶117. 蛋白质的一级结构决定其高级结构。118. 分子伴侣:一类能帮助其他蛋白质进行正确组装、折叠、转运、介导错误折叠的蛋白质进行降解的蛋白。当蛋白质折叠时,它们能保护蛋白质分子免受其它蛋白质的干扰。不构成这些蛋白质结构执行功能时的组份。是胞内蛋白折

38、叠、组装与转运的帮助蛋白。119. 分子伴侣的功能:(1)防止新生肽链错误的折叠和聚合;(2)帮助或促进这些肽链快速的折叠成正确的三维构象,成为具有完整结构和功能的多肽和蛋白质。120. 四级结构的形成(亚基):自组装过程,需要分子伴侣的帮助,暂时与亚基结合没保护亚基的疏水表面防止它们聚集,直到各亚基接触。121. 蛋白质翻译后的定向和分拣:蛋白质合成以后所经历的这种,如组蛋白进入细胞核、细胞色素c进入线粒体、蛋白类激素被分泌但细胞外等转移和定位的过程。122. 信号肽:是一段在一级结构上连续的氨基酸序列,通常有1560个氨基酸残基组成,它们有的N末端,有的在C末端、有的在多肽链的内部。引导蛋

39、白质从细胞液进内质网、高尔基体、胞外、细胞核、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体的分拣信号属于信号肽序列。蛋白质不止一种信号序列。信号肽序列在分拣完成后被信号肽酶切除。123. 信号斑:存在于已折叠的蛋白质中,是蛋白质完成折叠以后,在其表面形成的有来自不同区域的氨基酸序列组合在一起的三维分拣信号。124. 翻译后途经:通过翻译后途经进行定向、分拣的蛋白质由细胞核基因编码、定位于线粒体、质体、细胞核和过氧化物酶体等细胞器。125. 生物体内的基因根据表达的状况分为两类:(1)管家基因;(2)奢侈基因126. 管家基因:指所有细胞中均要表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的,维持细胞生存

40、不可缺少的,始终表达,表达量相对恒定。127. 奢侈基因:只是在特定的时段里或者在需要的时候才表达。128. 基因表达的多种水平调控:DNA水平、转录水平、转录后加工水平、翻译水平、翻译后加工水平。129. 根据调控的效果分,基因表达的调控模式有:(1)正调控;(2)负调控130. 正调控:在没有调节蛋白会者调节蛋白失活的情况下,基因不表达或表达量不足。一旦存在调节蛋白或者调节蛋白被激活,基因则才能表达或大量表达。131. 激活蛋白:在基因表达调控过程中,某一特定的调节蛋白被激活,而使基因表达的酶。调节基因与操纵基因结合后能增强或启动其所调控基因转录的调节蛋白132. 负调控:在没有调节蛋白会

41、者调节蛋白失活的情况下,基因正常表达。一旦存在调节蛋白或者调节蛋白被激活,基因则不表达,即基因表达受到阻遏。133. 阻遏蛋白:基于某种调节基因所生成的一种控制蛋白质,在原核生物中具有抑制特定基因(群)产生特征蛋白质的作用。调节基因与操纵基因结合后能减弱或阻止其所调控基因转录的调节蛋白134. 别构蛋白:是指除了具有结合底物的活性部位,还具有结合调节物别构部位的一种调节蛋白质。别构蛋白的活性部位和别构部位可以分属不同的亚基(活性亚基和调节亚基),活性部位之间以及活性部位与调节部位之间通过蛋白质构象的变化而相互作用。135. 别构效应物:细胞中某些特定的物质能与别构蛋白结合,使调节蛋白的构象发生

42、变化,从而改变别构蛋白与操纵基因的结合活性,影响到基因转录的活性,这些特定物统称为别构效应物。(不直接涉及蛋白质活性的物质,结合于蛋白质活性部位以外的其他部位(别构部位),引起蛋白质分子的构象变化,而导致蛋白质活性改变的现象。)136. 操纵子:是原核生物基因表达和调控最重要的形式,原核生物基因多数以操纵子的形式组成基因表达调控的单元。137. 组成操纵子的最基本元件:启动子、操纵基因、结构基因、相关的调节基因138. 启动子:是能被RNA pol 识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。(一个操纵子只有一个启动子,并位于结构基因上游,控制整个结构基因群的转录)139. 结构基因:操纵子中被调控的编码蛋白质的基因。

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