实验二芦丁的提取及鉴定-沈阳药科大学课程建设

1、实验二芦丁的提取及鉴定(-)概述芦丁(rutin)广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以 上，如烟叶、槐花、养麦和蒲公英屮均含有。尤以槐花米(为植物sophora japonica 的未开放的花蕾)和养麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁是出斛 皮素(quercetin) 3位上的疑基与芸香糖(rutinose)(为葡萄糖(glucose)与鼠 李糖(rhamnose)组成的双糖)脱水合成的昔。芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为 174178°c,无水物188-190°co溶解度:冷水中为1:10000；热水中1:200；冷

2、乙 醇1:650；热乙醇1:60；冷毗噪1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯,不溶于苯、乙瞇、 氯仿、石油瞇，溶于碱而呈黄色。芦丁具有维生索p样作用。有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用 作防治高血压病的辅助治疗剂，亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。 实验目的和要求实验目的%1 通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。%1 通过芦丁结构的检识，了解甘类结构研究的一般程序和方法。%1 了解uv及nmr在黄酮类化合物结构鉴定屮的应用。 要求%1 要拿到以下三个化合物：芦丁、榊皮素、芦丁的全乙酰化合物。%1 能够拿根据化学试验及uv、nmr数据初步推断出芦丁的结构。并对黄酮

3、 类化合物的结构测定有-般性的了解。试验方法芦丁的提取与分离(见下图)芦丁的鉴定%1 芦丁的定性反应取芦34mg，加乙醇56ml使其溶解，分成三份作卜谜试验：a. 取上述溶液12ml,力12滴浓盐酸，在酌加少许镁粉，注意观察颜色变化 情况。b. 取上述溶液12ml,然后滴加2%柠檬酸的屮醇溶液，注意观察颜色变化 情况，在继续向试管中加入2%zroc12的甲醇溶液，并详细记录颜色变化情况。c. 取上述溶液12ml,然后再加入10%a-等体积的蔡酚乙醇溶液，摇匀，沿 管壁滴加浓硫酸，注意观察两液面产生的颜色变化。%1 芦丁的紫外光谱解析取芦丁溶于色谱纯甲醇屮，加入规定的试剂，测定其uv光谱，试解析

4、光谱并初步判断其结构。芦丁的nmr波谱解析a. 芦丁的三甲基硅醯nmr谱的解析b. 十乙酰化芦丁的nmr光谱解析%1 芦丁水解后糖与甘元的鉴定a. 水解方法：精密称取芦丁lg （ ±0.01g）,加1%硫酸100ml,加热40min, 放冷静置，过滤。所得沉淀用少许水洗除酸，干燥称重，计算昔元与糖的重量比。 然后用乙醇（95%大约10ml）进行重结晶，即得昔元。b. 昔元的鉴定：用纸色谱法与对照品对照。槐花米粗粉（20g）置500ml烧杯中，加水300ml,在搅拌下加入石灰乳（11.5g），调至ph89,加热至微沸，保持30min,趁热抽滤。残渣滤液在6（）7（） °c下用

5、浓盐酸调至 ph45,精置lhr,抽滤。滤液沉淀（粗制芦丁）重结晶将沉淀悬浮丁蒸饰水中，加热 煮沸15min,趁热过滤ii残渣滤液充分静置后过滤，6070°c下干燥芦丁 （精制品）芦丁的提取与分离流程图（四）实验指导1. 本实验讲解要点及注意事项%1 芦丁提取方法，重点介绍碱酸法的原理及注意事项。%1 定性实验的目的、意义及注意事项。%1 uv及nmr光谱在芦丁结构检识中的应用。2. 实验报告要求%1 碱酸法提取芦丁的原理%1 定性反应的反应机理%1 黄酮类uv和nmr的特点%1 详细记录定性反应结果%1 绘制色谱结果模拟图，并计算rf值3 思考题%1 昔类结构的检识大体程序如何？%1 苜类水解有几种催化方法？%1 怎样确定芦丁结构中糖基是连接在榊皮索3-0-±?%1 怎样证明芦丁分子中