微波辅助酶法提取大叶栀子花总黄酮工艺探究

1、微波辅助酶法提取大叶梔子花总黄酮工艺探究摘要：为优化微波辅助酶法提取大叶梔子花 (gardenia jasminoides var grandiflora) 总黄酉同工艺。 在单因素试验基础上，应用中心组合设计，采用二次多项式 逐步回归分析对提取工艺条件进行优化，确定了微波辅助酶 法提取大叶梔子花总黄酮工艺的最佳条件，即酶用量为 1.8%, ph为5.0,酶解温度为70 °c,酶解时间为1.0 h； 按此工艺条件，大叶梔子花总黄酮提取率可达2. 16%关键词：大 叶梔子(gardenia jasminoides var. grandiflora);总黄酮；微波辅助提取法；纤维素酶解法

2、 中图分类号：tq461文献标识码：a文章编号： 0439-8114 (2016) 23-6219-05d0i： 10. 14088/j. cnki. issn0439-8114.2016.23.055abstract : for optimizing the technology of extracting total flavonoids from flowers of gardenia jasminoides var grandiflora by microwave-assisted enzymatic method, based on single factor experiment

3、and by application of central composite design, the technological conditions for extracting total flavonoids from flowers of gardenia jasminoides var. grandiflora were optimized with quadratic polynomial stepwise regression analysis. it was concluded that the optimal conditions for the extraction we

4、re the enzyme dosage of 1. 8%, ph 5.0, enzymolysis temperature of 70 °c, and enzymolysis time for 1.0 h. under these conditions, the extraction yield of total flavonoids from flowers of gardenia jasminoides var. grandiflora was up to 2. 16%.key words： gardenia jasminoides var. grandiflora； tota

5、l flavonoids ；microwave-assisted extraction ；cellulase enzymatic method'梔子(gardenia jasminoides var. grandiflora) 属于茜草科梔子属物种1,又名大花梔子、荷花梔子、牡 丹梔子，为常绿灌木，主要分布在江苏、浙江、四川等地2。 其叶大，花大而富浓香、重瓣，不结果。大叶梔子花通常被 修剪成球状植于街道旁或者公园景观中，用于绿化造景3。 其叶、花中含有大量的黄酮类化合物。药理实验表明，黄酮 类化合物有明显的抗溃疡、解痉、抗炎及降血脂等生物活性 4。目前，对茜草科植物梔子果实中提取黄酮

6、类化合物的 文献报道较多5-8,但对大叶梔子花中黄酮类化合物的提 取工艺研究报道很少。以大叶梔子花为原料，对影响其黄酮 提取的主要因素用响应面试验，以总黄酮提取率为指标，用 方差分析法进行分析，从而优选大叶梔子花总黄酮的提取条 件并测定其黄酮提取率，为大叶梔子花资源的合理利用提供 科学依据1材料与方法1.1材料、试剂与仪器大叶梔子的花采自赣州生态公园，经赣南医学院药学院 中药鉴定教研室程齐来教授鉴定芦丁标准品（含量298%,天津一方科技有限公司）；纤 维素酶（3x104 u/g,江苏淮安百麦绿色生物能源有限公司）; 无水乙醇、石油瞇、盐酸、亚硝酸钠、硝酸铝均为分析纯uv-6100pcs型紫外可

7、见分光光度计（上海美谱达仪器有 限公司）；sha-c水浴恒温振荡器（金坛市白塔新宝仪器厂）; hh-2数显恒温水浴锅（金坛市城东新瑞仪器厂）；wf-4000 微波快速反应系统（上海屹尧分析仪器有限公司）；fw135手 提中药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；fa1104分析 天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；re-52aa旋转蒸发 仪（上海亚荣生化仪器厂）；shz-d （iii）循环水式真空泵（巩 义市予华仪器有限责任公司）；202a-2电热干燥箱（上海阳 光试验仪器有限公司）；kq3200db型数控超声波清洗器（昆 山市超声仪器有限公司）1.2试验方法1.2. 1标准曲线的绘制精密称取

8、13.50 mg芦丁标准 品，试验用现配的60%乙醇溶解，定容于100 ml容量瓶中， 摇匀，得135.0 mg/l的芦丁标准储备溶液。再精密量取芦 丁标准储备液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml,分别置于 10.0 ml容量瓶中。依次分别加60%乙醇稀释至5.0 ml,加 入5%亚硝酸钠溶液0.3 ml,摇匀，静置5 min,再加入0. 3 ml的10%硝酸铝溶液，迅速摇匀，静置6 min,最后加入4ml 的4%氢氧化钠溶液，混匀，用乙醇稀释至刻度，充分摇匀。 放置15 min后，以不加芦丁的试剂作空白对照，检测波长 设定为509 nm。得吸光度(y)与浓度x (mg/l)的标准回 归方程 y=0. 010 0x-0. 000