楂曲平胃合剂的质量标准研究

1、楂曲平胃合剂的质量标准研究邱晓莉1李张宇2刘佳2（1西南药业股份有限公司 重庆400038； 2太极集团有限公司 重庆 401174）【摘要】目的：建立楂曲平胃合剂的质量控制方法。方法用薄层色谱法鉴 别楂曲平胃合剂中得厚朴、苍术；用高效液相色谱法测定制剂中的橙皮昔含量。 结果薄层色谱中斑点清晰、易于识別；hplc法精密度、重现性良好，橙皮昔进 样量在12.4124μg/ml范围内与峰面积线性关系良好（r二0.9991）,平均加 样回收率为102.1%, rsd为1.73% （n=5）o结论所建立的定性定量方法可有效 控制楂曲平胃合剂的质量。【关键词】楂曲平胃合剂；薄层鉴别；高效液

2、相色谱法；橙皮昔；含量【中图分类号】r927.2【文献标识码】a【文章编号】2095-1752 （2015） 12-0368-02楂曲平胃合剂是太极集团重庆桐君阁药厂独家品种，由山楂、六神曲、苍术、 厚朴、鸡内金、陈皮、甘草等制成，具有燥湿健脾、消食散满的功效，用于治疗 脾胃不和，不思饮食，胶腹胀满，呕吐恶心，噫气吞酸，大便澹泄。其原标 准仅有性状鉴别项，不能很好地控制药品质量。为进一步控制药品的内在质量, 保证临床用药安全有效，我们开展了提高其质量标准的实验研究，增加了方中厚 朴、苍术的薄层鉴别和橙皮昔的含量测定。1仪器与试药1.1仪器hp1100 型高效液相色谱仪;zorbax （agil

3、ent）色谱柱（c18, 250-4.6mm,5&aeg-45sm型电子天平（十万分之一，日木岛津公司）。1.2试药楂曲平胃合剂（批号：77060001, 77060002, 77060003）。橙皮昔、厚朴酚、 和厚朴酚对照品及苍术对照药材均购自中国药品生物制品鉴定所提供。乙腊为色 谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。2方法与结果2.1薄层层析鉴别2.1.1厚朴的薄层鉴别参照2005版药典董香正气口服液鉴别（1）项下条件，以厚朴酚、和厚 朴酚为对照品，以石油醴（60-90°c） 乙酸乙酯甲酸（85 ： 15 ： 2）为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在

4、100°c加热至斑点显色清晰。 并分别考察了以下样品处理方法：取本品30ml,用氯仿提取2次，每次30ml, 合并乙醴提取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。阴性对照溶 液同法处理。取本品30ml,用石油隴（3060°c）提取2次，每次30ml,合 并石油醸提取液，低温蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。阴 性对照溶液同法处理。结果表明，样品处理方法所制供试品的色谱在对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无斑点；而样品处理方法 所制得的供试品溶液和阴性对照溶液在对照品色谱相应的位置上均无相似的斑 点。故样品处理方法最后确定选择法

5、。经多批样品鉴别实验表明，该方法可靠， 重现性好，结果见附图2.1.2苍术的薄层鉴别参照九味羌活丸中苍术的薄层鉴别3,以苍术药材为对照，以石油脳 （60-90°c）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10% 硫酸溶液，在100°c加热至斑点显色清晰。苍术对照药材的处理参照2005版药 典苍术药材（蕾香正气口服液）的鉴别4,并分别考察了以下样品处理方法：取 本品50ml,用乙醴提取2次，每次50ml,合并乙隴提取液，自然挥干，残渣加 甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。阴性对照溶液同法处理。取本品50ml, 置烧瓶中，连接挥发油测定器，自测定器上端加水使充满刻

6、度部分，并溢流入烧 瓶时为止，再用移液管加入乙酸乙酯lml,然后连接回流冷凝管，加热至微沸, 并保持2小时，放冷，分取乙酸乙酯液，作为供试品溶液。阴品对照溶液同法处 理。结果表明，样品处理方法所制供试品的色谱在对照品色谱相应的位置上, 显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无斑点；而样品处理方法所制得的供试品溶 液和阴性对照溶液在对照品色谱相应的位置上均无明显特征斑点。故样品处理方 法最后确定选择法。经多批样品鉴别实验表明，该方法可靠，重现性好，结果 见附图2。2.2含量测定2.2.1色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙月青55%醋酸（20：80）,检测波长283nm。理论板数按橙皮昔峰计算应

7、不低于1500。2.2.2溶液的制备 对照品溶液：精密称取橙皮卄对照品适量，加甲醇制成 每lml含0.13mg的溶液，即得。供试品溶液：取本品10ml,精密加入40ml甲醇。回流提取1小吋，过滤, 残渣用甲醇清洗，合并转移至50ml容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，作为供试品 溶液。阴性对照溶液：取阴性对照溶液10ml,同供试品溶液配制方法制备得阴性 对照溶液。2.2.3专属性试验精密量取对照品溶液、阴性对照溶液及供试品溶液各10μl,注入液相色 谱仪，橙皮昔色谱峰保留时间约8min,阴性对照溶液与供试品溶液在保留时间 约12min位置处有相同吸收峰，但在橙皮昔对应位置无吸收峰。图谱如

8、下：a：对照品溶液，b：阴性对照溶液，c：供试品溶液224线性范围考察 精密称取橙皮昔对照品3.1陀至25ml容量瓶中，用甲 醇溶液溶解，定容。分别精密吸取上述对照品溶液lmk 2ml、4ml、6ml、8ml 至10ml容量瓶中，分别注入高效液相色谱仪，测定橙皮背峰面积积分值，以橙 皮昔的浓度为横坐标，其峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，计算得冋归方 程：结果表明橙皮昔浓度在12.4124μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好 的线性关系。2.2.5精密度实验 取同一标准品溶液，用0.45μm滤膜滤过，精密量取 续滤液，注入液相色谱仪，重复进样6次，记录色谱图，计算

9、得橙皮昔峰面积的 rsd 为 0.6%。2.2.6重复性实验 取同一批号样品（批号77060001 ）,照上述供试品溶液 的制备方法制备5份供试液，进样测定，记录色谱图，计算得橙皮甘峰面积的 rsd 为 0.19%。2.2.7稳定性实验取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8小时进样测 定，记录色谱图，计算得橙皮甘峰面积的rsd为1.71%,表明供试品溶液在8小 时内稳定。2.2.8加样冋收率实验 采用加样冋收法测定冋收率。精密量取本品5份， 每份lml,分别精密加入8ml （0.14mg/ml）的橙皮昔对照品，约1.12mg,精密 加入甲醇4ml冋流热提1小吋，残渣用甲醇清洗，合并转移至5

10、0ml容量瓶中， 加甲醇定容，摇匀，作为供试品溶液。进样测定，计算得平均冋收率为102.1%, rsd 为 1.73%。2.2.9样品测定 取3批样品，照前法测定含量,其结果分别为1.615 mg/ml,1.610 mg/ml, 1.650 mg/mlo3 讨论3.1流动相的选择根据文献和药典中橙皮卄含量测定方法，我们筛选了不同比例不同浓度的乙 腊40%醋酸（20： 80）、乙腊45%醋酸（15： 85）、乙腊55%醋酸（20： 80）等体系。 根据试验结果，选择流动相为乙腊55%醋酸（20： 80）,检测波长283nm,柱温 30°c,流速lml/min为测定条件，阴性无干扰，结果

11、稳定，方法简便易行。3.2提取方法的选择根据文献，目前橙皮昔的提取方法有冋流热提、超声提取等，且橙皮昔易溶 于热甲醇。因此，结合实际情况，对于本合剂选用甲醇冋流提取。我们考察了不 同浓度（70%、80%、90%）的甲醇冋流提取05h、lh> l5h对其含量结果的影 响。结果表明，80%浓度的甲醇，冋流提取样品1小时，所得供试品的指标含量 较高，因此我们最终将提取方法确定为采用80%的甲醇冋流提取lho4 结果楂曲平胃合剂是复方制剂，成分复杂，干扰较大，本研究建立了方中厚朴、 苍术的tlc鉴别法，便于该制剂的快速质量控制。hplc法测定其有效成分橙皮 昔的含量约为1.6mg/ml,考虑到生产加工过程中的损失及药材质量差异较大， 故确定本品橙皮