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1、实验四实验四 药物体外抗菌试验药物体外抗菌试验微生物与免疫学实验微生物与免疫学实验琼脂扩散法琼脂扩散法连续稀释法连续稀释法纸片法纸片法 今天要用显微镜，请单学号同学去今天要用显微镜，请单学号同学去领显微镜，双学号同学不用领领显微镜，双学号同学不用领1、 KB纸片法（学生操作学生操作） 纸片法常用于测定试验菌对各种抗生素的敏感性，所以又叫做药物敏感试验，在临床上可作为选择用药的重要依据。操作步骤操作步骤1 培养试验菌：将菌种斜面培养物移种到肉汤培养液中，37培养过夜，使菌液浓度约为1.5108cfu/ml.2 涂布试验菌：用无菌吸管吸取一滴菌液滴加在MHA平板上，用无菌涂布棒（L棒）将菌液在整个

2、平板上涂布均匀。3 贴含药的滤纸片：用无菌镊子贴加含药滤纸片。4 将平板倒置于37 培养24h，观察结果，测定抑菌圈的大小，并对照NCCLS的解释标准来判断试验菌的药敏性。2.0cm2.5cm青先链庆K-B纸片法示意图纸片法示意图试验菌平板注意事项注意事项1 以上各不操作要严格的无菌操作，镊子和L棒都要用酒精烧过之后冷却再使用。2 贴纸片的时候一定要一次把纸片定位好，接触琼脂后就不能再移动含药滤纸片。3 不同的抗菌药物其抑菌圈直径的敏感/耐药分界点不一样；有的抗菌药物对不同的菌种的分界点也不一致；应根据NCCLS最新公布的分界点数据来读取药敏试验的结果。2 2、连续稀释法、连续稀释法 连续稀释法连续稀释法：人为配置连续梯度的药物浓度来检测其抗菌能力，从而找出药物的最小抑菌浓度。 最小抑菌浓度（最小抑菌浓度（MIC）：能抑制测试菌生长的最低药物浓度即为MIC。 最小杀菌浓度（最小杀菌浓度（MBC）：能杀死测试菌的最低药物浓度即为MBC。 试验测试试验测试(1h)1、革兰氏染色 做好后请

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