实验一722型分光光度计的性能检查

1、实验一 722型分光光度计的性能检查目的1、了解722型分光光度计的性能2、熟悉仪器的技术指标及一般检查方法3、掌握仪器的正确使用方法二、原理722型分光光度计是采用单光束自准式光路，色散元件为衍射光栅，能在近紫外，可 见光谱内对样品进行分析，根据被测物质在可见光区范围内（360800nm ）吸收特性 及吸光的程度（吸光定律：a=-lgt=8bc ）对物质进行定性和定量测定的仪器。为保证分析的灵敏度和准确性，国家计量局规定：对仪器应定期进行检查，检查周期 为一年。检查的主要技术项目有：仪器外观、波长精密度和重现型、分辨率、吸收值精密和仪 器的线型范围。对于符合闭耳定律的溶液测量时溶液的浓度与吸

2、光值之间有良好的线 性；一套比色皿之间应互相匹配以及仪器的绝缘等。上述各项性能应符合仪器所规定 的技术指标（见操作步骤），本实验采用规定方法对上述各项目进行检查。三、试剂和器皿1、k2o2o7 标准溶液:lmg'ml12、c0ci2 标准溶液:lomgml-13、cuso4 标准溶液:lomgml-14、0.1mol/lhcl5、0.05mol/lh2s046、4只比色皿、10支10ml比色管、1支2ml移液管和4支10ml移液管实验步骤1、仪器外观检查 仪器所有紧固件应紧固良好，各调节器能正常工作，仪器之余平稳工作台上操作时不得有摆动现象，比色皿座应推动自如，无松动、卡住的 现象。光

3、束透过各透光孔应畅通无阻。仪器所配比色皿的透光面应光洁，无表面刮痕、擦毛和斑点，任何一面不得有裂 纹。2、波长精度的检查在波长标度上的波长标度值误差，应符合以下规定：波长范围 420500nm510600nm610 * 700nm允许误差=±3nm= ±5nm=±6nm检查方法：使用仪器配备的错钱玻璃片，该片对不同波长的光透光率不同。在分光光度计上测定其透光率波长曲线，从曲线上找出错钱玻璃片的透光率峰值，则该仪器的波长误差入=a - aoo aa=± 2nm 入0等于529nm （或808nm ）3、线型误差的检查在吸光度为00.8（透光率为80%-16

4、% ）的范围内，将符合比耳定律的溶液进行测定，在不同的吸光度值范围测量溶液浓度的线型误差应符合以下规定：0.6 0.8吸光度范围0.1 0.30.3 0.6线性误差w±6%三±3%三±4%检查方法：配制k2cr2o7 ； cocl2 ； cuso4溶液，每种溶液配置以下三个浓度：溶液名称溶液浓度（xlovg'mr1 ）测定波长备注心（3辺070.03000.09000.150440nm浓度以 ci计最c0ci22.006.0010.00510nm浓度以 co 计量cuso42.006.0010.00690nm浓度以cu计量以溶剂为空白，用仪器分别测量以上各

5、个溶液的吸光度，每一浓度的溶液必须重复测量3次，取其平均值。将记录的吸光度与对应浓度，按下列公式计算各点的线性误差。c2k = a2,；cik 二 a3'人的线性误差-(a-a|)xl00%a】仏的线性误差=(a厂人2100%(a a )邮线性误牡弋宀叱式中：cl、c2、c3是同一种溶液的三个浓度；al、a2、a3是测得的相应的吸光度4、灵敏度的检查仪器的灵敏度是度变化值与相应溶液浓度变化值之比，其比值应符合下表规定：溶液名称灵敏度(a/ggtnl1 )测定波长k2cr2o7>0.012/3440nmc0ci2>0.014/200510nmc11so4>0.014/2

6、00690nin检查方法：配制如下浓度的溶液：溶液名称溶液浓度(xlogml-1 )测定波长备注k2cr2o70.0300 与 0.0330440nm浓度以ci计量c0ci22.00 与 2.20510nm浓度以co计量c11so42.00 与 2.20690nm浓度以cu计量在指定波长下分别测量各溶液吸光度，设每种溶液的两个浓度间变化值为ac ,测得的相应的吸光度为aa ,则灵敏度s=aa/aco5、重现性检查 仪器在同一工作条件下，用同一种溶液连续重复测定7次其吸光度最大读与最小读数之差不应大于0.5%检查方法，将波长定在690nm，用含cu 2.00x1 ovgmr1硫酸铜溶液连续测定7

7、次，计算其吸光度最大读数与最小读数之差。6、吸收池(比色皿)匹配性的检查在同一波长下，配套使用的吸收池之间透光 率之差要求不大于0.5%o检查方法：将波长固定在440nm，用含cr 0.0300x103|ig-ml1的k2cr2o7溶液分别 注入一套吸收池，将其中一只推入光路中，调节至95% ( t值可选小于100%而 又尽量大的任一值)，然后将各吸收池一一推入光路，记录各吸收池同第一只吸收 池之间的透光率差值，差值不大于0.5%即可配对或配套使用。五、仪器的外形和使用方法1、722型分光光度计仪器外形图 2、使用方法: (1 )将灵敏度旋转置“1”档(放大倍数最小)(2)开启电源，指示灯亮，

8、仪器预热20分钟，选择开关置于“tt(3 )打开试样室盖(光门自动关闭),调节“0%旋钮，使数字显示为"00.0"(4 )将装有溶液的比色皿放置比色架中(5 )旋动仪器的波长手轮，把测试所需的波长调节至刻度线处(6 )盖上样品室盖，将参比溶液比色皿置于光路，调节通过率t00%t”旋钮，使数字显示为“100.0t”(如果显示不到100%t ,则可适当增加灵敏度的档数，同时应重复“3”调整仪器的“00.0"。(7 )蒋被测溶液置于光路中，数字表上直接读出被测溶液通过率t值。(8 )吸光度的测量,按照“3"，“6”调整仪器的“00.0"和“100.0

9、” ,将选择开关置于a旋动吸光度调零旋钮，使得数字显示为000 ,然后移入被测溶液，显示值即为试样的吸光度a值。(9)浓度c的测量：选择开关由a旋至c ,将以标定浓度的溶液移入光路，调节浓度旋钮，使数字显示为标定值，将被测溶液移入光路，可读出相应的浓度值。(io)如果大幅度改变测试波长时，在调整“oo.tr和“io(r后稍等片刻(因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间)，当稳定后，重新调整“00.0”六、注意事项 使用前，使用者应该首先了解本仪器的结构和原理，以及各个旋或之功能。 仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。 仪器左侧下角有一只干燥剂筒，应保持其干燥，发现干燥剂变色应立即更新或烘干 后再用。 每台仪器所配套的比色皿不能与其他仪器上的比色皿单个调换 当仪器停止工作时，切断电源，电源开关同时切断，并罩