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文档简介
1、一、实验目的了解果蝇的生活习惯,掌握果蝇饲养管理的方法,学习鉴定果蝇的雌雄性别和某些遗传性状。二、实验原理果蝇是遗传学研究重要的实验材料和模式生物,属双翅目果蝇科。因为其易于饲养,染色体数目少, 具有许多天然的或诱发的可遗传突变性状等优点而受到全世界遗传学家学家的广泛关注和使用,并且利用果蝇解决了一系列重大的遗传学问题。我们的果蝇杂交实验,是重走经典科学研究之路, 也能掌握一定的实验方法和技能, 也有利于我们今后的学习和研究。目前已发现 1000 多种果蝇,果蝇以酵母菌为主要食料,能发酵的水果或植物基质,都可用作果蝇的饲料。果蝇具有以下特征:生活史短,每12 天左右即可完成一个世代;饲养容易,
2、以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖;繁殖能力强,每只受精的雌蝇可以产卵 500 个左右;突变型多,突变性状多,多数是形态变异,容易观察;染色体少、个体小,是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物。三、实验材料及仪器实验材料:各种形态的果蝇。实验试剂:乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。实验仪器:培养瓶、麻醉瓶、瓶塞、冰袋、体视显微镜一台、解剖针、滤纸、毛笔、白瓷板、酒精棉球、玻璃板、小烧杯。四、实验方法1、 搬移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶取新培养瓶一瓶, 将棉塞略为松动, 放置于右手侧, 取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧,以左手握住瓶颈,两指轻扣棉塞顶部,以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面
3、,将培养瓶置于左手侧, 拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端,再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起,以右手两指夹住棉塞外端,再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上,再以左手握住两瓶口相接处,翻转使新培养瓶位于下方,然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底,使果蝇掉落于新培养瓶瓶底,然后迅速盖上各瓶棉塞。2、 麻醉方法取一麻醉瓶, 瓶口应与培养瓶大小相仿,使两瓶口相对, 培养瓶在上, 用手拍击培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶内,迅速盖上棉塞, 滴加 3 滴乙醚于小管口中的棉花上,约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底,即可将果蝇倒出进行操作。注意:过度麻醉将导致果蝇死亡。如果果蝇的翅膀与身体呈45 度角翘起,表明麻醉过度,不能复苏。3、
4、观察、计数取白瓷板平置于桌面,将麻醉的果蝇倒于白瓷板上,解剖镜或低倍显微镜下进行性状观察,并将雌雄果蝇分开放置。接种观察过的果蝇(2-3 对)到新配置的培养瓶中,为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死,先将培养瓶横放,将麻醉的果蝇用毛笔转移到瓶壁,待其苏醒后再将培养瓶正立。4、 再麻醉观察或计数过程中,果蝇可能苏醒, 可准备一玻璃培养皿,内以胶带贴一小块棉球,滴入适量乙醚, 培养皿口朝下置于一旁备用, 如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下, 盖于果蝇上方待其麻醉后再移开。5、 果蝇形态观察果蝇具有丰富的外表形态差异,包括眼色、眼形、翅形,刚毛形状与数目等。进行果蝇杂交实验时必须
5、区分性别,务必熟悉雌雄果蝇的差异。五、实验结果体型较小,身长3 4mm。果蝇成虫分头、胸、腹三部分。头部的前端钝而平突,有一对大的复眼,三个单眼和一对触角,触角芒呈羽毛状。胸部有三对足,一对翅膀,一对平衡棒。腹部背面为有色素带的背板,腹面有腹板。外生殖器位于腹部末端。雌果蝇特征:个体较大,外生殖器色浅,腹部末端较尖,较宽厚呈卵圆形,腹部背面有五条黑条纹,腹部腹面有6 个腹片,无性梳。雄果蝇特征:个体较小,外生殖器色深,腹部末端较钝,腹部背面有三条黑条纹,最后一条极宽,并延伸到腹面,腹部腹面有4 个腹片,前腿跗节上有性梳。果蝇胸足跗节共有5亚节。雄蝇第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结
6、构,即“性梳”,放大 100 倍左右可看清这一结构。六、注意事项用于杂交的果蝇要轻度麻醉,以免死亡。 观察过的果蝇不能回收到原瓶,而要将它们置于装有乙醇的尸体瓶中; 使用麻醉瓶前一定要确保瓶内没有其他果蝇, 防止遗传混杂。 确保瓶塞不要超出瓶口,以防瓶塞被碰掉,果蝇飞出。七、思考题1、 果蝇的生活史分为哪几个阶段?果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4 个时期:卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度20 25,温度越高,生长越快,但高于30不育甚至死亡。卵:白色,椭圆形,长约0.5mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。幼虫:一龄二龄三龄,三龄体长4-5mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。蛹:化
7、蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化。2、 如何准确鉴定果蝇的雌性个体?要领?雌性体长 2.5 毫米 ,雄性较之还要小。雄性有深色后肢,可以此来与雌性作区别。雌雄鉴别方法:雌果蝇体型大,末端尖。背面:环纹5 节,无黑斑。腹面:腹片7 节。第一对足跗节基部无性梳。雄果蝇体型小,末端钝。背面:环纹7 节,延续到末端呈黑斑。腹面:腹片 5 节。第一对足跗节基部有黑色鬃毛状性梳。3、 为什么说果蝇是遗传学研究的好材料?1)生活史短,每12 天左右即可完成一个世代;2)饲养容易,以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖;3)繁殖能力强,每只受精的雌蝇可以产卵500 个左右;4)突变型多,突变性状多,多数是形态变异,容易观察;5)染色体少、个体小,是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物。4、将野生型和突变型的性状填表。突变性状基因符号染色体号性状特征棒眼B1复眼呈狭窄垂直棒形,小眼数少卷曲翅Cy2翅膀向上卷曲,纯合致死小翅m1翅膀小,长度不超过身体白眼w1复眼白色黑檀体e3身体呈乌木色,黑亮黑体b2体黑色,比黑檀体深黄体y1全身呈浅橙黄色残
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