血清AFP、GP73和GPC3联合检测

1、血清、和联合检测在原发性肝癌诊断中的应用范公忍，王伟芳，韩聚强，姜胜莹，曹建彪（北京军区总医院全军肝病治疗中心，北京）摘要：目的探讨甲胎蛋白（）、高尔基体蛋白（）、磷脂酰肌醇蛋白聚糖（）联合检测在原发性肝癌（）诊断中的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验（）检测例患者、例肝硬化（）患者、例慢性乙型肝炎（）患者及名健康人（正常对照组）血清、含量，同时采用免疫化学发光法检测血清含量，并对检测结果进行比较。结果组、血清水平分别为±、±和（±），与组、组和正常对照组血清水平比较差异具有统计学意义（均）；血清、联合检测诊断的敏感性为，准确性为。结论血清、联合应用能弥补单项

2、肿瘤标志物临床应用的不足，对提高的阳性检出率及鉴别诊断具有重要的临床意义。关键词：甲胎蛋白；高尔基体蛋白；磷脂酰肌醇蛋白聚糖；联合检测；原发性肝癌原发性肝癌（，）是临床常见的恶性肿瘤之一，病死率在消化系统恶性肿瘤中位居第位，在全球发病率位居第位，近年来在我国发病率呈逐年上升的趋势。由于临床上确诊时多属中晚期，术后容易复发及远处转移，预后较差，因此早期诊断是延长患者生存期的关键环节。血清甲胎蛋白（，）是目前临床上最常用的肿瘤标志物，但仍有 的患者呈阴性或低浓度水平，还有部分慢性肝病患者升高，但为非恶性肿瘤。因此迫切需要寻找敏感性、特异性更高的肿瘤标志物和检测方法来提高的诊断水平。近年来研究证实，

3、高尔基体蛋白（，）和磷脂酰肌醇蛋白聚糖（，）与的发生、发展及预后关系密切，可用于患者的早期诊断，被认为是种具有潜在价值的肿瘤标志物。现有文献报道在临床血清诊断中是一个非常有价值的指标，其诊断的敏感性和特异性均高于，但关于在各种肝脏疾病中的临床意义各家报道不一。因此有必要对的临床意义作深入细致的探讨。为了解和在临床上应用的价值，本研究采用酶联免疫吸附试验（，）对例患者分别检测血清中和水平，并与检测结果进行了比较。材料和方法一、研究对象选择年月至年月北京军区总医院全军肝病治疗中心住院的患者例作为研究对象，男例，女例，年龄岁，入组患者均经超声或计算机断层扫描等影像学检查证实肝脏有实性占位性病变，伴或

4、不伴阳性，同时经肝组织活检病理检查确诊，肝功能级或级，诊断符合卫生部“原发性肝癌诊断规范（年版）”诊断标准。肝硬化（，）患者例，男例，女例，年龄岁；慢性乙型肝炎（，）患者例，男例，女例，年龄岁，诊断符合年中华医学会肝病学分会、感染学分会“病毒性肝炎防治指南”中病毒性肝炎诊断标准。另选择名健康人作为正常对照组，男名，女名，年龄岁，经检测各型肝炎病毒标志物及均为阴性，无心、肝、肺、肾功能异常。对组研究对象年龄、性别等进行比较，差异均无统计学意义（均）。二、试剂与方法血清检测采用，试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供，参考值为阳性；血清试剂购自美国公司，参考值为阳性，仪为美国伯乐型酶联仪。血清检测使

5、用美国雅培免疫化学发光分析仪及同型配套试剂，参考值为阳性。受检者在入院后均清晨空腹采集静脉血，不抗凝，×离心，留取血清转移至另一清洁的管内，放置冰箱内低温保存，统一检测。三、统计学方法采用统计软件进行数据分析。计量数据用珋±表示，多组比较采用方差分析，组间两两比较采用检验；计数资料用百分率表示，组间比较采用检验。以为差异有统计学意义。结果一、血清、和检测结果组患者血清、和水平及阳性率明显高于其他组，差异有统计学意义（均）；组间进行两两比较，组患者血清、和水平明显高于组和组（均）；组和组均高于正常对照组（均）。见表。二、项指标诊断的受试者工作特征（，）曲线分析、和的曲线下面积

6、分别为、和，见图。当截断值取时，诊断的敏感性和特异性分别为（）和（）；当截断值取时，诊断的敏感性和特异性分别为（）和（）；当截断值取时，诊断的敏感性和特异性分别为（）和 （）；项指标联合检测诊断的敏感性为，特异性为，联合检测诊断的效能显著高于单项检测（）。见表。讨论目前对的诊断依然依据病理及影像学诊断技术，但仅靠影像学检查对肝内的良恶性病变鉴别很困难，尤其是肝癌与肝炎后肝硬化造成的结节性改变不易鉴别。我国的患者绝大多数基于长期慢性肝炎、肝硬化患者，在这些高危人群中早期发现并及时治疗可明显提高年生存率。血清肿瘤标志物可以在影像学发现之前异常表达，对恶性肿瘤的发现起到监测和预警作用。因此，探讨联合

7、多种肿瘤标志物检测提高检出率非常必要。是存在于高尔基体上的一种型跨膜糖基化修饰蛋白，含个氨基酸，在十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（，）中显示其相对分子质量为×。近期的研究发现在患者的胆管上皮细胞中呈高水平表达，参与细胞黏附及信号传导，影响蛋白质的分泌和稳定性，参与机体的免疫调节及炎症反应。等研究发现在肝癌患者血清中，水平显著升高，而在正常人肝细胞中表达很少，甚至不表达。近一步的研究发现，其在患者中表达明显上调，与乙型肝炎、丙型肝炎、酒精性及自身免疫学性肝炎引起的肝损伤有明显差异，对于患者的早期诊断及鉴别诊断具有重要临床意义。本研究结果显示，在患者血清中显著升高，组与、及正常对照组比

8、较，差异有统计学意义（均），证实血清对的诊断是一个较好的检测指标。这主要是因为时，大量由肝癌细胞或胆管上皮细胞合成并分泌到血液中，从而促使血清中水平显著升高。本研究中和患者亦有升高，但明显低于组，且阳性检出率很低，显示出可作为敏感的诊断标志物，此结果与国内外文献报道相一致。杨颖等研究显示在和的诊断中，血清检测与的诊断效能相似，患者的表达水平明显高于无的患者，小肝癌（）患者水平高于大肝癌（）患者，差异具有统计学意义（均）。结果似乎显示出检测具有对早期诊断的价值。等研究发现与联合可作为肝脏疾病的检测指标，尤其可以提高阴性患者的检出率，并能为慢性肝损伤及的鉴别诊断提供依据。本研究结果发现诊断的效能与

9、是否升高并无明显关系，阴性的患者，血清亦可以升高；和患者由于存在肝细胞的损伤，血清水平一度处于低水平表达并与表达常有较多重叠，但无诊断价值。因此，检测可以帮助诊断阴性的；同时对于、患者与的鉴别诊断可提供参考。属于膜性硫酸乙酰肝素类糖蛋白超家族成员，是由蛋白质、脂类和糖三者共价连接的复杂糖复合物，其氨基端（）为可溶性蛋白，在肝癌细胞中表达时可分泌至外周血液中，这是外周循环血液中能够检测到的分子生物学基础。临床基础研究显示，肝细胞发生癌变时可异常表达，激活的可通过多种信号传导通路促进肝细胞恶性转化，增强其侵袭转移能力。研究者可利用血清学方法检测肝癌高危人群血清中表达水平的变化，探索表达与肝癌发生、

10、发展及临床预后的相关性，从而为的诊断及预后判断提供帮助。本研究采用分别检测了、和患者及正常人群血清中表达水平，结果显示组血清呈高表达，而在、及正常对照组呈低表达，甚至无表达。江枫等应用检测发现患者血清浓度高于肝炎后、患者及健康对照组（均）；诊断的敏感性和特异性分别为和；进一步的研究发现，能显著提高小肝癌与肝硬化结节的鉴别诊断。等研究发现患者血清中分布量与不具有相关性。最近有研究报道，与检测对的诊断具有较好的一致性，且在诊断小肝癌方面优于，但检测对诊断无意义（曲线下面积为）。本研究显示与和相比在患者血清中表达水平较低，但与和患者血清中表达水平相比差异仍具有统计学意义（均），同时发现在低水平表达的

11、患者血清中表达水平也比较高。本研究结论与等的报道不一致，分析原因可能与入选病例资料及检测试剂的来源不同有关。因此，对于在患者的表达特征及其临床价值尚需大样本、多中心的实验数据进行深入研究。近年来的研究表明，多种肿瘤标志物与联合检测可相互弥补单一检测的不足，从而提高的诊断效能。有研究将与和联合可明显提高的检出率，对的早期诊断具有重要的临床意义。本研究探讨了、与联合检测对的诊断价值，项联合检测对 诊断的敏感性为，明显高于单项检测的（）；同时项联合检测准确性为，而特异性仍可维持在较高水平。结果提示单项检测用于的诊断优势可能并不十分明显，而与等项指标联合检测可明显提高的诊断效率，特别是对于无临床症状或

12、体征及阴性患者的诊断具有较高的临床价值。本研究结果表明、联合检测可明显提高的诊断率，具有较好的临床应用价值。参考文献， ： ，（）：武永乐，李冰，刘晖，等对阴性乙型肝炎病毒相关肝细胞癌的诊断价值北京医学，（）：陈洁，姚敏，姚登福磷脂酰肌醇蛋白多糖介导的信号通路与肝癌靶向治疗临床肝胆病杂志，（）：郑联穈，魏开鹏，潘兴南，等血清高尔体蛋白诊断肝细胞癌价值探讨实用肝脏病杂志，（）：中华人民共和国卫生部原发性肝癌诊疗规范（年版）临床肝胆病杂志，（）：翁彭剑，高园生，鲁姣英，等检测血清对诊断价值的探讨中国卫生检验杂志，（）：朱凡，沈世强，柯章明中晚期肝癌患者综合治疗的临床观察中国肿瘤临床与康复，（）：，：，（）：， ，（）：，（）：，（）：， ， ： ，（）：，（）：李继荣血清高尔基体蛋