雄黄、水银、砒霜的的毒性研究

1、雄黄的毒性研究 雄黄(主要成分为As2S2或As4S4)作为我国一种重统中药。现代药理学证明雄黄具有抗肿瘤、镇痉、止痛杀虫和抗菌等功效。尤其是近年来其对慢性粒细胞白血病和实体瘤出的良好治疗效果得到了世界的广泛关注。长期以来中医认为雄黄有毒，内服宜慎，不可久用，因此雄黄受到药监部门的严格控制。正确的利用雄黄其有效作用而降低或避免毒性是关键。然而，由于缺乏系统的安全性研究，迄今对雄黄的相对安全剂量及其用药时间尚不清楚，临床上由于不合理的使用雄黄或含雄黄中成药而导致中毒的情况时有发生。因此正确使用雄黄，人们对雄黄开展毒性研究。1 雄黄的毒理学研究1 1 雄黄的急性毒性 岳旺等4曾最早对常德产雄黄的急

2、性毒性进行研究，结果表明，其对昆明种小鼠的半数致死量( median lethal dose，LD50为3 207 g·kg 1， ig 给予雄黄后小鼠可立即死亡，并出现肝、肺充血。后来康永等5和仝燕等6对湖南石门产雄的研究结果却表明，雄黄并无明显的急性毒性，LD50 10 g·kg 1。上述研究结果出现很大的差异，原因可能为产地不同雄黄毒性成分的含量不同所致。目前，炮制是控制雄黄毒性的主要手段，为考察炮制对雄黄急性毒性的影响，李信民等7以ICR小鼠为对象， ig给予小鼠炮制雄黄混悬液，测得其LD50为( 19 3 ± 1 1) g·kg 1 ，95%

3、可信区间为( 18 3 20 4)g·kg 1。张伟等8则分别对天然雄黄和精制雄黄进行了研究，结果显示，经Bliss 法计算， ig 给予小鼠天然雄黄混悬液，剂量为( 3 21 ± 0 76) g·kg 1 ，而ig 给予小鼠精制雄黄混悬液，LD50为25 g·kg 1 ，且7 d 内小鼠饮食饮水正常，生长状况良好，外观和行为等均无异常表现，无一死亡，提示精制雄黄25 g·kg 1 仍是安全的。上述研究结果表明，炮制或加工处理后雄黄的急性毒性很低。1 2 雄黄的长期毒性 康永等5和仝燕等6给成年大鼠ig 给予雄黄，连续6周，结果发现，雄黄0 2

4、 和0 4 g·kg 1 组尿素氮含量明显升高，肝细胞有浊肿和脂肪样变性，肾近曲小管有脂肪样变性、间质充血并有炎症细胞浸润等现象。这表明雄黄具有一定的长期毒性，并且肝和肾可能是主要的靶器官。为研究炮制对雄黄长期毒性的影响，张亚敏等9对雄黄生品和炮制品分别进行了长期毒性实验。结果发现，雄黄生品0 49 和0 98g·kg 1 和炮制品3 51 g·kg 1 均可引起血红蛋白和血清谷丙转氨酶含量降低，且雄黄生品0 98 g·kg 1 组大鼠的肝可见点状坏死，肝细胞可见嗜酸性改变和部分核皱缩。范麒如等10则分别观察了天然雄黄和精制雄黄的长期毒性，结果发现，连续

5、ig 给药4 周后，各给药组与对照组相比小鼠肝脏器系明显降低，但天然雄黄降低作用更明显，且天然雄黄组小鼠病理检查可见明显肝损伤。上述结果提示，炮制或加工处理后雄黄可能仍具有一定的长期毒性，但较天然雄黄的长期毒性明显降低。二、雄黄的毒性与炮制的研究 雄黄的主要成分是As2S2 或As4S4，此外还含有少量的As2O3 及As2O5。As2S2 或As4S4 不溶于水，微溶于稀酸，难于吸收，一般认为毒性很小，As2O3 及As2O5 溶于水，是雄黄发挥药效或产生毒性的主要成分。雄黄经过水飞炮制后，可溶性的成分大部分被去除，剩余成分主要为不溶性的As4S4，还有少量可溶性成分。雄黄中的砷进入机体后，

6、会发生复杂的变化，可溶性的As2O3 或As2O5 和难溶性的As2S2 或As4S4 进入体内后，都可进行生物转化。一般认为砷在体内的简要代谢过程为: iAsiAsMMAMMADMADMA尿排出。 雄黄的炮制方法有干研法,水飞法,煮法,熬法,油熬法,复制法,火飞法等,而以干研法和水飞法最为常用。雄黄经水飞成极细粉未,在反复操作中,As203 就逐渐溶解去除。同时,雄黄中主要成分二硫化二砷不溶于水,故水飞对其没有影响。实验证明:用水飞法除去As203 是一个较好的方法。水飞时用水量越多,则As203 含量就越低。当用水量为1:125 时、As203 含量已接近lmg/g;1：250 时,As2

7、03已降至0.21mg/g 以下。目前,许多研究者己尝试将雄黄加工提升至纳米级尺寸。这些方法,虽在一定程度提高了雄黄的生物利用度,但是由于是混悬液入药,仍然存在活性成分不明确、不能完全溶解等原因造成制剂困难。加之生产纳米雄黄需要大型设备和先进的技术,普及使用尚有困难。这些现状都严重的制约了它的进步开发和临床应用。张静红等利用微生物炮制雄黄，发现微生物新法炮制雄黄后，药效增强、砷蓄积毒性降低，为科学炮制雄黄提供了新的思路。三、雄黄的安全剂量 梁爱华等2在雄黄中As2S2质量分数为90%，可溶性砷为1. 696 mg·g1 情况下，给小鼠单次灌胃给药的LD50 为20. 5g·

8、kg1( 等于摄入可溶性砷34. 8 mg·kg1) ，相当于人日用量约12 812 倍。而给大鼠反复灌胃给药时，雄黄超过一定剂量用药达到2 个月或以上时，可造成肾脏和肝脏病理损害，其中肾脏显示更为敏感。大鼠灌胃雄黄1，2，个月的无明显毒性剂量( NOAEL) 分别为160，20，10 mg·kg1·d1( 累积摄入可溶性砷8. 14，2. 04，1. 53 mg·kg1) 。估计临床使用雄黄的相对全剂量范围为10 160 mg( 依用药时间不同) 。结论: 反复使用雄黄时，建议在可溶性砷1. 7 mg·g1 的条件下，雄黄用药12 周时，剂量

9、不超过160 mg; 用药24 周时，剂量不超过20 mg; 如果降低剂量至10 mg 或以下，则在用药6 周内相对安全。综上所述，雄黄具有一定的砷毒性，其毒性大小与炮制、加工、给药剂量和给药时间等密切相关。深入研究雄黄的毒性，安全剂量，为雄黄在临床的应用打下一定的理论基础。参考文献:1 张志杰，周群，尉京志，张艳玲，孙素琴，黄璐琦，等 我国药用雄黄的晶体结构鉴定J 光谱学与光谱分析，2011，31( 2) : 291-2962 江苏新医学院 中药大词典M 上海: 上海人民出版社，1977: 23-273 周超凡，林育华 传统中药雄黄应用概况及其安全性J 药物不良反应杂志，2008，10( 2

10、) : 104-109砒霜的毒性研究进展1·砒霜的毒性 砒霜是剧毒药物，家兔静脉注射 LD为 10mg/kg，人经口服As2O3 最小致死量MLD为0.76mg/kg, 当人体摄入超量的As2O3 时就会出现急性或慢性中毒症状。 损伤的程度取决于摄入人体As2O3 的量、途径和持续时间。 As2O3中毒机制在于与巯基的强亲和力，它能与多种含巯基的酶结合，如丙酮酸氧化酶、单胺氧化酶、葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、细胞色素氧化酶等，从而使细胞的呼吸和氧化过程降低，细胞有丝分裂发生紊乱。砒霜的毒性峻烈，口服 550mg即可中毒，致死量 60200mg 。中毒后的临床表现主要有以下症状：胃肠道反

11、应：急性中毒多在口服后 0.51h 后出现口咽干燥、灼热、流涎、剧烈呕吐、吞咽困难、腹痛、腹泻；吐出物初似米泔样，后呈黏液或胆汁状，腹泻大便如米泔样挟有血丝。 大量吐泻可出现极度衰弱，引起脱水、休克。 肝肾损害症状：肝损害明显，可出现黄疸、肝昏迷，肾功能受损出现蛋白尿、血尿。神经系统症状：急性期可见头晕、头痛、烦躁不安、惊厥、昏迷。 部分患者缓解后发生多发性神经炎，或有吞咽困难，发音障碍，个别产生精神症状如幻听等。呼吸系统症状：可见呼吸困难，发绀，重症患者可因呼吸中枢麻痹于中毒后 24h至数日而死亡。 循环系统症状：可见血压下降，心律失常，可并发中毒性心肌病，阿斯综合征。 急性砒霜中毒者多于

12、24h 内死亡，病者眼结膜充血，鼻及口腔黏膜充血、水肿，或糜烂出血，即所谓“七窍出血”。 患者大多死于肝、肾功能衰竭和呼吸麻痹。2·砒霜的现代临床应用传统认为砒霜有蚀疮祛腐、杀虫、劫痰、截疟等作用。 用于痔疮、瘰疬、痈疽恶疮、走马牙疳、癣疮、寒痰哮喘、疟疾、痢疾等病证。 现代研究表明，砒霜所含的成分As2O3 为良好的抗癌剂，能对肿瘤细胞产生细胞毒作用，抑制肿瘤细胞核酸代谢，干扰 DNA、RNA 的合成，诱导肿瘤细胞产生凋亡，并能抑制肿瘤细胞端粒酶的活性，从而发挥抗癌效应，临床还可用于多种肿瘤的治疗。 现就近十年砒霜临床研究概述如下。2·1 急性早幼粒细胞白血病 自 20

13、世 纪 70 年代我国学者应用砒霜治疗本病以来，砒霜已成为治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的主要药物,临床应用As2O3 注射液治疗 APL 疗效突出。 这是传统医学对攻克恶性肿瘤作出的一大重要贡献，著名的科学杂志曾著文称之为“这是继全反式维甲酸之后又一令人震惊的发现。”有研究表明，As2O3诱导 HL-60细胞凋亡与抑制 Sulvivin 基因表达/激活 Caspase-3蛋白的活性有关【1】。这也是砒霜治疗白血病的主要机制之一。2·2 原发性肝癌 近年来，As2O3应用于治疗原发性肝癌也有了很大突破。 临床试验和应用结果显示，As2O3抗肝癌等多种消化道肿瘤的作用有着诱人的前景

14、【2】, As2O3注射液动静脉双路治疗中晚期原发性肝癌取得较好的近期疗效。 陈丽军【3】 采用 0.1% As2O3注射液 30mL经肝动脉插管注入（dl），0.1% As2O3注射液 10nL加入5%CS250mL每日 1 次静脉滴注(d2d10)治疗中晚期原发性肝癌 30 例。21d 为 1 周期,至少治疗 2 周期。 能够使肿瘤体积缩小，改善患者食欲，增加患者体重，减轻肝区疼痛等，提高患者生活质量，且毒副反应轻微。2·3 哮 喘 支气管哮喘 （哮喘）是儿科的一种常见病和多发病，是由多种细胞和细胞组分共同参与的气道慢性炎症性疾患。 这种气道炎症导致气道高反应性，当接触多种刺激因

15、素时，即出现反复发作的喘息、气促、胸闷、咳嗽等。 现代治疗主要以糖皮质激素为主，而对中药As2O3治疗哮喘的作用认识甚少，国内外文献也罕见报道。 高洁【4】采用As2O3 贴敷大椎穴治疗哮喘取得显著疗效，临床疗效治疗组总有效率 92%，对照组总有效率 40%。 表明As2O3可降低血清 ICAM-1,提高 PEF 值，减少发病次数，从而改善气道炎症，降低气道阻力及控制哮喘复发。水银的毒性研究进展汞（Mercury）俗称水银，是在常温下唯一呈液体的金属，银白色，易流动。汞及其化合物能选择性地损害中枢和周围神经系统，引起人易兴奋、易激动以及震颤、感觉异常、听力障碍、视野缩小、共济失调、精神性格异常

16、等严重症状。1.汞污染的危害20 世纪50 年代初，日本水俣镇不断发现一些怪病人，口齿不清、步态不稳、面部痴呆、耳聋眼瞎、全身麻木，最后神经失常、大喊大叫而死，同时，有些猫、狗发疯。这种中枢神经性疾患的公害病称“水俣病”。经研究发现，水俣镇上的一些化工厂将大量含汞工业废水直接排放到水俣湾的水域中，汞随水中食物入人体，最终导致“水俣病”。汞在人体多积蓄于肾、肝、脑中。有机汞比无机汞化合物毒性大10100 倍，主要毒害神经系统，破坏蛋白质和核酸。人的病状与甲基汞积蓄量关系：使人知觉异常（25mg）、步行障碍（55mg）、发音障碍（90mg）、死亡（200mg 以上）。2.汞致神经损伤的机制2. 1

17、 蛋白质的抑制。甲基汞可以抑制 ! - 微管蛋白，进而干扰神经元内部的结构以及生化的动态平衡。有资料提示这可能是慢性汞中毒与 AD（早老性痴呆）之间可能的机制之一。2.2破坏线粒体的功能 已有动物实验证明，中、高、低剂量有机汞染毒的小鼠，线粒体 ATP 酶活性有所下降，以高剂量组最明显，超微结构改变随染毒剂量增加而加重，表明汞对小鼠线粒体结构及功能产生明显影响。3.雌性生殖毒性 Verschaeve(1994)等认为，甲基汞不仅作用于雌鼠生殖系统进而通过胎盘直接造成对胎鼠的损伤，也可对卵细胞造成遗传损伤从而危害仔代。1998年石龙等研究发现，接触甲基汞后，卵巢内与能量产生有关的ATP酶水平和活

18、性显著下降，而与DNA损伤后修复合成有关的DNA聚合酶水平和活性显著增高，说明甲基汞对卵巢线粒体功能的破坏导致其能量产生受阻、DNA片段缺失从而影响卵巢的功能拉J。甲基汞对雌性机体的危害与摄入的剂量有关。如果摄人量超过阈剂量，可引起雌鼠产生急性、亚急性中毒而不能妊娠；如果摄入量未达到阈剂量，那么虽能妊娠，但多导致流产或死产；如果雌鼠摄入量接近致畸剂量，由于甲基汞的亚致畸量对其不产生任何损伤，因此胎鼠虽然可正常出生，但由于此时甲基汞已大部分侵入胎鼠体内，广泛侵害胎鼠脑组织。往往使胎鼠神经系统的中毒表现更加严重。周万方(2000)的实验表明，长期接触汞对作业女工生殖机能及其子代健康有一定的影响"J。调果结果显示，长期接触汞的女工月经周期缩短、经期延长、经量增加、痛经等发生率高于对照组，且有统计学意义(P<005)；妊娠中毒症、自然流产、早产、死亡或出生缺陷、新生儿的体重偏低等发生比对照组明显增多(P<005)。2