采血前初筛检验

1、湘潭市中心血站 张锦泉2021-7-181湘潭市中心血站 张锦泉2021-7-182采血前初筛检验采血前初筛检验湘潭市中心血站湘潭市中心血站 质管科质管科 张锦泉张锦泉湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-183主要内容主要内容& 一、一、ABOABO血型鉴定血型鉴定& 二、乙肝表面抗原（二、乙肝表面抗原（HBsAgHBsAg）检测）检测& 三、血红蛋白含量检测三、血红蛋白含量检测& 四、四、ALTALT检测检测湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-184一、一、ABOABO血型鉴定血型鉴定F ISBT ISBT认可的血型系统

2、有认可的血型系统有2929个，个，221221个抗原。个抗原。v血型系统：血型系统：ABOABO、Rh(D)Rh(D)、MNSMNS、P P、kellkell、lewislewis、DuffDuff以及以及kiddkidd等。等。v临床上与输血关系密切的有临床上与输血关系密切的有ABOABO血型系统和血型系统和Rh(D)Rh(D)血型系统。血型系统。血型血型(blood group)(blood group)是指红细胞膜上是指红细胞膜上特异抗原特异抗原的类的类型。型。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-185vABOABO血型系统的分型是由体内血型系统的分型是由体内A A、

3、B B抗原和抗体两者共抗原和抗体两者共同决定的。同决定的。v人体内的人体内的ABOABO血型抗原不仅存在于红细胞膜上，而且血型抗原不仅存在于红细胞膜上，而且广泛地存在于很多组织细胞膜和体液、分泌液中【唾广泛地存在于很多组织细胞膜和体液、分泌液中【唾液、胃液、精液等】。液、胃液、精液等】。 v人体人体ABOABO血型抗体最多的是血型抗体最多的是IgMIgM类天然抗体，在类天然抗体，在ABOABO母母婴血型不合的妊娠或输婴血型不合的妊娠或输ABOABO不相容的血液后可产生不相容的血液后可产生IgGIgG类免疫抗体。类免疫抗体。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-186湘潭市中心

4、血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-187ABO血型系统的抗原和抗体血型系统的抗原和抗体湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-188ABOABO血型鉴定原理：血型鉴定原理： 根据根据IgMIgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理，用已知结合能出现凝集反应的原理，用已知IgMIgM类特异性标类特异性标准抗准抗A A和抗和抗B B血清来测定红细胞上有无相应的血清来测定红细胞上有无相应的A A抗原或抗原或（和）（和）B B抗原，同时用已知标准抗原，同时用已知标准A A型红细胞和型红细胞和B B型红细型红细胞

5、来测定血清中有无相应的天然胞来测定血清中有无相应的天然IgMIgM类抗类抗A A或（和）抗或（和）抗B B。 v红细胞凝集的本质是红细胞凝集的本质是抗原抗原- -抗体反应。抗体反应。正向定型：正向定型：标准血清标准血清 + + 被检红细胞被检红细胞反向定型：反向定型：标准红细胞标准红细胞 + + 被检血清被检血清湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-189含某种抗含某种抗原的红细原的红细胞胞+含相应含相应抗体的抗体的血清血清红细胞凝集反应红细胞凝集反应(agglutination)实验原理：实验原理：血型不相容的两人血液血型不相容的两人血液混合混合,则红细胞可凝集成簇则红细胞

6、可凝集成簇抗抗A抗抗B湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1810结果判定结果判定抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清A型型抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清B型型抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清O型型AB型型湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1811血型鉴定错误的原因血型鉴定错误的原因v当献血者较多时，献血者急于离开，缩短了抗原、当献血者较多时，献血者急于离开，缩短了抗原、抗体的反应时间，抗原较弱者没有出现结果就判读。抗体的反应时间，抗原较弱者没

7、有出现结果就判读。v责任心：由于工作人员责任心不强，把抗责任心：由于工作人员责任心不强，把抗A A、抗、抗B B交交叉搞错等。叉搞错等。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1812v技术因素：当标本采集技术技术因素：当标本采集技术( (手指采血手指采血) )不过关时，不过关时，样本血量不足而致抗原量的不足再加反应时间不充分样本血量不足而致抗原量的不足再加反应时间不充分时，初筛时易导致时，初筛时易导致A A型、型、B B型错查成型错查成O O型，或型，或ABAB型错查型错查成成A A型或型或B B型型; ;甚至采集手指血时因局部挤压过重因大甚至采集手指血时因局部挤压过重因大量

8、组织液的产生而致引起血型的假凝，如量组织液的产生而致引起血型的假凝，如O O型错查成型错查成ABAB型或型或A A型或型或B B型型; ;少数操作手法不良人员在将血清与少数操作手法不良人员在将血清与血球混匀过程中造成污染，致使血球混匀过程中造成污染，致使A A型或型或B B型错查成型错查成ABAB型。型。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1813v实验中温度过高或过低、时间太长、水分蒸发时容实验中温度过高或过低、时间太长、水分蒸发时容易出现串钱状现象。或者某些肝肾疾病，传染病或红易出现串钱状现象。或者某些肝肾疾病，传染病或红细胞沉降速度增快的病人，血中纤维蛋白原增高或为细

9、胞沉降速度增快的病人，血中纤维蛋白原增高或为异常蛋白血症，输代血浆血中含大量高分子右旋糖酐，异常蛋白血症，输代血浆血中含大量高分子右旋糖酐，都能使红细胞形成串钱状，被误认为凝集。都能使红细胞形成串钱状，被误认为凝集。v亚型因素：亚型因素：A A、B B抗原较弱、正定型检测时凝集很弱抗原较弱、正定型检测时凝集很弱或不出现凝集，或不出现凝集，B B弱亚血型，加上街头采血点只做正弱亚血型，加上街头采血点只做正定型，不做反定型，一些抗原较弱的定型，不做反定型，一些抗原较弱的ABOABO亚型难于检亚型难于检测，而误判为不凝集。测，而误判为不凝集。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1

10、814v试剂效价低：标准血清效价太低，亲和力不强，造试剂效价低：标准血清效价太低，亲和力不强，造成定型不准确。如抗成定型不准确。如抗A A血清效价不高可将血清效价不高可将A A2 2型误为型误为O O型，型，A A2 2B B型误为型误为B B型。型。v某些受肠道革兰阴性杆菌感染的病人某些受肠道革兰阴性杆菌感染的病人( (大肠杆菌大肠杆菌O86O86败血症败血症) )红细胞获得了类红细胞获得了类B B抗原，抗原，A A型病人可误定为型病人可误定为ABAB型，型，O O型误定为型误定为B B型。因此，近期感染过肠道致病菌的型。因此，近期感染过肠道致病菌的不宜献血。不宜献血。湘潭市中心血站湘潭市中

11、心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1815v流程合理性欠缺：留样贴签过程控制不严密，当工流程合理性欠缺：留样贴签过程控制不严密，当工作人员同时采集两个献血者、注意力又不集中、事先作人员同时采集两个献血者、注意力又不集中、事先又把标签预贴在流样管上时就会导致错型。事实上这又把标签预贴在流样管上时就会导致错型。事实上这种错误不仅是错型原因之一，还对检测结果的正确判种错误不仅是错型原因之一，还对检测结果的正确判断带来严重的后果，且当同型试管倒错时更难于发现，断带来严重的后果，且当同型试管倒错时更难于发现，潜在危害更大，严重威胁到血液的安全性。潜在危害更大，严重威胁到血液的安全性。湘潭市中心血站湘潭市

12、中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1816预防措施预防措施v加强对血型初筛人员的业务理论和技术操作培训，加强对血型初筛人员的业务理论和技术操作培训，增强责任心和质量意识，提高检测技能。增强责任心和质量意识，提高检测技能。v抗抗A A抗抗B B都是蛋白质，其效价及亲和力会随着时间的都是蛋白质，其效价及亲和力会随着时间的推移和保存温度过高而下降，标准血清不用时立即冷推移和保存温度过高而下降，标准血清不用时立即冷藏保存。藏保存。v要有足够的耐心确保反应时间，选择灵敏度高、特要有足够的耐心确保反应时间，选择灵敏度高、特异性好的试剂，以减少亚型漏检。异性好的试剂，以减少亚型漏检。湘潭市中心血站湘潭市中

13、心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1817v使用质量合格的试剂及细心观察结果，就可避免使用质量合格的试剂及细心观察结果，就可避免很多不必要的错误。很多不必要的错误。v献血人员较多时，要保证有足够的工作人员，安献血人员较多时，要保证有足够的工作人员，安排足够的初筛人员及时做好献血人群的分流安排。排足够的初筛人员及时做好献血人群的分流安排。v强化采前、采中、采后核对制度。强化采前、采中、采后核对制度。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1818v优化流程，明确贴签程序与步骤。优化流程，明确贴签程序与步骤。v从空间和时间上制造隔离带，防止同时采集留样从空间和时间上制造隔离带，防止

14、同时采集留样带来的错型。带来的错型。v总之，只要精力集中，工作认真细致，严格按照标总之，只要精力集中，工作认真细致，严格按照标准操作程序进行操作，就可以避免定型错误。准操作程序进行操作，就可以避免定型错误。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1819二、乙肝表面抗原（二、乙肝表面抗原（HBsAgHBsAg）检测）检测原理：原理：采用胶体金免疫技术在玻璃纤维上预包被金标采用胶体金免疫技术在玻璃纤维上预包被金标抗抗HBsAgHBsAg单抗单抗(Au-sAbl)(Au-sAbl)、硝酸纤维素膜上检测线和对照、硝酸纤维素膜上检测线和对照线上分别包被抗线上分别包被抗HBsAgHBsA

15、g单抗单抗(sAb2)(sAb2)和单抗鼠和单抗鼠IgGIgG。检测时。检测时样本血清中样本血清中HBsAgHBsAg可与胶体金可与胶体金- -抗体结合形成复合物，由抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，如为阳性样本，则于层析作用复合物沿纸条向前移动，如为阳性样本，则与检测线预包被的抗体结合形成与检测线预包被的抗体结合形成“Au-sAb1-H“Au-sAb1-HB BsAg-sAb2”sAg-sAb2”夹心物而凝聚显色，则该试纸条在检测线和对照线位置夹心物而凝聚显色，则该试纸条在检测线和对照线位置出现两条紫红线。如为阴性，试纸条只在对照线位置出出现两条紫红线。如为阴性，试纸条只

16、在对照线位置出现一条紫红线。现一条紫红线。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1820v全血金标法增加了血细胞滤过膜，该膜只允许血清通全血金标法增加了血细胞滤过膜，该膜只允许血清通过，而阻止血细胞的渗透，避免了血细胞的干扰，使过，而阻止血细胞的渗透，避免了血细胞的干扰，使检验结果更加准确。全血金标法取末梢手指血检验结果更加准确。全血金标法取末梢手指血8080100L100L，滴加到试纸条样品加入端。如果血样过于粘，滴加到试纸条样品加入端。如果血样过于粘稠，须在样品加入端加入抗凝剂稠，须在样品加入端加入抗凝剂1 1滴，滴，151520min20min内观内观察结果察结果. .

17、湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1821v金标试剂在说明书上写实验环境应保持一定的湿度，金标试剂在说明书上写实验环境应保持一定的湿度，避风，避免在过高温度下进行，我们在室温下进行，避风，避免在过高温度下进行，我们在室温下进行，各条件都能满足试验的要求。各条件都能满足试验的要求。v但在无偿献血现场筛选中都在室外进行，条件较差，但在无偿献血现场筛选中都在室外进行，条件较差，一年四季温差较大，不可能在一个恒定的符合试剂要一年四季温差较大，不可能在一个恒定的符合试剂要求条件下进行检测，也必定造成漏检现象。求条件下进行检测，也必定造成漏检现象。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉

18、张锦泉2021-7-1822造成漏检原因及应对措施造成漏检原因及应对措施v温度影响温度影响: : 在春天和秋天温度和室温差不多，基本在春天和秋天温度和室温差不多，基本满足了试验的条件，漏检率就低。夏天温度高，血样满足了试验的条件，漏检率就低。夏天温度高，血样很快就干燥了，所以最好在空调车里离空调近一些做很快就干燥了，所以最好在空调车里离空调近一些做试验，尽量减小温度对试剂反应的影响。冬天温度较试验，尽量减小温度对试剂反应的影响。冬天温度较低，血样较黏稠，血样中的血球蛋白成分不易和血浆低，血样较黏稠，血样中的血球蛋白成分不易和血浆分离，层析速度较慢，反应迟缓，有时发生层析不彻分离，层析速度较慢，

19、反应迟缓，有时发生层析不彻底现象，检测线不发生显色反应。试剂条上模糊不清，底现象，检测线不发生显色反应。试剂条上模糊不清，这就影响判定结果，漏检率较其他季节都高。这就影响判定结果，漏检率较其他季节都高。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1823v操作不当操作不当: :HBsAgHBsAg全血金标检测试剂在试纸条上加过滤全血金标检测试剂在试纸条上加过滤膜，该膜只允许血清通过而阻止血细胞渗透，我们采集膜，该膜只允许血清通过而阻止血细胞渗透，我们采集指端血时，要防止在采集血样时红细胞被破坏，指端血时，要防止在采集血样时红细胞被破坏，HbHb蛋白蛋白释放出来，也会透膜而层析到检测

20、线，使检测线模糊不释放出来，也会透膜而层析到检测线，使检测线模糊不清，不易辩认，形成漏检。在采集血样时一定要按操作清，不易辩认，形成漏检。在采集血样时一定要按操作程序规范操作。用毛细管虹吸到足够量，让血样充分渗程序规范操作。用毛细管虹吸到足够量，让血样充分渗透到加样处产生层析作用，红细胞和血清被分离，血清透到加样处产生层析作用，红细胞和血清被分离，血清中如含有中如含有HBsAgHBsAg病毒则会发生显色反应，操作中发现有病毒则会发生显色反应，操作中发现有些同志为了简便直接用试剂条在指端上涂抹血样，这样些同志为了简便直接用试剂条在指端上涂抹血样，这样会造成红细胞破裂而堵塞层析层，使血清样本不易层

21、析，会造成红细胞破裂而堵塞层析层，使血清样本不易层析，阳性样本不能通过层析作用在检测线发生显色反应。阳性样本不能通过层析作用在检测线发生显色反应。 湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1824v反应时间不够反应时间不够: :有些同志为了怕献血员等时间长，有些同志为了怕献血员等时间长，献血员多的时候，就不等反应达到足够的时间，献血员多的时候，就不等反应达到足够的时间，5min5min8min8min就发了阴性报告，结果献血员抽了大血过就发了阴性报告，结果献血员抽了大血过后再查原试剂条已变成阳性反应。解决这个办法就是后再查原试剂条已变成阳性反应。解决这个办法就是检测检测5 5个

22、人以上再发报告，这样第一个人血样就有足个人以上再发报告，这样第一个人血样就有足够时间反应了。以下以此类推，尽量延长反应时间。够时间反应了。以下以此类推，尽量延长反应时间。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1825v样品量的多少问题样品量的多少问题: :试剂说明书上说强阳性试剂说明书上说强阳性2min2min可可检出，检出，5ng5ng标准品标准品10min10min可检出，可检出，lnglng标准品标准品30min30min可检可检出。加血样应符合标准，加量不足和过量都影响判读出。加血样应符合标准，加量不足和过量都影响判读结果。不足血清中结果。不足血清中HBsAgHBsA

23、g量达不到反应阈值，太多流量达不到反应阈值，太多流出影响反应结果，过滤膜破损血细胞渗过使检测线模出影响反应结果，过滤膜破损血细胞渗过使检测线模糊不清。糊不清。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1826v试剂的本身问题试剂的本身问题: :由于每次试剂批号不相同、试剂由于每次试剂批号不相同、试剂的效价和反应灵敏度也不相同，有一些试剂样品层析的效价和反应灵敏度也不相同，有一些试剂样品层析速度快，有的慢，有的批号试剂检测线显色反应很模速度快，有的慢，有的批号试剂检测线显色反应很模糊，对照线有阴影，有的批非常清晰。要根据不同情糊，对照线有阴影，有的批非常清晰。要根据不同情况灵活改变

24、判定标准；还有的试剂不发生显色反应，况灵活改变判定标准；还有的试剂不发生显色反应，这要先看批号是否是过期失效试剂；有的试剂在工厂这要先看批号是否是过期失效试剂；有的试剂在工厂生产过程中加样不均匀，出现漏加和少加，就可能出生产过程中加样不均匀，出现漏加和少加，就可能出现无显色反应现象，遇到这情况就要重复做试验，因现无显色反应现象，遇到这情况就要重复做试验，因为金标试剂本身灵敏度有限，也有造成弱阳的标本漏为金标试剂本身灵敏度有限，也有造成弱阳的标本漏检的可能。检的可能。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1827v高危人群影响高危人群影响: :我们在无偿献血初检中经常发现有些我

25、们在无偿献血初检中经常发现有些已知自己是已知自己是HBsAgHBsAg病毒携带者献血员经常来献血车上来病毒携带者献血员经常来献血车上来献，他们本意是想查一下身体。这些人大部是外地打献，他们本意是想查一下身体。这些人大部是外地打工者或经常出差的业务员、采购员、推销员和外省常工者或经常出差的业务员、采购员、推销员和外省常住本市办事处等工作人员，这些人到车上献血十有八住本市办事处等工作人员，这些人到车上献血十有八九都是九都是HBsAgHBsAg病毒感染者，我们常化验出的病毒感染者，我们常化验出的HBsAgHBsAg阳性阳性大部分都是这类人，遇到这类人要仔细，延长反应时大部分都是这类人，遇到这类人要仔

26、细，延长反应时间，不明显要重复试验，认真判读结果。间，不明显要重复试验，认真判读结果。v另外，另外，还有个别标本可能存在还有个别标本可能存在HBsAgHBsAg亚型而不易检出。亚型而不易检出。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1828三、血红蛋白含量检测三、血红蛋白含量检测 硫酸铜比重法检测血红蛋白硫酸铜比重法检测血红蛋白: : 取手指血取手指血1 1滴滴入已知比重的硫酸铜溶液中，在血滴滴入已知比重的硫酸铜溶液中，在血液周围形成一层蛋白质铜盐。根据血液在硫酸铜溶液液周围形成一层蛋白质铜盐。根据血液在硫酸铜溶液中的沉浮或下沉的时间长短的情况判断血液的比重。中的沉浮或下沉的时

27、间长短的情况判断血液的比重。10s10s内血滴自然沉下为合格，浮在比重液表面为不合内血滴自然沉下为合格，浮在比重液表面为不合格。格。 湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1829v按按血站血站技术操作规程要求，硫酸铜溶液技术操作规程要求，硫酸铜溶液2020时比重男女不同：时比重男女不同：v男男1.052(1.052(相当于相当于Hb 120 g/LHb 120 g/L以上以上) )，v女女1.051.051 1( (相当于相当于Hb 11Hb 115 5 g/L g/L以上以上) )。 湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1830v据国内调查资料显示，一

28、次献血据国内调查资料显示，一次献血200mL200mL，男性血红蛋，男性血红蛋白平均下降白平均下降7g/L7g/L，女性下降，女性下降7 715g/L15g/L，血红蛋白恢复，血红蛋白恢复至献血前水平需要至献血前水平需要7 71010天。也就是说一个血红蛋白天。也就是说一个血红蛋白含量为含量为11115 5g/Lg/L的女性献血者，在献出的女性献血者，在献出400mL400mL血液以后血液以后体内的血红蛋白含量为体内的血红蛋白含量为8 85 5101101g/Lg/L，已经达到了中度，已经达到了中度贫血的状态，并且要维持该不良状态约贫血的状态，并且要维持该不良状态约1 1周。为了保周。为了保护

29、献血者的身体健康，使每位献血者献血后仍能保持护献血者的身体健康，使每位献血者献血后仍能保持正常的血红蛋白水平（男性正常的血红蛋白水平（男性120120160g/L160g/L，女性，女性110110150g/L150g/L）。我们一定要认真检查献血者的血红蛋白含）。我们一定要认真检查献血者的血红蛋白含量。量。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1831 注意事项注意事项：v当硫酸铜溶液变得浑浊而影响结果判断的时候当硫酸铜溶液变得浑浊而影响结果判断的时候应该更换新的硫酸铜溶液。应该更换新的硫酸铜溶液。v新的硫酸铜溶液开瓶使用前应注意观察瓶底是新的硫酸铜溶液开瓶使用前应注意观察瓶底是否有结晶形成，如有结晶则不能使用。否有结晶形成，如有结晶则不能使用。v尽量保证使用尽量保证使用时时硫酸铜目测试剂的适用温度与硫酸铜目测试剂的适用温度与室温室温一致一致，以保证结果的准确性。以保证结果的准确性。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2021-7-1832四、ALT检测v1 启动v1.1 打开电源，按下电源键，仪器开始启动。v1.2 仪