生物专业细胞工程重点总结

1、细胞学说：i切细胞从单细胞到髙等动植物都是山细胞组成的，细胞是生物体结构和功能组成单位。细胞周期：从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程go期细胞：暂时脱离细胞周期，不进行增殖，在适当刺激下可以重新进入细胞周期终端分化细胞：不可逆的脱离细胞周期，丧失分裂能力，但保持生理机械活动的细胞连续分裂细胞：在细胞周期中连续运转的细胞细胞分化：细胞在形态、结构和功能上发化差界的过程。持家基因：微生物生存所必须的基因组织特异性基因：组织屮专一性表达的基因脱分化：细胞脱离原状态，恢复到分生状态再分化：脱分化细胞在特定条件下再次开始新的分化发育过程，最终形成组织器官个体胚状体：体细胞胚离体条件下，没有经过受

2、精过程，但经过胚胎发冇过程所形成的胚的离似物植物体细胞杂交：乂称植物原生质体杂交，是指将不同來源的原生质体相融合并使z分化再生形成新的物种的技术 贴壁细胞：是机体细胞在体内生存和生长发冇的基木方式，有机体的多数细胞在体外培养时必须贴附在培养瓶等支持 物上才能生长悬浮性细胞：血液中的淋巴细胞、白细胞及某些肿瘤细胞等在休外培养时不需要贴附在支持物上，而需要悬浮状态 原代培养：从供体获得细胞后的首次培养传代培养：由原培养瓶中分离稀释后传到新的培养瓶的过程接触抑制：在体外培养的贴壁细胞屮，当两个细胞由于移动而相互靠近发生接触时由细胞接触而抑制细胞运动的现象 密度抑制：细胞接触汇合后，虽发生接触抑制，但

3、只要营养充足，仍然能够进行增殖分裂，但当细胞密度进一步增大, 培养液屮营养成分减少代谢产物增多时，则发主密度抑制导致细胞分裂停止细胞株：经单细胞增殖而成的，具有特殊性质和标志物的细胞群细胞系：原代培养物开始第一次传代培养后的细胞群体干细胞：一类能h我更新和有分化潜能的细胞多克隆抗体：由同一抗原的多种抗原决定簇刺激机体产生多种混杂在一起的单克隆抗体单克隆抗体：由一种抗原决定簇刺激机体，由一个b淋巴细胞接受该刺激产生的抗体胞质体：去除了细胞核后的由膜包裹的无核细胞微细胞：由-条或儿条染色体，外衷-薄层细胞质，由完整细胞包被的微小细胞1、粗而内质网：结合核糖休 光面内质网：合成脂类2、真核细胞和原核

4、细胞的区别细胞壁细胞膜膜质细胞器染色体线粒体核糖体核膜核仁原核细胞有有无多个环无有无无真核细胞植有动无有有单个线状有有有有3、细胞分化的棊本特征：分化过程不可逆分化水平决定其生理状态分化水平越高，其分化潜力越窄4、细胞分化的原因：基因的选择性表达 细胞质的决定作用 细胞间的相互作用 环境对细胞分化的影响5、细胞全能性：侮个植物细胞都有其母体的全部遗传特性每个细胞都可在特定条件下发育成与母体一样的植株6、多倍体育种：优点：根茎叶花果实较人，抗逆性强，产量高，代谢旺盛缺点：高度不育一减数分裂紊乱7、克隆方式：胚胎细胞核移植胚胎十细胞移植胎儿成纤维细胞核移植体细胞核移植8植物组织快速无性繁殖：优势：

5、快、无性 定义：利用离体培养技术，将来口优良植株的茎尖，叶芽、叶片、鳞 片等器官组织和细胞进行离体培养在短期内获得大量遗传性状一致的植株植物组织快速无性繁殖的途径：a、芽途 径:顶芽或腋芽一完整植株b、器官发生途径：直接：外植体一不定芽或根一完整植株 间接：外植体一愈伤组织一 不定芽或根f完整植株c、胚状体途径：经过分化阶段 区别：区别于白然情况下所形成的无融合生殖胚，利于胚 囊中的反足细胞，助细胞，珠心细胞形成的不定胚 区别于没冇经过离体培养的合了胚，没冇经过受精过程 一定 经过胚胎发育过程，区别于器官发生途径 直接途径：外植体一胚状体一完整卅i株 间接途径：外卅i体一愈伤组织一 胚状体一完

6、整植株d、原球茎途径：外植体一兰球径一完整植株快速无性繁殖的优势：a、保持杂合植株的优良特 性b、可挽救濒临植物c、加速濒危植物的繁衍d、便于优秀种质材料的交换和贮运e、和植物脱病毒技术结合起來, 可为生产上提供健康无毒植株9、植物脱病壽技术：脱毒方式原则：既能杀毒，乂不损伤植物材料 牛物法：a、茎尖分生组织培养法茎尖无 维管素，胞间连丝不发达茎尖组织进行细胞分裂，抑制病毒复制植物激素的存在，抑制病毒复制b、珠心胚法: 珠心胚不属于体细胞胚，不在离体条件下1（）、植物细胞的大规模培养：培养方式：1悬浮细胞：成批培养、连续培养、半连续培养2固体培养：易将细胞核 培养基分离（包埋法、吸附法）意义：

7、a、次牛:代谢产物的牛:产：药物、香料、色素中的酚类、生物碱、番类、例 如人参皂昔、长春花碱、紫草宁 b、转皋因植物细胞大规模培养以得药用蛋白质表皮生长因子、生长激素、干扰素11、原生质体的融合：化学法：a、盐融合法b高钙高ph值法c、peg法 物理法：电融仑法12、多倍体育种方法：牛物法：a、远缘杂交b、体细胞杂交 物理法：a、温度休克法：略高于冷致死温度或略低 于热致死温度处理材料，诱导产生多倍体的方法b、水静压法：较高水静压处理材料，抑制第一次或第二次卵裂中第 二极体的放出c、化学法：秋水仙素抑制纺锤体的形成13、同源多倍体：无籽西瓜 二倍体西瓜一（秋水仙素）四倍体*二倍体-三倍体14、

8、为什么单倍体育种（单倍体优势）：单倍体冇种优点：单倍体植物只有一套染色体，染色体上的每个基因都能显 示相应的形状，是进行遗传分析的理想材料单倍体植物细胞只冇一套染色体，如将其染色体加倍即可获得纯合二倍 体，可代替杂交育种过程中多次口交产生纯合品系过程，缩短育种年限缺点：较二倍体植株各方而小高度不育15、孤雄生殖：由楮核在卵细胞内单独发育成单倍体方式：a、花粉培养b、花药培养过程：外植体的选择和 消毒一组织培养单倍体植株一植株的鉴定-t人工染色体加倍一组织培养一鉴定花粉培养：优点：所得植株为单倍 体植株缺点：组织培养难度人花药培养：优点组织培养难度小缺点：花药壁、花丝干扰单借体植株形成16、孤雌

9、生殖：雌雄配了未经融合，由雌配了单独发育成种了的无性融合生殖方式：a、物理法：高温、低温、射 线b、化学法：马來酰腓 苯乙酸二甲基亚枫c、牛物法：延迟受粉异源花粉授粉 过程：外植休的选择消毒一 组织培养单倍体植株一植物的鉴定一人工染色体加倍一组织培养一鉴定 单倍体鉴定：标记性状鉴定法标记在雄配 子上没冇标记17、外源基因导入受体方式：载体农杆菌转化法：根瘤农杆菌的细胞中含冇ti质粒，ti质粒上冇一段dnao农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞 介导后可将tdna插入植物基因组中，人们将冃的基因插入经过改造的tdna中，借助农杆菌的感染实现外源法基因向植物细胞的转移和整合，然后通过组织培养技术再发出转

10、基因植株直接病毒介导法：以病毒为媒介构建载体通过病壽对植物细胞的感染将外源基因导入导入电融合转化法：利用高压电击屮的穿孔作用，造成细胞膜上出现短暂可逆性小孔，dna分子通过小孔进入细胞 内，并整合受体细胞dna组中，由于脂膜具有可修复性，膜穿孔一定时间自动修复%1 基因枪介导转化法：用外源dna包裹重金属微粒形成微弹通过基因枪加速将微弹送入细胞内%1 花粉管通道法：将外源dna滴加入花粉管通道，使之肓接进入受精卵%1 显微注射法：显微操作化18、动物细胞与组织培养流程：%1 无菌室的消毒%1 培养皿的预处理-取材一单细胞培养一排除污染一建系一冻存%1 培养液的制备培养用液的制备：培养基 天然培

11、养基、半合成培养基 ph调节液：维持培养基的ph在7.27.4平衡盐缓冲液：用于组织的洗涤和配制其他溶液的基础用液 消化液：原代培养屮组织的取材以及传 代培养中贴壁细胞的分离抗生素液污染的排除：抗生素液高温法动物腹腔接种法酶噬细胞19、动物组织大规模培养方式：贴壁培养悬浮培养假悬浮培养（微载体法、中空纤维法、微囊法）20、疫苗：能够使机体产生适当抗体使机体免受抗体相应病原体感染的物质原理：注射疫苗可以激活体内免疫系统产生相应病原体的抗体，如果以后再遇到相应的病原体的侵入，入侵 的病原体被中和失活或致死而排出体外，使致病性消失或降低分类及特点：a.第一代疫苗：减毒或灭活疫苗（物理法：加热、紫外线

12、化学法：丙酮、福尔马林生物法： 筛选毒性小或无的病原体）b、第二代疫苗：基因工程疫苗：构建含有编码特界性抗原基因的载体，转染 入宿主细胞，使非致病性微牛物携带并表达抗原决定簇基因，产牛免疫原性21、干细胞类型：发育阶段：胚胎干细胞（es细胞、eg细胞）成体干细胞分化潜能：全能t细胞、多能t细胞、单能t细胞22、组织工程过程：t细胞的分离培养、构建聚合物骨架一将丁细胞种植在骨架上一加入适当的刺激因子"组织器官使细胞在骨架上迁移分化23、分离杂交瘤细胞的原理：止常细胞合成dna冇主要途径和补救途径，a能阻断dna合成的主要途径，杂交瘤细胞由于融合了脾细胞而具有hgpr和tk两种酶能够通过

13、补救途径合成dna, iflj我们要去除骨髓瘤细胞 为hgprt-或tk-,主要途径被阻断后，无法利用补救途径合成dna,因此不久死亡24、elisa技术：原理：利用抗原和抗体的特异性结合，以及酶能够将无色底物催化成冇色底物，颜色的冇无以及颜色的深浅被利用来判定阳性或阴性反应，以及反应的强度，因此可用于定性及定最分析测定抗体的间接elisa法：将抗原吸附于固和载体表血加入待测样品 加入酚标抗抗体洗涤加入 无色底物，则显色深浅与抗体多少成正比25、体外胚胎生产过程：卵了的采集和成熟培养精子的采集与获能一体外受精一受精卵的体外发育%1 获能：精子只在雌性动物生殖道内停留，一段时间才能使卵子受精，这

14、一现象叫精的获能%1 体外受精：将卵了和精了置于培养液中共同培养使z完成受精过程26、胚胎移植过程：超数排卵（促性腺激素）一胚胎的釆集精子的收集、获能一人工受箱一同期发情一胚胎移植人工受精：把雄性动物的精子放到雌性动物的子宫内27、试管婴儿技术过程：超数排卵精子采集获能一休外受精一受精卵的体外培养一（同期发情）胚胎移植一试管婴儿28、胚胎分割过程：胚胎分割一分割胚的培养一胚胎移植29、转基因的方式原理：%1 显微注射法：通过显微注射代谢外源基因肓接注射到受精卵的雄原核内，使外源基因整合到dna屮，翻译成转基因动物%1 胚胎干细胞介导法：把外源dna导入体外培养es细胞，将这些细胞注入囊胚腔中，再将囊