污水微生物指标检查法

1、邯郸矿业集团总医院污水排放微生物指标检测方法污水总大肠菌群的检验方法一、采样方法用采水器或其他灭菌容器采取污水样1000毫升，放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的污水， 需加1.5%硫代硫酸钠5毫升中和余氯。二、检验方法总大肠菌群系指一群需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌在37 c恒温箱内，培养 24小时，能使乳糖发酵产酸产气。总大肠菌群数系指每升污水中，所含的总大肠菌群的数目。（一）初发酵试验：以无菌操作将各盛有 3倍浓缩乳糖蛋白月东培养液 5毫升的5支发酵管内，各接种 污水样10毫升，将各盛有单料乳糖蛋白月东培养液约 10毫升5支的发酵管内，各接种污水样 1毫升，再将 各盛有单料乳糖蛋白脏培

2、养液约 10毫升的5支发酵管内，各接种 1 ： 10稀释的?水样1毫升（相当于原 污水样0.1毫升）。将此15支管已接种的发酵管置于 37c恒温箱内，培养 24小时。（二）平板分离：经培养24小时后，将产酸产气及只产酸不产气的发酵管，分别接种于伊红美兰培养基或品红亚硫酸钠培养基上，置37c恒温箱培养1824小时，挑选符合下列特征的菌落，取菌落的一小部分，进行涂片、革兰氏染色、镜检。1伊红美兰培养基上的菌落色泽：（1）深紫黑色，具有金属光泽的菌落；（2）紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落；（3）淡紫红色、中心色较深的菌落。2品红亚硫酸钠培养基上的菌落色泽：（1）紫红色，具有金属光泽的菌落；（2）深

3、红色，不带或略带金属光泽的菌落；（3）淡红色，中心色较深的菌落。（三）复发酵试验：涂片、镜检的菌落，如为革兰氏阴性无芽抱杆菌，则挑取上述典型菌落13个接种于一支单料乳糖发酵管内，然后置于37c恒温箱内，培养 24小时，产酸产气者（包括小量产气）即证实有大肠菌群存在。根据证实有大肠菌群存在的阳性管数，查对总大肠菌群近似数（ MpN ）检索表（附表 1.1）即是每升 污水中的大肠菌群数。 此MPN表中所列数值系指100毫升水样中的细菌数，因此需将表中的数值再乘 10、为每1000毫升水中的细菌数。举例：某一污水样接种10毫升的5支管中有5管为阳性；接种1毫升的5支管中有2管为阳性；接种1 ： 10

4、稀释水样1毫升（即原污水样 0.1毫升）的5支管皆为阴性，即结果为 5、2、0,查附表1.1得知100毫升污水中总大肠菌群数为 49个，即1000毫升污水中总大肠菌群数为 49M0 = 490 个。总大肠菌群近似数（MPN ）检索表附表接种量（量升）每100接种量（量升）|每100毫升水 样中总毫升水 样中总1010.1大肠菌群近似 数|1010.1大肠 菌群近 似数0000040800120419002404211003504313004704415005904517010205090114051110126052130137053150149054170151105519020410020

5、2161014022710260239103802411104100251310512030611040317111603291128033111131003413114120351511514（总接种量55.5毫升，其中5份10毫升水样；5份1毫升水样；5份0.1毫升水样）7续表1接种量（毫升）1每100接种量（量升）每100毫升水 样中总毫升水 样中总1010.1大肠菌群近似数|1010.1大肠菌 群近似 |数1206200512182017122102029123122031212415204141251720516130821071311021191321221212133152131

6、41341721417135192151914011220914113221121421522214143172231714419224191452222522150132301215115231121521723217153192332015422234221552423525（总接种量55.5毫升，其中5份10毫升水样；5份1毫升水样；5份0.1毫升水样）续表2接种量（量升）|每100毫# 水样中总大 肠菌群近似| 数接种量（量升）每100毫升 水样中总大 肠菌群近似 数1010.1 |。10.1 |240153201424117321172422032220243233232424425

7、32427245283253125017330172512033121252233322425326333282542933432255323353630083402130111341243021334228303163433230420344363052334540310113502531114351293121735232313203533731423354413152735545（总接种量55.5毫升，其中5份10毫升水样；5份1毫升水样；5份0.1毫升水样）续表3接种量（量升）每100毫接种量（量升）每100毫IIII开水样中IIII开水样中1010.1总大肠菌1010.1总大肠菌II

8、 II群近似数II III群近似数40013440344011744140402214424740325443544043044462405364456941017450414112145148412264525641331453644143645472415424558142022500234212650131422325024342338503584244450476425505059543027510334313351146432395126343345513844345251411043559515130（总接种量55.5毫升，其中5份10毫升水样；5份1毫升水样；5份0.1毫升水样）续表4接种量（量升）每100毫 开水样 中总大 肠菌群 近似数接种量（量升）每100毫升 水样中总 大肠菌群 近似数1010.11010.1520495401305217054117052294542220523120543280524150544350525180545430530