SRTP--朱金超(周改)

1、甘肃农业大学学生科研训练计划（SRTP）项目申请书项目名称：美系獭兔血清中钙镁磷物质含量的测定 申 请 人： 朱金超 所在院部： 生命科学技术学院 联系电话：指导教师: 刘 霞 职 称 副 教 授 申请日期： 2015 年 12 月 填 表 说 明 一、 填写立项申请书前，请先咨询指导教师或有关专业教师。申请书的各项内容要求实事求是，逐条认真填写。表达明确、严谨，一律要求用打印稿件。 二 、申请书为A4开本，复印时用A4复印纸，于左侧装订成册。由指导教师和所在院SRTP项目工作小组审查并签署意见后报送SRTP管理领导小组，审查通过后申请书由学院存档。三 、“所在单位意

2、见”一栏中，应注明研究人员、时间、条件、政策等方面的保证措施和意见。“项目类别”指A、B、C、D，A社会调查类；B科技制作；C实验设计、科研类；D其他类。“项目批准号”不填，由学校统一编号。四、如表格不够，可以加附页。一、简况表项 目简 况项目名称美西獭兔血清中钙、镁、磷物质含量的测定项目类别标记（）A、 社会调查类； B、 科技制作；C、 科学实验、科研类（）； D、 其他类。经 费已 有0 千元经费来源科 研 经 费起止年月2016.3-2016.12申 请1.2千元SRTP项目资助项 目申 请人姓 名朱金超性别男民 族汉出生年月1994.11所在学院生命科学技术学院专 业生物技术（动物方

3、向）年 级14级前一学期平均学分绩点3.47前一学期综合测评成绩77.864指导教师姓 名刘霞性 别女民 族汉出生年月1975.11所在院部生命科学技术学院专 业动物生化与分子生物学职 称副教授项目组成员姓 名性别出生年月所在学院专业/年级综合考评成绩学生签名赵 耀 东男1996.12生命科学技术学院生技动物班76.354杨 亚 文女1995.11生命科学技术学院生技动物班75.318周 永 帅男1995.01生命科学技术学院生技动物班73.316二、立项依据（项目的意义、现状、可行性分析）现状：美系獭兔 目前国内所饲养的獭兔绝大多数属于美系。但由于引进的年代和地区不同，特别是国内不同兔场饲养

4、管理和选育手段的不同，美系獭兔的个体差异较大。美系獭兔基本特征为：头小嘴尖，眼大而圆，耳长中等、直立，转动灵活；颈部稍长，肉髯明显；胸部较窄，腹腔长达，背腰略呈弓形，臀部发达，肌肉丰满，我国引进的以白色为主。美系獭兔的被毛品质好，粗毛率低，被毛密度较大。与其他品系比较，美系獭兔的适应性好，抗病力强，繁殖力高，容易饲养。其缺点是群体参差不齐，平均体重较小，一些地方的美系獭兔退化较严重，应引起足够的重视。意义：由于美西獭兔的抗空气感染力很强,繁殖率高,容易饲养，且经济便宜，因之作为优良的实验动物模型而被广泛使用，是一种理想的实验动物。兔模型是最早用于胆固醇代谢和动脉粥样硬化研究，有特殊的血清型和唾

5、液型。根据有、无血细胞型的凝集素分类成四种血清型，、和O型，、型易产生人A型抗体，、O型易产生人B型抗体。其模型中由于钙、镁、磷含量的增多或缺乏而引起的病变，与人类的病变基本相似，是进行这方面研究的良好动物模型1。血液生理指标能灵敏且直接的反映机体代谢状况，因此，可通过对多组美西獭兔血清中钙、镁、磷含量的测定，找其内在的规律，为生理学研究提供科学依据，具有一定的实践意义。测定美西獭兔血清中钙、镁、磷的含量研究其内在规律对于人类临床检测具有重要意义，其临床意义如下：（一） 血清钙的临床意义1. 血清钙降低临床较多见，可发生于：  甲状旁腺功能减退； 维生素D缺乏症；

6、 婴儿手足搐搦症及骨质软化症； 钙或维生素D摄取不足或吸收不良，如长期低钙饮食、腹泻、阻塞性黄疸、急性坏死性胰腺炎或妊娠后期等； 肾脏疾病，如慢性肾炎累及肾小管时影响钙的回吸收使血钙降低； 代谢性碱中毒时游离钙减少，肾小管回吸收钙减少； 低蛋白血症，如恶性肿瘤、严重肝病、黑热病及各种原因所致的大量蛋白尿等，均可使血清白蛋白减少而致血清钙降低，但扩散型钙可正常或只轻微降低，故临床上无低血钙的症状。 2. 血清钙增高可见于：  甲状旁腺功能亢进，因甲状旁腺激素可使骨盐溶解，释放入血，并促进肾小管对钙的重吸收； 

7、;骨肿瘤，如多发性骨髓瘤或骨转移癌等； 急性骨萎缩，如骨折后及机体麻痹等； 大量应用维生素D治疗； 血液内二氧化碳张力增加的疾病，如肺气肿、慢性肺功能衰竭等。 3. 血清钙降低(1) 甲状旁腺机能低下，如甲状腺手术中误切了甲状旁腺、特发性甲状旁腺机能低下，或由于自身免疫和炎症等原因所引起，都可出现低钙血症。 (2) 慢性肾功能衰竭，可因1,25(OH)2D3生成不足而致血钙降低，引起继发性PTH分泌亢进，可导致肾性佝偻病。 (3) 急性胰腺炎，亦可发生低血钙。 （二）血清镁的临床意义 

8、1. 血清镁增高： 肾脏疾病：凡影响肾小球滤过率者均可使血清镁滞留而增高。如慢性肾炎少尿期、尿毒症、 急性或慢性肾功能衰竭等； 内分泌疾病：如甲状腺功能减退症(黏液性水肿)、甲状旁腺功能减退症、阿狄森病、未治疗的糖尿病昏迷(治疗后迅速下降)； 治疗措施不当：凡用镁制剂治疗不当引起中毒者； 其他疾病：多发性骨髓瘤、严重脱水症、关节炎、急性病毒性肝炎、阿米巴肝脓肿、草酸中毒等。2. 血清镁降低： 消化道丢失：长期禁食、吸收不良或长期丢失胃肠液者。如慢性腹泻、吸收不良综合征、手术后的肠道瘘管或胆道瘘管、长期吸引胃液后，乙醇中毒严重呕吐者等； 内分泌疾病：甲状腺功能亢进症、甲状旁腺功能亢进症、糖尿病酸

9、中毒纠正后、原发性醛固酮增多症以及长期使用皮质激素治疗后，均使尿镁排泄增加； 治疗措施不当：用撒利汞或氯噻嗪等利尿剂治疗者，未及时补充镁。长期静脉滴注无镁补液； 其他疾病：急性胰腺炎在胰腺周围可形成镁皂;晚期肝硬化，可继发醛固酮增多症;加之腹水利尿;低白蛋白血症能使镁结合量减少;急性心肌梗死、急性乙醇中毒以及新生儿肝炎、婴儿肠切除后等。3. 尿镁排泄增多：见于各种原因的多尿，包括长期服用利尿剂、肾小管性酸中毒、原发性醛固酮增多症、皮质醇增多症、糖尿病治疗后期、甲状旁腺功能亢进症、皮质激素治疗及肿瘤骨转移。4. 尿镁排泄减少：见于长期禁食、厌食、吸收不良者，甲状旁腺功能减退、肾上腺皮质功能减退时

10、，也可减（三）血清磷的临床意义：1.血清磷增高：见于甲状旁腺功能减退、慢性肾病、维生素D过多症、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、骨折愈合期等。使用雄激素、合成类激素及某些利尿药物时，血磷也会增高。2.血清磷减低：见于甲状旁腺功能亢进、维生素D缺乏、软骨病、严重糖尿病、磷吸收不良等。正常妊娠时亦可轻度减低。服用含铝抗酸药物、合成雌激素、避孕药及苯巴比妥等药物时，血磷也会减低。其基本测定原理如下：（1） 血清钙：邻甲酚酞络合酮（OCPC）是金属络合染料，也是酸碱指示剂，在pH11.0溶液中与钙及镁螯合，生成紫红色螯合物。作钙测定时，在试剂中加入8-羟基喹啉以消除标本中镁离子的干扰。与同样处理的钙标准

11、液比色，可求得血清钙含量。（2） 血清镁：在碱性条件下，样品中的镁离子与二甲苯胺蓝生成有色络合物，此产物在546nm波长有最大吸收，其吸收强度与血清中的镁的含量成正比，再通过与同样处理的标准镁，比计算可求出血清镁的含量。（3） 血清磷：以三氯醋酸沉淀蛋白，在无蛋白滤液中加入钼酸铵试剂，与无机磷结合成磷钼酸盐复合物，再以硫酸亚铁为还原剂、还原成蓝色化合物，进行比色测定。与同样处理的标准进行比较求得血清中磷含量。可行性：课题指导教师长期从事动物生物化学与分子生物学研究，具有扎实的理论基础、严谨的科学态度和相应的研究技术，在以往的研究工作中建立和积累了适合本项目研究的多种研究基础和研究手段，洞察本领

12、域研究进展和技术要点，可借鉴信息资料不走弯路；科研经费来源于指导老师的资助和SRTP项目资助；研究所用美西獭兔相对较为常见，而且我们所用血液材料均采集自动物生化实验室的美西獭兔，所以我们的实验材料可以保证；本课题实验研究主要依托甘肃农业大学生科院动物生物技术实验室、动物生理实验室,具有承担本课题所需要的配套仪器及设备(实验过程中主要使用的仪器为日立7020型全自动生化分析仪，日立7020型全自动生化分析仪是日立公司专门针对中国市场设计的一款具有中文操作系统、小型的全自动生化分析仪；其操作简便、灵活、测定结果稳定可靠、重复性好、故障率低、全自动程度高而深受广大基层医院的欢迎。12)，具有和满足完

13、成本项目研究所需实验仪器和研究技术条件。 我们小组成员将全力合作、积极认真，努力做好每个环节，得到最真实、准确的实验数据和结果，完美的完成研究工作。综上分析，本课题通过一年努力研究和工作能够完成研究任务，达到预期的目标。参考文献：1杨春生,刘丹英,王少真，等.正常兔血清和尿液中生化值测定J. 动物学杂志. 1987(06)2 乌丽,曹蕊,修志夫，等.固相化学法对兔血清部分生化指标的检测研究J. 中国实验动物学杂志. 1999(01)3张耀荣，刘名才.血清钙邻甲酚酞络合酮比色法J.河北医药.1982年05期4黄祥芬. 日立7020型全自动生化分析仪应用的体会J. 中外医疗,2011,13:184

14、.5刘锋，王宝根，朱叔韬，等.实验动物与微量元素I.新西兰白兔血清中6种元素的测定J.上海实验动物科学，1987,04期.三、项目实施环节及实施方案（一）项目实施环节1.试验前准备阶段通过查阅图书馆相关资料、联系实际情况，了解实验中的相关知识,设计最为合理科学的试验方案,认真做好SRTP项目实施记录,并收集相关资料为后续的分析讨论做准备。2.确定研究目标：美西獭兔血清中钙、镁、磷含量的测定并通过数据分析揭示其内在规律。 3.确定研究内容： 采集纯种美西獭兔血清样本，测定血清钙、镁、磷的含量，分析测定的数据，总结规律。（二）项目实施方案1.实验动物：纯种美西獭兔。2.血清的采集：用高压灭菌后的离

15、心管采集。把静置后数小时的美西獭兔新鲜血液用规格为1ml的移液枪吸取上层血清1ml,每只美西獭兔只取一份，共取35份，并放在冷冻室冷冻。3.数据的测定：血清钙、血清镁、血清磷含量的测定，记录测定的数据。4.对测得的数据进行整理。5.结果数据分析：将测得的35只美西獭兔血清中钙、镁、磷含量数据进行分析，采用spss软件对实验结果进行方差分析。（三）实验方案与技术路线 四、预期成果1.通过试验检测出美西獭兔血清中钙、镁、磷含量数据，并对数据进行分析得出结论。2.通过此次实验可以提升实验参与人员的综合实验技能和操作技术，拓展知识面，对于以后的个人发展有很大的积极作用。3.写出相关实验报告。五、本项目

16、的特点与创新之处本课题旨在研究美西獭兔血清中钙、镁、磷的含量，通过对大量样本血清关于此三物质含量的测定，对测定出的数据进行整理并通过SPSS软件进行数据处理绘制出美西獭兔血清中钙、镁、磷物质含量数据的变化曲线，总结出其内在规律。 由于其美西獭兔血清中钙、镁、磷物质含量的变化曲线的研究未见报道，这是本项目研究的特点和创新之处。六、经费预算 单位：元资料费实验费打印费交通费其它合计10080050502001200指导教师签字主持人签字七、指导教师意见该研究课题选题新颖，有创新性，通过对多组美西獭兔血清中钙、镁、磷含量的测定，找其内在的规律，为生理学研究提供科学依据，具有一定的实践意义。测定美西獭兔血清中钙、镁、磷的含量研究其内在规律对于人类临床检测具有重要意义。该生查阅分析了大量有关本研究理论和实验方法的资料，有较强的分析综合能力，试验设计合理，技术路线可行，采用方法先进，能结合实际，有一定的应用价值，经费预算合理。同意接受本项目试验研究指导工作。签字： 年 月 日八、专家评审意见本研究密切结合实际，