TSH荧光定量检测方法和临床意义综述

1、1会计学TSH荧光定量检测方法和临床意义综述荧光定量检测方法和临床意义综述TSH背景TSH应用及意义内内 容容检测方法比较关于宝太结构：结构：l人类TSH为一种糖蛋白，含210个氨基酸，由和两个亚单位组成；糖类约占整个分子的15。l亚单位：92个氨基酸，与LH和HCG的亚单位相同。 亚单位的基因位于第6号染色体。l亚单位：118个氨基酸，提供了TSH的特异性。与亚单位以非共价键连接才具有生物活性。 亚单位的基因位于第1号染色体。背景背景形成：形成：l促甲状腺激素（TSH）是调控甲状腺细胞生长和甲状腺激素合成及分泌的主要因子，由垂体促甲状腺素细胞合成和分泌，并受甲状腺激素的负反馈性调节。lTSH

2、受下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素（TRH）的促进性影响，另方面又受到T3、T4反馈性的抑制性影响，二者互相拮抗，它们组成下丘脑-腺垂体-甲状腺轴。背景背景l放射免疫分析法（RIA）-竞争法l免疫放射分析法（IRMA）-夹心法l化学发光免疫分析法（ICMA）l荧光免疫层析法（IFA）检测方法检测方法检测方法检测方法方法样本优缺点放射定量血清、血浆试剂有效期短、操作繁琐、环境污染和放射危害等问题，而且检测浓度范围窄，用于定量过于繁琐。 化学发光全定量血清、血浆灵敏度高线性范围宽，检测需静脉血，试剂仪器价格昂贵、测试所需时间长。胶体金半定量血清、血浆、全血只做半定量，肉眼观察误差大，操作简便荧光免

3、疫层析全定量血清、血浆、全血线性范围宽且可检测全血，所需样本量少，操作简易，检测时间短，价格实惠。诊断原发性甲亢和甲减诊断原发性甲亢和甲减诊断原发性甲亢和甲减最早期、最敏感的指标发现亚临床疾病。应用及临床意义应用及临床意义TSHTSHT T3 3或或T T4 4 疾病诊断疾病诊断降低升高 临床甲亢正常 亚临床甲亢升高降低 临床甲减正常 亚临床甲减诊断原发性甲亢和甲减：诊断原发性甲亢和甲减：lTSH是判断甲状腺功能的敏感指标。血清T4和T3变化2倍时，血清TSH已经变化100倍。而且TSH的变化先于T4和T3数月或者数年。l中枢性甲减和非甲状腺的疾病需联合T4检测。应用及临床意义应用及临床意义甲

4、状腺激素抵抗综合征：甲状腺激素抵抗综合征： 全身型:TH TSH均高，临床无甲亢表现 垂体选择型:TH TSH均高的甲亢、甲状腺毒症的临床表现 外周组织选择型:甲减表现(外周组织对甲状腺激素不敏感)l血清TSH升高或者正常，TT4,TT3升高。诊断要采取TSH+T4检查策略。lRTH主要与垂体TSH肿瘤鉴别。 1、TRH刺激实验：前者TSH升高，后者无反应。 2、T3抑制试验：前者TSH下降，后者不被抑制。 3、前者血清TSH a亚单位与TSH的比值1.0。 4、垂体MRI: 前者无异常，后者存在垂体肿瘤。应用及临床意义应用及临床意义中枢性甲减：中枢性甲减：lTSH-first strateg

5、y检查策略容易误诊，要采取TSH+FT4检查策略。l典型病例是血清TSH减低，TT4 /FT4减低，20%病例TSH可以正常或者升高。l原发性甲减当FT4低于正常时，血清TSH应10mIU/L；若TSH正常或轻度增高，应疑及中枢性甲减。lTRH刺激实验可以鉴别原发性甲减。 下丘脑性甲减TSH的分泌呈现高峰延迟（注射后6090分钟出现）； 垂体性甲减则TSH呈现低平曲线应用及临床意义应用及临床意义新生儿疾病筛查：新生儿疾病筛查： 新生儿疾病筛查是提高人口素质，减少出生缺陷的三级预防措施之一。CH 是因先天性因素使甲状腺激素合成障碍、分泌减少，导致患儿生长障碍，智力落后。PKU 是由于肝脏苯丙氨酸

6、羟化酶缺陷导致苯丙氨酸代谢障碍所致的常染色体隐性遗传性氨基酸代谢病。应用及临床意义应用及临床意义新生儿疾病筛查：新生儿疾病筛查：l标本采集时间应在出生后35天。l足跟全血，TSH筛查。TSH 50mIU/L，高度怀疑，经血清标本测定确诊；20 50mIU/L复查血清； TSH20mIU/L可以排除。l新生儿甲减血清诊断标准：新生儿14周，TSH 7mIU/L, TT4 6.5g/dL ( 84nmol/L)。l必须在产后46周内治疗。如果在45天内足量L-T4替代治疗，智商与正常儿童没有区别。应用及临床意义应用及临床意义TSHTSH作为治疗的监测指标：作为治疗的监测指标：l甲减替代治疗的目标：

7、原发性甲减血清TSH达到0.52.0mIU/L（正常范围的下1/2）（老年人除外）。l中枢性甲减血清FT4达到正常范围的上1/3。l原发性甲亢抗甲状腺药物治疗效果：TSH靶值 ：正常范围上1/2。lTSH的反应滞后于FT4，一般要在6周后达到下丘脑-垂体-甲状腺轴的新平衡。应用及临床意义应用及临床意义妊娠妇女的血清妊娠妇女的血清TSHTSH：l妊娠期，特别是妊娠T1期，对血清TSH值影响较大。T1期的TSH平均降低3050%。就是说，妊娠期诊断亚临床甲减的TSH上限应该降低）。l妊娠T1期妇女的血清 TSH应当在0.32.5mIU/L。 高于2.5mIU/L提示存在亚临床甲减或甲减l应用妊娠月

8、份特异性的TSH参考值。中国医科大学第一附属医院报告的T1、T2和T3期的TSH上限分别是3.93，4.53和5.17mIU/L。应用及临床意义应用及临床意义关于宝太关于宝太l厦门宝太生物科技有限公司，创建于2008年4月，是一家集研发、生产和销售一体的 “POCT体外诊断试剂”高科技生物公司。公司具备雄厚的技术力量和科技实力，并组建了一支技术过硬，思维活跃，工作严谨的强大队伍，在全体人员的努力下公司逐渐拥有一些产品的自主权，并获得多项产品技术专利。 l在充分的市场调研的基础上，公司紧紧抓住体外诊断试剂的发展方向，引进积极海外科技人士并与厦门大学等科研单位进行技术合作，致力于POCT产业技术的

9、研发和产业化。公司现建立了较强的技术和研发团队 ，核心技术平台基于荧光稀土络合物硅纳颗粒标记物及其制备方法和用荧光稀土纳米颗粒作为标记物的免疫层析方法及其检测纸条 。宝太荧光定量产品：宝太荧光定量产品：lHCG定量检测试剂盒（荧光免疫层析法）lAFP定量检测试剂盒（荧光免疫层析法）lTSH定量检测试剂盒（荧光免疫层析法）lCRP定量检测试剂盒（荧光免疫层析法）l免疫荧光分析仪（一代机）l免疫荧光分析仪（二代机） 可连续测试关于宝太关于宝太唐氏综合症筛查TSHTSH定量检测试剂盒定量检测试剂盒lTSH荧光免疫层析反应原理： 样本与缓冲液混匀，滴加到检测卡加样孔后，样本中的TSH抗原与荧光微球标记

10、的鼠抗TSH单克隆抗体结合形成反应复合物（荧光微球-Ab1-Ag），反应复合物在层析作用下沿着硝酸纤维素膜前移，移至检测线（T线）处，反应复合物被检测线包被的鼠抗TSH单克隆抗体捕获，形成最终反应复合物（荧光微球-Ab1-Ag-Ab2）。样本中的TSH浓度与荧光信号成正相关，多余的复合物层析至C先处，可被包被的羊抗鼠捕获，形成对照线。通过荧光免疫分析仪，可检测出样本中TSH的浓度。 关于宝太关于宝太TSHTSH技术参数：技术参数：l反应原理：荧光双抗夹心免疫层析l检测范围：0-100uIU/mll样本类型：血清、血浆和全血l反应时间：20min 检测时间：30Sl成人正常范围值：0.5-5.0

11、uIU/ml关于宝太关于宝太与罗氏电化学发光方法参比与罗氏电化学发光方法参比l仪器：罗氏公司E601型全自动电化学发光分析仪及配套试剂；厦门宝太公司BIOT-YG-I型免疫荧光分析仪及配套试剂。l实验样本：来自福州军区总院采集的80例甲减患者，所有患者均已用罗氏化学发光检测系统检查过TSH，诊断为甲减，其中原发性甲减患者51例，继发性甲减患者26例，急性甲状腺炎患者3例，男41例，女39例；年龄1855岁。同时选取40例体检健康者的血清。标本要求为未溶血、无严重脂浊、无黄疸、标本量足够的血清。l经过在罗氏化学发光检测过后的血清里，前后分多次共抽取上述120份样本，用宝太荧光分析仪再次检测对比，

12、历时10 个工作日连续对比监测。关于宝太关于宝太与罗氏电化学发光方法参比与罗氏电化学发光方法参比l仪器：罗氏公司E601型全自动电化学发光分析仪及配套试剂； 厦门宝太公司BIOT-YG-I型免疫荧光分析仪及配套试剂。l判断标准：关于宝太关于宝太结果：结果：序号罗氏值宝太值序号罗氏值宝太值序号罗氏值宝太值序号罗氏值宝太值10.51 0.53 313.35 2.62 613.24 2.54 911.50 1.26 233.51 38.46 324.20 3.91 6212.97 14.22 9250.59 56.52 34.98 4.72 3337.69 40.51 636.18 10.22 93

13、1.15 0.73 41.08 0.99 341.82 2.09 6439.72 36.15 9470.91 79.14 50.86 0.66 353.89 1.29 657.43 8.17 953.49 4.36 61.16 1.18 3669.23 65.37 6625.09 30.54 964.15 3.42 731.44 29.44 373.94 3.76 677.69 9.68 9710.16 8.94 87.29 9.03 386.49 5.86 6821.36 19.65 981.68 1.03 93.88 3.07 397.65 10.12 698.15 10.75 9949.

14、98 52.71 1082.06 97.68 403.22 3.61 7019.50 25.32 1001.95 2.35 112.45 2.83 414.98 5.14 719.69 8.41 10188.48 90.13 1226.96 29.24 424.78 5.08 7225.22 25.69 1021.94 1.14 131.81 1.15 435.13 6.03 7323.23 20.46 10345.25 39.50 143.92 3.22 4420.47 25.41 7411.58 12.64 1043.31 3.51 1553.87 50.23 4560.89 67.83

15、759.60 10.30 1057.82 11.76 167.94 8.24 463.45 2.19 766.56 8.95 1063.37 4.32 1735.14 40.64 476.19 8.66 7715.16 12.92 1071.42 1.10 182.00 1.77 4818.79 13.47 7825.51 25.77 1085.34 5.94 192.02 2.05 498.06 7.16 7916.44 12.60 10990.12 86.89 202.10 1.62 5034.84 47.50 806.18 5.94 11057.48 64.06 212.31 3.45

16、514.87 4.89 811.76 2.27 11168.20 71.60 2271.11 82.91 526.69 7.05 8243.92 38.64 1121.98 1.16 232.64 2.21 5319.69 28.64 832.89 2.71 1138.86 6.86 241.06 1.01 545.43 7.04 847.17 8.14 1147.01 10.54 258.99 10.68 5530.69 40.45 851.63 1.27 1158.19 8.69 263.02 2.63 566.08 7.58 862.66 3.26 1168.00 8.14 2746.2

17、8 48.98 5716.42 19.38 8710.84 9.99 11746.46 50.98 2897.42 94.48 586.39 6.00 881.47 1.42 11881.68 99.46 295.43 6.87 5913.46 14.07 895.46 6.83 11975.98 86.16 3027.29 30.57 605.34 6.08 906.82 8.64 1205.16 5.99 结果：结果：结果：结果：结果：线性相关性结果：线性相关性讨论：讨论：1. 这两种系统在TSH的检测上具有极强的一致性，阳性符合率、阴性符合率及总符合率均为97.50%，95%置信区间下限

18、均大于90%，其中有2例假阴和1份假阳，可能原因是其浓度靠近临界值且有CV偏差。2. 分析TSH的两种系统的检测值，发现TSH浓度在5mIU/L时偏差略大，但相对偏差均在允许偏差之内，可以被接受。分析原因可能是两种系统所采用分析方法不同及试剂、校准品和质控品的来源不同，并且罗氏E601系统与宝太系统参考值范围不一致，但从临床需求上讲在此偏倚对甲减的辅助诊断影响甚微。宝太宝太TSHTSH试剂试剂感谢您的关注！感谢您的关注！TSH背景TSH应用及意义内内 容容检测方法比较关于宝太新生儿疾病筛查：新生儿疾病筛查：l标本采集时间应在出生后35天。l足跟全血，TSH筛查。TSH 50mIU/L，高度怀疑，经血清标本测定确诊；20 50mIU/L复查血清； TSH20mIU/L可以排除。l新生儿甲减血清诊断标准：新生儿14周，TSH 7mIU/L, TT4 6.5g/dL ( 84nmol/L)。l必须在产后46周内治疗。如果在45天内足量L-T4替代治疗，智商与正常儿童没有区别。应用及