分析高效液相色谱法及在药品检验中的应用

1、    分析高效液相色谱法及在药品检验中的应用    刘立 谢浩【摘要】目的：探究分析高效液相色谱法及在药品检验中的应用，并总结检验经验。方法：本研究选择银杏叶提取物中银杏黄酮类药物为研究对象，平均分为对照组和实验组，样品量均称取0.2g，其中对照组采用薄层色谱（tlc）法进行检测，实验组组采用高效液相色谱法（hplc）进行检测，之后，比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度和产品回收率。结果：实验组采用高效液相色谱法（hplc）进行检测后，银杏黄酮水解分离三种主要黄酮贰元，分别为黄酮贰元槲皮素、山萘素和异鼠李素纯组分分离率分别为98.79%、98.

2、77、98.89（p<0.05），纯度分别为99.89%、99.99%、99.97%（p<0.05）；实验组山萘素加样后的产品回收率为99%，明显高于对照组（p<0.05）；以上差异均具有统计学意义。结论：采用高效液相色谱法进行药品检验，具有方法简便、优化、精密度高的优点，能够获得比较好的分离效果和产品回收率，测定结果可靠且快速可行，值得推广应用。【关键词】高效液相色谱法；薄层色谱；银杏黄酮；临床应用r562.21b1005-0019（2015）01-0598-01本研究选择银杏耶提取物中银杏黄酮类药物为研究对象，平均分为对照组和实验组，样品量均称取0.2g，探究分析高效液相

3、色谱法及在药品检验中的应用，并总结检验经验。现报告如下。1.主要试剂与仪器1.1主要试剂和药品银杏叶提取物（egb德国威玛舒培博士药厂，注册证号h20090296）重蒸水（超纯水仪滤膜过滤）甲醇（分析纯ar，深圳市华昌化工有限公司）磷酸（分析纯，深圳市华昌化工有限公司）黄酮贰元槲皮素对照品（上海亚培生物科技有限公司）1.2仪器美国光谱物理公司高效液相色谱仪sp8800泵，54400型积分仪，chromde脱气机，spheri一5rp一18（5um）色谱柱（22ommx4.6mm），进样器配10ul定量管。watersm490可编程序紫外检测器。2.实验方法本研究选择银杏叶提取物中银杏黄酮类药物

4、为研究对象，平均分为对照组和实验组，样品量均称取0.2g，其中对照组采用薄层色谱（tlc）法进行检测，实验组组采用高效液相色谱法（hplc）进行检测，之后，比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度和山萘素产品回收率。2.1样品制备称取0.2g银杏叶提取物，加入40ml甲醇，震荡摇匀，使其完全溶解，然后加入1.5mol/l的盐酸溶液40ml，混匀，置水浴锅中37°c加热120分钟，待冷却后，置于50ml容量瓶中，利用甲醇进行定容。室温下放置备用。2.2高效液相色谱法（hplc）条件流动相：甲醇一0.4%磷酸溶液（55：45）流速：1.oml/mini柱温：25進样体积：10ul检测

5、波长：360nm3统计学方法本研究中，所有的检测统计学数据采均用spss18.0软件进行处理，结果采用均数±标准差（x±s）进行表示，数据均经由spss18.0软件进行t检验。p<0.05表示数据具有差异性以及具有统计学意义。p<0.01表示数据具有显著性差异以及具有统计学意义。4.结果4.1比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度。结果如表1所示。实验组采用高效液相色谱法（hplc）进行检测后，银杏黄酮水解分离三种主要黄酮贰元，分别为黄酮贰元槲皮素、山萘素和异鼠李素纯组分、分离率分别为98.79%、98.77、9

6、8.89（p<0.05），纯度分别为99.89%、99.99%、99.97%（p<0.05）；以上差异均具有统计学意义。5.讨论色谱法最初仅仅是作为一种分离手段，是根据混合物中不同组分在流动相和固定相中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些组分在两相间进行反复多次的分配从而得到分，高效液相色谱法（hplc）是近年来逐渐应用到药品、食品等物质的监测工作当中，本实验通过采用高效液相色谱法（hplc）分析银杏叶提取物中银杏黄酮类药物，研究发现，采用高效液相色谱法（hplc）分析后，银杏黄酮水解分离三种主要黄酮贰元，分别为黄酮贰元槲皮素、山萘素和异鼠李素纯组分、分离率分别为98.79

7、%、98.77、98.89（p<0.05），纯度分别为99.89%、99.99%、99.97%，分离率和纯度值都相对于薄层色谱均较高，另外通过外部加样山萘素，检测得知产品回收率为99%。可见，临床上采用尿常规检验联合c-反应蛋白诊断小儿急性阑尾炎，能够有效提高诊断的准确率，降低误诊概率，具有一定的诊断价值，对于急性阑尾炎确诊以及及时治疗具有重要的意义。值得临床推广应用。参考文献1金蕊，王宝庆，金哲雄.高效液相色谱-质谱联用技术在中药鉴定中的应用j.生命科学仪器.2009（05）2刘艳芳，刘艳明，董军，李伟，王超然，张秀莉，梁鑫淼.中药物质基础的高效液相色谱分离分析方法研究j.中国科学（b辑：化学）.2009（08）3付秀娟，王卓伟，谭生健.高效液相色谱法测定丹芩滴丸