注射用重组人生长激素流动相有效期验证方案(修订版)

1、文件名称注射用重组人生长激素流动相有效期验证方案文件编号VP-C021027-01生效日期有效期至审批及颁发：部 门签 名日 期起 草质量部审 核质量部批 准质量受权人颁 发质量部会审：部 门签 名日 期部 门签 名日 期分发：Copy-1质量部QC一、目的 对注射用重组人生长激素含量（高分子蛋白）流动相和注射用重组人生长激素相关蛋白流动相的外观、pH值、项目下系统适用性的主峰保留时间和分离度验证，证实注射用重组人生长激素含量（高分子蛋白）流动相和注射用重组人生长激素相关蛋白流动相在有效期内是稳定的，保证检测结果可符合质量标准要求，特制定此方案。二、范围 注射用重组人生长激素含量（高分子蛋白）

2、流动相和注射用重组人生长激素相关蛋白流动相。三、职责验证组织及人员职责组内分工姓名所属部门及岗位组内职责组长负责制订方案，负责验证过程实施，收集验证数据、记录、信息，确保记载了所有验证结果并汇总形成验证报告。组员负责验证过程具体操作负责验证过程具体操作负责验证参数确认负责设备维护保养验证管委会方案及报告审核方案及报告批准四、术语 无五、内容1 概述验证流动相在有效期内是否稳定，以确保检测结果的准确性。2 确认项目2.1注射用重组人生长激素相关蛋白流动相验证项目验证项目技术标准外观无色透明澄清液体，无发霉、微粒沉淀物pHpH 7.5±0.2系统适应性主峰的保留时间前后漂移±5

3、%重组人生长激素主峰与脱氨的重组人生长激素峰之间的分离度应不小于1.0，重组人生长激素主峰的拖尾因子应为0.91.8。2.2注射用重组人生长激素含量（高分子蛋白）流动相验证项目验证项目技术标准外观无色透明澄清液体，无发霉、微粒沉淀物pHpH 7.0±0.2系统适应性主峰的保留时间前后漂移±5%重组人生长激素二聚体的峰高除以单体与二聚体峰之间的谷高的值作为分离度，分离度应不小于2.03 验证时间安排3.1 2012年10月20日至 2012 年11月05日 制订、审核及批准验证方案；3.2 2012年11月06日至 2012 年12月 10日 实施验证3.3 2012年12月

4、11日至 2012年12月 20日 写出验证报告4 验证前提条件确认4.1 相关文件及人员培训确认4.1.1 相关文件确认序号文 件 名 称编号是否为现行文件是否经过培训1高效液相色谱仪岛津LC-10AD标准操作规程SOP-SB-002-01是 否是 否2高效液相色谱仪Waters1525标准操作规程SOP-SB-001-01是 否是 否3高效液相色谱系统适应性试验标准操作规程SOP-ZL-048-02是 否是 否4高效液相色谱柱使用、处理标准操作规程SOP-ZL-049-01是 否是 否5高效液相色谱换柱标准操作规程SOP-ZL-050-01是 否是 否6相关蛋白含量测定标准操作规程SOP-

5、ZL-027-02是 否是 否6高分子含量测定标准操作规程SOP-ZL-028-02是 否是 否结论: 检查人/日期： 复核人/日期： 4.1.2 验证人员确认序号部门姓名岗位是否经过培训1质量部QC组陈赞利精密仪器检验员是 否2质量部QC组刘瑞招精密仪器检验员是 否3质量部QC组华世标QC主任是 否4质量部QA组彭素英现场监控是 否5生产部工程组吴锦明设备维护保养是 否结论: 检查人/日期： 复核人/日期： 4.2 验证用仪器仪表和物品有效性确认见附录3序号名称设备编号或批号是否已验证并在有效期内1LC-10A 高效液相色谱仪是 否2Waters1525高效液相色谱仪是 否3三羟甲基氨基甲烷

6、是 否4盐酸是 否5正丙醇是 否6无水磷酸氢二钠是 否7磷酸二氢钠是 否8异丙醇是 否9重组人生长激素对照品是 否10人生长激素单体与二聚体混合物对照品是 否结论: 检查人/日期： 复核人/日期： 5 验证过程5.1 注射用重组人生长激素相关蛋白色谱条件及系统适用性描述5.1.1色谱条件色谱柱：C4反相色谱柱（4.6×250mm,5um）检测波长：220nm流动相：以pH7.5三羟甲基氨基甲烷缓冲液（用1mol/L盐酸溶液调节0.05mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液pH值至7.5）-正丙醇（约71：29）为流动相，以pH7.5三羟甲基氨基甲烷缓冲液溶解制得的标准品（2mg/ml）20u

7、l试运行，根据检验结果，调节流动相中正丙醇的比例使人生长激素主峰保留时间为3036min.流速：0.5ml/min进样量：20ul柱温：455.1.2系统适用性取系统适用性试验用溶液取重组人生长激素对照品,用0.05mol/L三羟甲基氨基甲烷缓冲液（PH7.5）制成2mg/ml的溶液，过滤除菌，室温放置24小时20ul体积注入液相色谱仪，重组人生长激素主峰与脱氨的重组人生长激素峰之间的分离度应不小于1.0，重组人生长激素主峰的拖尾因子应为0.91.8。5.1.3按要求配制好三个批号的注射用重组人生长激素相关蛋白流动相，置流动相专用瓶内，密封，于室温条件下保存，在配好的第1天、第7天、第14天、

8、第21天、第28天和第35天对流动相进行检查，检查项目包括外观、pH值和系统适用性。5.1.4记录结果第1天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第7天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第14天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第21天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果：

9、 检验人/日期： 复核人/日期： 第28天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第35天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 5.2 注射用重组人生长激素含量（高分子蛋白）色谱条件及系统适用性描述5.2.1色谱条件色谱柱：TSKgel G3000SWXL检测波长：214nm流动相：异丙醇-0.063mol/L 磷酸盐（无水磷酸氢二钠5.18g，磷酸二氢钠3.65g，加水950ml,用磷酸调节PH值至7.0，用水制成100

10、0ml）( 3 ：97)流速：0.6ml/min进样量：20ul柱温：室温5.2.2系统适用性取系统适用性试验用溶液取人生长激素单体-二聚体对照品,用0.025mol/L磷酸盐缓冲液（PH7.0）（取0.063mol/L磷酸盐缓冲液（12.5）制成1.0mg/ml的溶液20ul体积注入液相色谱仪，以重组人生长激素二聚体的峰高除以单体与二聚体峰之间的谷高的值作为分离度，分离度应不小于2.05.2.3按要求配制好三个批号的注射用重组人生长激素含量（高分子蛋白）流动相，置流动相专用瓶内，密封，于室温条件下保存，在配好的第1天、第7天、第14天、第21天、第28天和第35天对流动相进行检查，检查项目包

11、括外观、pH值和系统适用性。5.2.4记录结果第1天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第7天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第14天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第21天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第28天 批号/结果项

12、目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 第35天 批号/结果项目外观pH系统适应性主峰保留时间分离度是否符合规定是 否是 否是 否检查结果： 检验人/日期： 复核人/日期： 6 偏差及漏项的处理6.1 如果在验证过程中出现偏差，应做出合理解释或针对相应的偏差项目进行整改，并进行 再验证。6.2 如果在验证过程中出现漏项，应及时对遗漏项目进行补验证偏差及漏项：(具体见偏差表)偏差漏项处理：(具体见偏差表)7 验证结果及评定 评价人： 日期： 8 验证周期确认周期：当流动相的配制发生改变时，本方法需再验证。六、附录无七、相关文件SOP-SB-002-01 高效液相色谱仪岛津LC-10AD标准操作规程SOP-SB-001-01 高效液相色谱仪Waters1525标准操作规程SOP-ZL-048-02 高效液相色谱系统适应性试验标准操作规程SOP-ZL-049-01 高效液相色谱柱使用、处理标准操作规程SOP-ZL-050-01 高效液相色谱换柱标准操作规程SOP-ZL-02