槐花米中芦丁的提取分离与鉴定

1、H0°、0F'槐花米中芦丁的提取与鉴定背景知识芦丁（Rutin） 乂称芸香苜，广泛存在丁植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、养麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物 Sophora japonica L的未开放的花蕾）和养麦中含量最高（含量可达12-16%）,可作为大量提 取芦丁的原料。芦丁是由斛皮素 （Quercetin） 3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose组成的双糖脱水形成的苜。芦丁 R=Glc-(6-l)-Glc 椭皮素R=H芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3分子的结晶水，熔点为17

2、4178C，无水物188190C。溶解度：冷水中为1:10 000;沸水中1:200;冷乙醇 1:650;热乙醇1:60;冷毗噬1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶丁苯、乙酰、氯仿、 石油酰，溶丁碱而呈黄色。芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶丁碱液，酸化后乂可析出，因此, 本实验采用碱提取酸沉淀法提取芦】芦丁具有维生素P羊作用。能维持血管的正常通透性，减低血管的脆性，缩短 流血时间，可作为高血压病的辅助治疗剂。亦可用丁防治因缺乏芦丁所致的其他出 血症。一、实验目的通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作；熟悉芦 丁、tffl皮素的结构性质和检识方法。二、实验要求独立完

3、成实验，从槐花米中提取出芦丁并进行鉴定。三、实验原理芦丁届黄酮类化合物，分子中有较多酚羟基，具弱酸性，易溶于热碱中，酸化 后乂析出，因此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁，乂利用芦丁在冷水和热水中溶解 度相差较大的特性进行重结晶精制。四、实验材料和器也【器也】烧杯（ 500ml） 2个，试管2个，布氏漏斗1个，玻璃棒1根，抽滤瓶1个，滴管, 移液管（10ml） 1根，洗耳球1个，滤纸，pH试纸，电热炉，真空抽滤机。【材料】槐米花30 g,饱和石灰水，0.4%硼砂水溶液，镁粉，pH试纸，浓盐酸，95%乙醇, 10% a蔡酚乙醇溶液，浓硫酸，蒸僻水。五、实验内容操作步骤：称取30g槐花米于研钵中研成粉状

4、物，置于500mL烧杯中，加入饱和石灰水， 加热至沸，并不断搅拌，煮沸30分钟后，趁热抽滤。然后用浓盐酸调节pH值为45< 放置1-2h,使沉淀完全，抽滤，沉淀用水洗涤23次，得到芦丁的粗产物。流程图：槐花米30g （研碎）置于500 ml烧杯中，加300ml热水，在 搅拌下加饱和石灰水调pH至8-9,加热煮沸10-20min ,趁热过滤。滤液在60 70 C下用浓盐酸调 pH4 5,静置2小时，抽滤。沉淀 用水洗至中性，自然干燥，称重。沉淀（粗制芦丁）选做内容不溶物（弃去）滤液静置充分冷却，抽滤, 沉淀用蒸保水洗至中 性，自然干燥，称重悬浮于蒸保水中（约500ml ）,加热煮 沸10-

5、20ml ,至澄清，趁热过滤。沉淀（精制芦丁）芦丁的提取与分离流程图操作步骤：称取30g槐花米于研钵中研成粉状物，置于500mL烧杯中，加入300ml热水， 以饱和石灰水调pH至8-9,加热至沸，并不断搅拌，煮沸10-20分钟后，趁热抽滤。 然后用浓盐酸调节pH值为45。放置1-2h,使沉淀完全，抽滤，沉淀用水洗涤 23 次，得到芦丁的粗产物。六、实验关键及注意事项1、本实验采用碱溶酸沉法从槐花米中提取芸香苜，收率稳定，且操作简便。在提取时应注意将槐花米捣碎，使芸香苜易于在热水中溶出。槐花米中含有大量粘 液质，加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。pH应严格控制在8-9,不得超过10.因为在强碱条件下

6、煮沸，时间稍长可促使芸香苜水解而破坏，使得收率下降。酸沉淀时pH应为4-5,不宜过低，否则会使芸香苜形成烽盐溶于水，也降低收率。2、 提取过程中加入硼砂水的作用：既能调节碱性水溶液的pH值，乂能保护芸 香苜分子中的邻二酚羟基不被氧化，亦保护不与钙离子络合，使芸香苜不受损失。七、芦丁的鉴定芦丁的定性反应取芦丁 3-4mg,加乙醇5-6ml使其溶解，分成二份作下述试验：A. 盐酸-镁粉反应：取上述溶液1-2ml,加2滴浓盐酸，再加少许镁粉，注意观 察颜色变化情况。（红色）B. Molish反应：取上述溶液1-2ml,然后再加入等体积的10%先蔡酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸，注意观察两液面产生的颜色变化（紫红色）。八、思