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1、会计学1病毒的细胞培养病毒的细胞培养第1页/共43页第2页/共43页第3页/共43页第4页/共43页第5页/共43页第6页/共43页第7页/共43页第8页/共43页第9页/共43页第10页/共43页第11页/共43页第12页/共43页第13页/共43页第14页/共43页（5）丙酮酸钠、葡萄糖：）丙酮酸钠、葡萄糖：是属碳水化合物的成分，是细是属碳水化合物的成分，是细胞生命的能量来源。胞生命的能量来源。（6）抗生素抗生素：最终浓度为青霉素最终浓度为青霉素 100 Uml，链霉素，链霉素100Uml（青霉素为（青霉素为80万万U瓶，将其溶解于瓶，将其溶解于4ml三蒸三蒸水中，每升培养液中加人；链霉素

2、为水中，每升培养液中加人；链霉素为100万万U瓶，将其瓶，将其溶解在溶解在5ml三蒸水中，每升培养液加）。三蒸水中，每升培养液加）。（7）冻存液：二甲基亚砜）冻存液：二甲基亚砜（8）细胞生长液：）细胞生长液：是用以维持细胞生长增殖的液体。是用以维持细胞生长增殖的液体。其是配方：其是配方： 基础培养基基础培养基 8090 血清血清 10% 双抗双抗 100u/ml （9）细胞维持液：）细胞维持液：用以维持细胞缓慢生长或不死的培养用以维持细胞缓慢生长或不死的培养液。液。其是配方：其是配方： 基础培养基基础培养基 95 血清血清 25 双抗双抗 100u/ml 第15页/共43页第16页/共43页第

3、17页/共43页贴附生长型细胞生长型细胞细胞培养常用的培养瓶细胞培养常用的培养瓶、培养皿、培养皿、6孔板、孔板、96孔孔板板第18页/共43页悬浮生长型细胞悬浮生长型细胞第19页/共43页第20页/共43页第21页/共43页第22页/共43页第23页/共43页第24页/共43页第25页/共43页第26页/共43页第27页/共43页第28页/共43页操作步骤操作步骤 将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。 用用1-2ml营养液或营养液或PBS缓冲液，清洗培养瓶，倒出缓冲液，清洗培养瓶，倒出 加入加入1ml含有含有EDTA的胰酶，清洗五面，倒出的胰酶，清洗五面，倒出 在加入在加入1ml含有含有EDTA的胰酶，当看到培养瓶上含有的胰酶，当看到培养瓶上含有一两个小空斑，也可看到有灰白色浑浊时，将胰酶倒掉一两个小空斑，也可看到有灰白色浑浊时，将胰酶倒掉 加入培养液，用移液管吹洗贴有细胞的一面，将细加入培养液，用移液管吹洗贴有细胞的一面，将细胞从培养瓶壁上吹下来胞从培养瓶壁上吹下来 然后进行传代然后进行传代第29页/共43页消化传代的步骤消化传代的步骤第30页/共43页第31页/共43页第32页/共43页第33页/共43页第34页/共43页第35页/共43页第36页/共43页第37页/共43页第38页/共43页第

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