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文档简介

1、Xx公司作业指导书编号:xxx/xx-xx-20xx培养基使用规程版本/修改次:1/0第1页共2页1. 目的规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理。2. 适用范围本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。3. 职责3.1检验人员:按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。3.2科室负责人:负责指导、监督检验人员规范使用培养基。4. 使用程序4.1培养基的储存4.1.1除特殊说明和标准规定,通常情况下基础培养基(如营养琼脂培养基)应在4 °C冰箱中保存不超过3个月,或在室温(20 C)下保存不超过一个月1。4.1.2灭菌后的培养基应置适当条件下保存至规定的有效期,并对保存条件进

2、行确证,详见表1。表1 培 养基 28 C条件保存期限23培养基种类保存条件保存时间予土匚冷K甘不密封2周平板培养基密圭寸68周试管培养基不密封24周(棉塞)密圭寸810周试管培养基不密封8周(软木塞或腊封)密圭寸1618周4.2琼脂培养基的融化4.2.1将培养基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽,如105 C)使之融化。经过高压的培养基应尽量减少重加热时间,避免过度加热。4.2.2培养基融化后放入47 C±2 C的恒温水浴锅或恒温培养箱中保温,直至使用。4.2.3融化后的培养基应尽快使用,放置时间一般不应超过4h,不可二次融化。4.3培养基的脱气必要时,将培养基在

3、使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器的盖子;加热后盖紧,并迅速冷却至使用温度。4.4添加成分的加入对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47 C±2C时再加入。灭菌的添加成分在加入Xx公司作业指导书编号:xx/xx-xx-20xx培养基使用规程版本/修改次:1/0第2页共2页期等内容。4.5.4对于采用表面接种形式培养的固体培养基。应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿 盖,将平板倒扣于烘箱/培养箱中(温度设为25 C50 C);或放在有对流风的无菌净化台 中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商业化的平板琼脂培养基应按 照厂商提供的说明使用。4.6培养4.

4、6.1培养时每垛最多堆放六个平板,平板间要留有空隙以保证空气流通,使培养物的 温度尽快与培养箱温度达到一致。4.6.2在培养过程中,培养基会损失水分。当水分损失的里大于培养基总里的15%时,就会影响微生物的生长。造成培养基水分损失的因素较多,如培养基成分,平皿中培养基 总量和培养箱的类型等(如使用带风扇的培养箱,培养箱中的湿度偏低,平板在培养箱中 位置靠近培养箱内壁等),操作时应注意避免。4.7培养基的弃置培养基废弃前,实验室米用121 C、15分钟蒸汽灭菌,或煮沸消毒30分钟。5 .参考文献5.1 SN/T1538.1-2005.培养基制备指南 第一部分:实验室培养基制备质量保证通则 S.5.2王宏明.微生物检验技术操作规程与质量控制及检测数据分析处理实用手册M 北京:卫生科技出版社,

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