艾滋病实验室检查

1、整理课件1艾滋病艾滋病 (AIDS)整理课件2实实 验验 室室 检检 查查整理课件3免疫学检测免疫学检测R2M1整理课件4血清学检测血清学检测（）（）ELISA（酶联免（酶联免疫试验）疫试验）整理课件5血清学检测血清学检测（）（）Western blot （免疫印迹（免疫印迹试验）试验）整理课件6血清学检测（）血清学检测（）ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）整理课件7RT-PCR（逆转录（逆转录-聚合酶链反应）聚合酶链反应） 核酸定量技术原理PCRPCR：高温变性：高温

2、变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72)；经；经25302530个循环，成倍数扩增个循环，成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）和一个荧光淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查血浆中的病毒查血浆中的病毒RNARNA整理课件8淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交( (Northern blot) 原理：原理： RNARNA

3、片段经电泳分片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂纤维素滤膜，再用探针杂交交整理课件9Sanger测序法测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生特定的碱基处终止，产生A A、T T、C C、G G四组不同长度的一系列核四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的苷酸，通过在尿素变性的PAGEPAGE胶上电泳，获得胶上电泳，获得DNADNA序列序列整理课件10l血浆、单核细胞、脑脊液可分离出血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIVl操作复杂，主要用于科研操作复杂，主要

4、用于科研整理课件11诊诊 断断整理课件12流行病学史流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活史；输入未经史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳抗体阳性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。临床表现：临床表现： 高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现，高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现， 颈、腋及颈、腋及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。感染。 无症状期、艾滋病期临床表现。无症状期、艾滋病期临

5、床表现。 实验室检查实验室检查：HIV抗体阳性，并经确证试验确认。抗体阳性，并经确证试验确认。CD4+T淋巴细胞数明显减少。淋巴细胞数明显减少。HIV RNA和和P24抗原的检抗原的检测有助于早期诊断新生儿的测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。感染。整理课件13l急性期急性期 流行病学史、临床表现、流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳抗体由阴性转为阳性性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性l无症状期无症状期 流行病学史、流行病学史、HIV抗体阳性抗体阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体阳性抗体阳性 整理课件14l艾滋病期艾滋病期 流行病学史，流行病学

6、史，HIV抗体阳性，临床表现有下列抗体阳性，临床表现有下列一项或以上一项或以上反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病；结核病；14.14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症；青年痴呆症；15.15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。卡波西肉瘤或淋巴瘤。整理课件15 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状整理课件16l原发性原发性CD4+淋巴细胞减少症淋巴细胞减少症 无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。l继发

7、性继发性CD4+淋巴细胞减少淋巴细胞减少 肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免疫抑制治疗后。整理课件17预预 后后整理课件18感染的感染的HIV型别及亚型：型别及亚型： HIV-1较较HIV-2临床进展快临床进展快并发的机会性感染：并发的机会性感染： 同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并丙型肝炎者预后差合并丙型肝炎者预后差抗逆转录病毒治疗：抗逆转录病毒治疗： 治疗改变了艾滋病进程治疗改变了艾滋病进程 整理课件19典型典型 (70%80%)：5 51010年进展为艾滋病年进展为艾滋病快速进展型快速进展型(10%15%)：2 2