试验三穿山龙中薯蓣皂苷元的提取分离与鉴定

1、实验三 穿山龙中薯莓皂苜元的提取、分离与鉴定、概述穿山龙为薯莓科穿龙薯莓Dioscorea nipponica Makino）的T燥根茎。具有活血化瘀、祛风除湿、活肺化痰等功效。穿山龙中主要化学成分的结构及物理性质:薯莓皂苜（dioscin ）为无定形粉未或针状结晶，mp27砂277C 0可溶丁甲醇、乙醇、甲酸，难溶丁丙酮和弱极性有机溶剂，不溶丁水。I 125薯莓皂苜元（diosgenin ）为白色粉末,mp20" 207 C,D -129。（C=1.4三氯甲烷）。可溶丁有机溶剂及醋酸中，不溶丁水。D一葡萄糖L 一鼠李糖、实验部分（一）实验目的要求1、掌握穿山龙中薯莓皂苜元的提取和精

2、制方法。2、熟悉薯莓皂苜及皂苜元的性质和检识方法。（二）实验原理薯莓皂苜元在植物体内与糖结合成苜，经水解（酸水解、酶水解）可得薯莓 皂苜元和糖。利用薯莓皂苜元不溶丁水，溶丁有机溶剂的性质，用石油酰连续回 流提取，将其从原植物中提取出来。（三）实验药材、仪器与试剂1、药材：穿山龙粗粉70g （每组）2、 仪器：电热套、圆底烧瓶、冷凝管、纱布、乳钵、PH试纸、烘箱、试管、 水浴锅、索氏提取器等。3、试剂：浓fSO、NaCQ粉末、蒸僻水、950醇、1嘴钳酸乙醇溶液、石油酰（60-90 C）、醋酊、浓硫酸、三氯甲烷、浓硫酸等。（三）实验内容1、薯莓皂苜元的提取、分离和精制穿山龙粗粉（70g）置圆底烧瓶

3、中，加水 350ml、浓HSO30ml,室温浸泡24小时，文火加热回流46小时，v 放冷，倾出酸水液酸性药渣用活水反复漂洗除去余酸，然后将药渣倒入乳钵中，加NaCO粉末，反复研J 磨调PH至中性（用PH试纸测试）、水洗、抽干中性药渣低温（80C）干燥12小时干燥药渣置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中， 以石油酰（60-90 C） 150 ml为溶剂，连 续回流提取4-5小时石油酰提取液回收石油酰至剩10-15ml,迅速倾入小烧瓶中、密盖，置丁冰箱中析晶（48h）,抽滤滤液沉淀I用少量冷石油酰洗二次，抽干薯莓皂苜元粗品置圆底烧瓶中，加50ml甲醇，在沸水浴上加热回流至 I完全溶解，趁热抽滤，滤液放

4、入冰箱析晶。薯莓皂甘元精品2、鉴定（1）检识反应 醋酎浓硫酸反应（Liebermann-Burchard反应）取样品适量，加冰醋酸0.5ml使溶解，续加醋0.5ml搅匀，再丁溶液的边 沿滴加1滴浓硫酸，观察并记录现象。 三氯甲烷一浓硫酸反应（Salkowski反应）取样品适量，加三氯甲烷1ml使溶解，沿试管壁加等量的浓硫酸，分别置可 见光及紫外灯下，观察并记录现象。（2）薄层色谱鉴定吸附剂：硅胶G-CMC-NOI层板样 品：1%g制薯莓皂苜元的乙醇液对照品：19膺莓皂苜元标准品的乙醇液展开剂：苯-乙酸乙酯（8:2）显色剂：1%磷钳酸乙醇溶液，105 C加热至斑点显色活晰。实验结果记录：观察斑点

5、颜色，记录图谱并计算 Rf值。（四）实验指导及注意事项1. 原料经酸水解后应充分洗涤呈中性，以免烘十时炭化。2. 在十燥水解原料的过程中，应注意压散团块和勤翻动，以利快十。3. 在连续回流提取过程中，由于使用的石油酰极易挥发损失，故水浴温度 不宜过高，能使石油酰微沸即可。此外可加快冷凝水的流速，以增加冷凝效果。4. 回收石油酰的蒸僻操作，不必另换蒸僻装置。只将索氏提取器中的滤纸筒取出，再照原样装好，继续加热回收烧瓶中的溶剂，待溶剂液面增加至高虹吸 管顶部弯曲处1cm处，暂停回收，取下提取器，将其中石油酰移置另外容器中， 如此反复操作，即可完成回收石油酰的操作。5. 在连续提取过程中，欲检查有效成分是否提取完全，可取提取器中提取 液数滴，滴于白瓷皿中，挥散溶剂，观察有无残留物，然后进行醋酊-浓硫酸反 应。若反应呈阴性，示已提尽。（五）思考题