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文档简介
1、1实验五实验五果蝇唾腺染色体的观察果蝇唾腺染色体的观察 21、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色体的制片方法;2、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。一、实验目的一、实验目的3 双翅目昆虫(果蝇等)幼虫期唾腺细胞中具有相当于普通染色体100150倍的巨大染色体,由于存在于唾液腺细胞中,所以称为唾腺染色体(salivary gland chromosome) 。它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂,永久停留在间期,唾腺染色体经过多次复制而不分开,约有10004000根染色体丝的拷贝,所以又叫多线染色体(polytene chromosomes )。二、实验原理二、实验原理4 黑腹果蝇巨
2、大的唾腺染色体是从染色中心向四周放射状地伸出5长1短共6条臂。果蝇染色体数为2n8。其中1号染色体(X染色体)为端着丝粒染色体,其着丝粒附着地一端在染色中心上,另一端游离;2号、3号染色体为中部着丝粒染色体,每条呈“V“伸展两臂,4号染色体很短小,呈点状附在染色中心边缘。5特征 R巨大;R体细胞配对,染色体只有半数(n);R各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心;R深浅不同、疏密个别的横纹。6 染色质丝的不同部位螺旋化程度不同,其中螺旋化程度较高的部位形成染色粒,这些染色粒经多线染色体的“放大”,形成染色较深的横纹。横纹的相对大小和空间排列是恒定的,可以作为天然的精确基因定位的“
3、坐标”。这些横纹的数目和位置一般是恒定的,具有果蝇种的特征,染色体的缺失、重复、倒位、易位等,都能在唾腺染色体上辨别出来。 banded chromosomes 1000 x7材料:果蝇的三龄幼虫试剂: 1%醋酸洋红器具:显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、绘图纸三、仪器与材料三、仪器与材料8(1)取果蝇三龄幼虫置于载玻片上,由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处,所以左手持镊子按压住虫体后端三分之一的部位,固定幼虫,右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位,适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。四、实验程序四、实验程序910果蝇三龄幼虫解剖图果蝇三龄幼虫解剖图Salivary gland:唾腺
4、Gonad: 性腺Ganglion: 神经节Trachea: 气管Ovary:卵巢Intestine:肠11挑取果蝇唾腺的过程12唾腺的位置及形态特征1314(2)滴加一滴醋酸洋红,在显微镜下(4倍镜)去除唾腺周围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体,外有白色的脂肪组织(不透明)。去除幼虫其它组织部分,并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。 15分离出来的果蝇唾腺位置:在幼虫体前约1/3处;形状:形如一对香蕉,上小上大。一边常附着带状的不透明的脂肪。颜色:半透明如玻璃,略带白色,比周围组织透明;细胞特征:唾腺上的细胞较大,轮廓清晰,用低倍镜即可清楚看到。16唾腺组织唾腺组织17不同人操作得
5、到的唾腺组织可能不一样不同人操作得到的唾腺组织可能不一样18放大的唾腺组织放大的唾腺组织19放大的唾腺组织放大的唾腺组织20放大的唾腺组织放大的唾腺组织21(3)盖上盖玻片,用刀片支起盖玻片一角,按住盖玻片另一边,用解剖针轻轻敲打盖玻片,去掉刀片,稍加热后覆上滤纸垂直压片。(4)观察,先在10倍镜下观察找到染色体后,再换高倍镜下观察,比较各染色体的横向纹带、带宽大小、带纹排列顺序,以及由着丝点纠集组成的染色体中心。 2210倍镜2340倍镜24100倍镜25重要实验步骤重要实验步骤:取果蝇三龄幼虫,一手持镊子夹住虫体中部稍后,固定幼虫,另一手持解剖针按住幼虫头部,轻缓拉开头部,去除幼虫的其他组织部分和唾腺周围的脂肪等其他组织,再用常规染色体制片方法制片。 26实验注意事项实验注意事项 :1、取果蝇三龄幼虫最佳,其行动迟缓,肥大,爬上管壁(将要化蛹)。
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