HC2HPV检测临临床讲课版

1、1会计学HC2HPV检测临临床讲课版检测临临床讲课版n 全球发病率大约50万/年，女性第二号杀手n 我国新发病例约13万/年n 新发病例逐年增加，呈年轻化趋势n 我国宫颈癌死亡率约2万/年n 唯一病因明确的肿瘤唯一病因明确的肿瘤 持续高危型持续高危型HPV感染感染n 从HPV感染到宫颈癌，一般需要1020年n 早发现、早治疗，可以预防和根治利用基因杂交、化学发光、信号放大的原理在分子水平同时检测被WHO确认的13种高危型-HPV 病毒DNAHC2检测方法分为简单的5步Step 1:变性溶解细胞，解链和变性核酸解链和变性核酸, 释放HPV DNA单链HC2检测方法分为简单的5步Step 2:杂交

2、全长病毒 RNA探针与HPV病毒靶DNA结合，形成RNA:DNA 复合物复合物全长病毒RNA探针HC2检测方法分为简单的5步Step :捕获RNA:DNA 复合物被包被在微孔板上的抗体捕获 一抗特异性结合RNA:DNA 复合物 HC2检测方法分为简单的5步Step 4:杂交检测用二抗结合捕获后的复合物二抗偶联有碱性磷酸酶二抗偶联的碱性磷酸酶HC2检测方法分为简单的5步Step :产生发光信号加入碱性磷酸酶的底物 产生化学发光信号，仪器判读发光信号nHC2 HPV检测技术和原理nHC2 HPV检测的特点和优势nHC2 HPV检测的临床应用对临床的意义n假阴性率很低n避免漏诊！ HC2 HPV t

3、est 临床敏感度最好大规模数据统计分析：nDigene HC2 HPV检测临床敏感度平均在94%nDigene HC2 HPV 联合细胞学检测灵敏度高达100%n基于PCR的HPV检测方法临床灵敏度平均在82%HC2 HPV test 优势业界最好的临床敏感度优势业界最好的临床敏感度%PCR median 82%HC2 median 94%sensspecdigene HC2 HPV test 阴性预测值最高nDigene HC2 HPV 检测阴性预测值高达99.9%，几乎达到100%。HC2阴性的妇女，99.9%不会发展为子宫颈癌n专利全长8000个bps的13中高危型的混合RNA探针，对

4、临床的意义n安全，HC2阴性的妇女筛查时间间隔可延长至-5年，这期间发生宫颈癌的风险很小！ HC2 HPV test 优势阴性预测值最高优势阴性预测值最高99.9%对临床的意义n实验室和人员技能要求条件较大n开展比较容易、质量容易控制n检测结果可靠准确、 HC2 HPV检测简便、可靠n 无需DNA提取n 无需基因扩增n 无需高度清洁的实验环境n 操作简便、易培训n 灵活适用于大、小样本n 实验室内、实验室间高度的可重复性n 益于实验室质量控制与管理HC2 HPV test 优势简便、可靠、重复性好优势简便、可靠、重复性好对临床的意义n 采用的HPV检测判断标准应该是经过临床验证的，n 经过验证

5、的方法检测到的是真正有风险的人群，而不是一过性的感染n 防治一过性感染或假阳性引起病人的过度恐慌HC2 HPV唯一经过临床验证检测目的：检测病变、而非病毒统一的判定标准：1pg/ml相当于分析灵敏度：5000拷贝/检测判断标准经大样本全球多中心临床验证防止过高的分析灵敏度敏感造成的假阳性HC2 HPV test 优势全球唯一经过临床验证优势全球唯一经过临床验证Adapted from Snijders et al. Journal of Pathology 2003; 201:1-6Adapted from Snijders et al. Journal of Pathology 2003;

6、201:1-6由此可见：HC2的分析阈值及判断标准是经过临床验证的由此可见：基于PCR的HPV检测方法检测到许多与临床无关的HPV感染指引推荐数据验证接受认证n美国FDA n欧洲CEn中国SFDAn300多篇专业期刊的学术文章中n超过30个国家，共87.5万多妇女参与的临床试验研究n超过4000万个致癌HPV检测是使用digene HC2 HPV检测 HC2 HPV Test 临床临床HPV检测领域的金标准检测领域的金标准n美国癌症协会指南（2002年）n美国妇产科学会指南（2003年）n中国宫颈癌筛查及早诊早治指引（2003年）n美国妇科肿瘤学会指南（2004年）n世界卫生组织国际癌症研究所

7、推荐（2004年）n国际宫颈癌防治联盟指南（2007年）nEUROGIN会议推荐（2007,2008,2010）n HC2 HPV检测技术和原理n HC2 HPV检测的特点和优势n HC2 HPV检测的临床应用 高危高危HPVHPV检测检测 + + 液基细胞学检查液基细胞学检查HPVHPV阴性阴性CytoASC-USCytoASC-USHPVHPV阳性阳性CytoASC-USCytoASC-USHPVHPV阴性阴性CytoASC-HCytoASC-HHPVHPV阳性阳性CytoASC-HCytoASC-H阴道镜检查阴道镜检查/ /多点活检多点活检+ECC+ECC随访随访（次（次/3/3年）年）

8、随访随访（次（次/ /年）年）相应治疗相应治疗(+)(+)()()EUROGIN推荐的采用推荐的采用HPV作为初筛的筛查流程作为初筛的筛查流程Cuzick et al.; 2008 EUROGINHPV 16 分型分型 或或mRNA或或p1625-64岁妇女岁妇女 高危型高危型HPV 检测检测5年后复检年后复检细胞学细胞学阴性阴性阳性阳性正常或边界正常或边界 轻度异常轻度异常阴道镜阴道镜 3-5年后复年后复检检阴道镜阴道镜阴性阴性任何一个任何一个阳性阳性Jack Cuzick, PhD Wolfson Institute of Preventive Medicine St Bartholome

9、ws Medical School London, UK，2010 EUROGIN提出HPV分型检测仅用于已被证实为高危型HPV阳性&细胞学阴性的人群1. 30岁以上的妇女，有推荐的筛查指南n ASCCP guideline - 2. 对于ASC-US的妇女，不推荐用n ASCCP guideline - .2009年年3月月SOG发表声明限制分型的使用发表声明限制分型的使用.2009年年12月月ASCCP在推出分型应用的指引后，有新增说明，对分型应用作出明在推出分型应用的指引后，有新增说明，对分型应用作出明确限制确限制.两个指南中提出：两个指南中提出：n不能用于准备接种疫苗前的人群不

10、能用于准备接种疫苗前的人群HPV感染情况的评估感染情况的评估n不能用于宫颈癌初筛不能用于宫颈癌初筛n不能用于不能用于ASCUS妇女的分流妇女的分流医生需要知道的事实医生需要知道的事实1：临床适合进行：临床适合进行HPV分型检测的人群有多大？分型检测的人群有多大？96% Pap- & HPV-In a general screening population of 798,000 Kaiser patients, 96% of the women age 30+ did not require any further follow-up.4%Pap- & HPV+Castle,

11、PE, et al. Obstet Gynecol 2009;113:595600.最初被检测为最初被检测为HPV+ & Pap- 的人，的人，大部分在大部分在6个月内感染自动清除个月内感染自动清除60% at 6 mos became Pap- & HPV-Clavel C, et al. Brit J Cancer, 2001;89:1616-1623.40% remained Pap- & HPV+大部分妇女在大部分妇女在6个月内通过自身免疫力清除感染，对这部分人群采用分型检测只会个月内通过自身免疫力清除感染，对这部分人群采用分型检测只会额外增加的费用，而不会带来

12、任何益处额外增加的费用，而不会带来任何益处n对于这部分人对于这部分人群采用群采用12月内重月内重复细胞学和复细胞学和HPV检测的随检测的随访方法，仍然访方法，仍然是个有效的方是个有效的方法法?“在一个比较好的筛查人群中在一个比较好的筛查人群中HPV阳性，细胞学阴性的妇女发展为阳性，细胞学阴性的妇女发展为CIN2+的风险只有的风险只有2.4 to 5.1%.” ACOG, 2008.ACOG Practice Bulletin, Number 99. Obstet Gynecol. 2008;112:1419-1444.宫颈病变术后的追踪与管理宫颈病变术后的追踪与管理术前、术后HC2检测有助于n 提示病灶是否清除干净n 了解是否有复发可能 n 术后6、12个月复查，HPV检测结果仍为阳性，提示 有残留或复发可能 将风险降至最低、为患者提供最有效的保护HPV 16 分型分型 或或mRNA或或p1625-64岁妇女岁妇女 高危型高危型HPV 检测检测5年后复检年后复检细胞学细胞学阴性阴性阳性阳性正常或边界正常或边界