胃癌的HER2检测

1、胃癌的胃癌的HER2检测检测 胃癌的胃癌的HER2检测检测n胃癌和HER2n胃癌中的HER2表达nToGA 研究n胃癌HER2检测方法推荐胃癌和胃癌和HER21 = 基因拷贝数基因拷贝数2 = mRNA 转录转录3 = 细胞表面受体蛋白表达细胞表面受体蛋白表达4 = 细胞外受体功能域释放细胞外受体功能域释放A = HER2 DNAB = HER2 信使信使RNAC = HER2 受体蛋白受体蛋白正常正常过度表达过度表达/ /扩增扩增细胞核细胞核细胞质细胞质细胞膜细胞膜1234CBAHER2阳性的细胞存在于身体各处阳性的细胞存在于身体各处n大部分研究认为：胃癌中大部分研究认为：胃癌中HER2过表

2、达可提示差的预后。过表达可提示差的预后。nYonemura Y, et al. Cancer Res 1991; 51: 10341038: 260例胃癌中研究发现，例胃癌中研究发现，HER2表达与肿瘤大小、浆膜面浸润、淋巴结表达与肿瘤大小、浆膜面浸润、淋巴结转移相关。转移相关。nUchino S, et al. Cancer 1993; 72: 31793184. 108例胃癌中研究发现，例胃癌中研究发现，HER2过表达与差的过表达与差的10年生存率相关。年生存率相关。 nMizutani T, et al. cancer. Cancer 1993; 72: 20832088. 226例胃癌

3、中研究发现，例胃癌中研究发现，HER2阳性的早期胃癌患者预后显著差于阴性阳性的早期胃癌患者预后显著差于阴性者。者。 nNakajima M, et al. Cancer 1999; 85: 18941902. 在早期胃癌中，在早期胃癌中，HER2过表达是仅次于淋巴结状态的提示预后差的第过表达是仅次于淋巴结状态的提示预后差的第二大指标。二大指标。胃癌中胃癌中HER2的表达与预后的表达与预后胃癌中胃癌中HER2的的表达与预后表达与预后nRoss JS, McKenna BJ. Cancer Investigation 2001; 19: 554-568. HER2基因与胃肠道肿瘤：在中晚期胃腺癌中

4、可提示差的预后基因与胃肠道肿瘤：在中晚期胃腺癌中可提示差的预后n Tanner M, Hollmen M, Junttila TT et al. Annals Oncol. 2005; 16: 273-278. 胃癌中的胃癌中的HER2扩增与肠型，差的预后以及对赫赛汀敏感性的研究扩增与肠型，差的预后以及对赫赛汀敏感性的研究nCharoin JE, Jacqmin P, Banken L et al. Abstract, Population Approach Group (PAGE) 2004, Uppsala. 含赫赛汀的治疗方案的长期性观察研究含赫赛汀的治疗方案的长期性观察研究nAllga

5、yer H, Babic R, Gruetzner KU, et al. J Clin Oncol; 2000; 18:2201-2209. HER2是独立的胃癌预测因子是独立的胃癌预测因子芬兰研究芬兰研究131患者患者HER2扩增情况与扩增情况与OS(总生存率总生存率)的关系的关系Month Tanner, et al. Annals of Oncology 16: 273278, 2005CISH检测检测德国研究德国研究全部全部189例患者例患者HER2表达与表达与DFS(无病生存率无病生存率)的关系的关系0,1,2,3:IHC检测检测Heike Allgayer, et al. Jour

6、nal of Clinical Oncology, Vol 18, No 11 (June), 2000: pp 22012209德国研究德国研究139例例R0根治的患者根治的患者HER2表达与表达与OS(总生存率总生存率)的关系的关系0,1,2,3:IHC检测检测Heike Allgayer, et al. Journal of Clinical Oncology, Vol 18, No 11 (June), 2000: pp 22012209胃癌中胃癌中HER2的表达的表达Hofmann M, Stoss O, Shi D, et al. Histopathology. 2008 Jun;

7、52(7):797-805. 胃癌中胃癌中HER2的表达：的表达：IHCHofmann M, Stoss O, Shi D, et al. Histopathology. 2008 Jun;52(7):797-805. 胃癌中胃癌中HER2的表达：的表达：FISH/CISHn胃癌中胃癌中HER2表达的阳性率：表达的阳性率：nIHC：阳性率报道集中在10-40%，平均近20%nFISH/CISH：阳性率道集中在10-40%，平均近20%nToGA研究中的阳性率 22.1%胃癌中胃癌中HER2的表达的表达ToGA 研究研究ToGA 研究研究n全球例数最多的HER2检测研究 3807例n覆盖24个国

8、家n赫赛汀三期临床研究n第一个大型的生物靶向药物胃癌研究n中国筛选病人614例，15家医院n由于胃癌和乳腺癌病理组织染色方面的区别由于胃癌和乳腺癌病理组织染色方面的区别 (如肿瘤异如肿瘤异质性高质性高, 因蛋白水解活性增加导致蛋白降解增加，及因蛋白水解活性增加导致蛋白降解增加，及HER2受体对受体对IHC亲和性较差等亲和性较差等)，n在在ToGA研究中研究中同时使用同时使用IHC和和FISH检测检测，这也使研，这也使研究者获得了关于蛋白过表达和基因扩增的完整的信息。究者获得了关于蛋白过表达和基因扩增的完整的信息。 ToGA中中HER2检测方法检测方法ToGA 研究的设计研究的设计HER2阳性阳

9、性晚期胃癌患者晚期胃癌患者 (n=584)5FU 或或 卡培他滨卡培他滨a + 顺铂顺铂(n=290)R5FU 或或 卡培他滨卡培他滨a + 顺铂顺铂+ 赫赛汀赫赛汀(n=294)全球、多中心、随机、开放全球、多中心、随机、开放III期临床研究期临床研究1Bang et al; Abstract 4556, ASCO 2009 3807 位患者接受筛选位患者接受筛选1 810 HER2阳性阳性 (22.1%)HER2检测：进行IHC 和 FISHToGA中中HER2 阳性的定义阳性的定义nToGA研究同时用研究同时用IHC和和FISH对入组病人进行筛选，对入组病人进行筛选，有一项阳性即可入组。

10、有一项阳性即可入组。nIHC检测检测3+表示阳性表示阳性;nFISH检测检测HER2:CEP17扩增扩增 2表示阳性。表示阳性。 n研究中研究中3667例病人成功进行了例病人成功进行了IHC和和FISH检测，并根检测，并根据以上标准分为以下五个亚组：据以上标准分为以下五个亚组： nIHC 0/FISH+nIHC 1+/FISH+nIHC 2+/FISH+nIHC 3+/FISH+nIHC 3+/FISH 或未知或未知 Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4556.ToGA 中中HER2 筛选筛选 : 最终结果最终结果n同意参加筛选的病人

11、3883参加筛选的病人 (05年8月08年11月)3807FISH 或 IHC检测成功3667FISH 和 IHC检测均成功3280HER2检测阴性2857HER2检测阳性810IHC和和FISH HER2检测结果检测结果 (n=3280) 2519 例例IHC 0/1+ 病例中病例中: 7.5% FISH+761例例IHC 2+/3+ 病例中病例中: 74.4% FISH+HER2检测成功的病人检测成功的病人Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4556.IHC 0 n (%)IHC 1+ n (%)IHC 2+ n (%)IHC 3+

12、 n (%)总数总数n (%)FISH+94 (4.9)96 (15.7)212 (54.6)354 (94.9)756 (23)FISH1815 (95.1)514 (84.3)176 (45.4)19 (5.1)2524 (77)总数总数1909 (100)610 (100)388 (100)373 (100)3280 (100) ToGA 3667例例 HER2检测成功的病例中，检测成功的病例中， 810 例例 HER2阳性阳性 ( 22%) 610 例例 HER2 蛋白高表达蛋白高表达 ( 16%) 594 例符合例符合ToGA入选标准，随即分组入入选标准，随即分组入ToGAHER2阳

13、性的病例阳性的病例 (n=810)Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4556.IHC 0IHC 1+IHC 2+IHC 3+无无IHC结果结果FISH+949621235410FISH19无无FISH结结果果25不同国家不同国家的的HER2 阳性率阳性率胃食管结合部胃食管结合部的的HER2阳性率阳性率更高更高肠型的肠型的HER2阳性率更高阳性率更高手术标本和胃手术标本和胃镜标本镜标本HER2阳性阳性率相当率相当赫赛汀可延长生存赫赛汀可延长生存主要研究终点主要研究终点: OS（总生存）（总生存）时间 (月)294290277266246

14、2232091851731431471171139090647147563243243016211413712665401000处于风险的患者数11.113.80.00.10.20.30.40.50.60.70.80.91.002468 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36事件FC + TFC事件事件167182HR0.7495% CI0.60, 0.91p 值值0.0046中位中位OS13.811.1T, 赫赛汀第一个生存超过第一个生存超过12个个月的研究月的研究亚组亚组中位 OS (月)全部全部11.1 vs 13.8初步分析初步分析 IHC

15、0 / FISH+IHC 1+ / FISH+IHC 2+ / FISH+IHC 3+ / FISH+IHC 3+ / FISH7.2 vs 10.610.2 vs 8.710.8 vs 12.312.3 vs 17.917.7 vs 17.5探索性分析探索性分析 IHC 0 or 1+ / FISH+IHC 2+ / FISH+ or IHC 3+8.7 vs 10.011.8 vs 16.00.20.40.6123450.921.240.750.580.830.48, 1.760.70, 2.200.51, 1.110.41, 0.810.20, 3.38HR95% CI 0.740.60

16、, 0.911.070.650.70, 1.620.51, 0.83相对危险度相对危险度倾向赫赛汀倾向赫赛汀倾向无赫赛汀倾向无赫赛汀584617015925615131446N根据 HER2状态决定治疗的效果评价, p=0.0368van Cutsem E, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4509.HER2 状态对状态对OS的影响的影响IHC 2+/FISH+ 或或IHC 3+ 病人获益更病人获益更多多1.00.80.60.40.20.036343230282624222018161412108642011.816.0FC + TFCEvents1

17、20136HR0.6595% CI0.51, 0.83中位OS16.011.8 4.20.10.30.50.70.9月113218198405312420112282181961701701411421121229610075845365395128100039202813高危病人生存率探索性分析van Cutsem E, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4509.赫赛汀增强了肿瘤对药物的敏感性赫赛汀增强了肿瘤对药物的敏感性- 肿瘤缓解率肿瘤缓解率2.4%5.4%32.1%41.8%34.5%47.3%意向治疗人群（ITT）总缓解率(ORR)=完全缓

18、解率(CR)+部分缓解率(PR)p=0.0599p=0.0145F+C + 赫赛汀F+Cp=0.0017患者数 (%)CRPRORR赫赛汀联合化疗治疗赫赛汀联合化疗治疗 HER2阳性进展性胃癌阳性进展性胃癌/胃食管交界癌胃食管交界癌赫赛汀是第一个使病人生存获益的生物靶向制剂赫赛汀是第一个使病人生存获益的生物靶向制剂ToGA 研究研究HER2状态有必要整合到胃癌患者诊断和治疗状态有必要整合到胃癌患者诊断和治疗中去中去 胃癌胃癌HER2检测方法推荐检测方法推荐n始于始于1986年：年：nSakai K, et al. J Natl Cancer Inst 1986; 77: 104752.n90年

19、代，使用多克隆抗体，阳性率为年代，使用多克隆抗体，阳性率为938%： nYonemura Y, et al. Cancer Res 1991; 51: 10341038.nIshida T, et al. Scand J Immunol 1994; 39: 459466.nTokunaga A, et al. Cancer 1995;75: 14181425.n近年来，使用单克隆抗体近年来，使用单克隆抗体(eg, HercepTest) ，阳性率集，阳性率集中在中在1040%，平均近，平均近20%。胃癌中胃癌中HER2表达的检测方法：表达的检测方法：IHCn近年来开展了近年来开展了CISH和和

20、FISH的方法：的方法：胃癌中胃癌中HER2表达的检测方法：表达的检测方法：CISH/FISHIHC与与FISH/CISH检测检测符合率较高符合率较高Liang Z et al. BMC Cancer 2008, 8:363IHC仍可能作为仍可能作为HER2相关相关靶向治疗的患者初步筛选靶向治疗的患者初步筛选检查。检查。中华消化杂志中华消化杂志 2006年年 第第26卷卷 第第10期期 n前瞻性研究中前瞻性研究中HER2/neu蛋白蛋白CISH和和IHC检测结果符合率为检测结果符合率为89.2%。中国的研究中国的研究-O485试剂盒检测胃癌中试剂盒检测胃癌中HER2的表达的表达中华消化杂志中华

21、消化杂志 2006年年 第第26卷卷 第第10期期 n回顾性研究回顾性研究中中HER2/neu蛋白蛋白CISH和和IHC检测结果符合率为检测结果符合率为77.0%。中国的研究中国的研究O485试剂盒检测胃癌中试剂盒检测胃癌中HER2的表达的表达汇总后汇总后HER2/neu蛋白蛋白CISH和和IHC检测结果检测结果符合率为符合率为77.0%。胃癌中胃癌中HER2/neu基因扩增和蛋白表达的多中心研究基因扩增和蛋白表达的多中心研究. 中华消化杂志中华消化杂志, 2006, 6(10):657660.中国的研究中国的研究-O485试剂盒检测胃癌中试剂盒检测胃癌中HER2的的表达表达 回顾性、前瞻性研

22、究及汇总后总病例中回顾性、前瞻性研究及汇总后总病例中HER2 IHC评分评分+的病例的病例CISH基因扩增符合率均基因扩增符合率均90%。 中国的研究中国的研究O485试剂盒检测胃癌中试剂盒检测胃癌中HER2的的表达表达 目前尚无公认统一的针对胃癌建立的目前尚无公认统一的针对胃癌建立的HER2 IHC阳性评判标准阳性评判标准胃癌胃癌HER2免疫组化评分标准的初步探讨免疫组化评分标准的初步探讨ToGA研究评研究评分标准来源分标准来源（一）材料与方法（一）材料与方法n病例：不同种族病例：不同种族人群的人群的168例例 胃癌或食道胃交胃癌或食道胃交界腺癌手术标本界腺癌手术标本n组织学采用组织学采用L

23、auren分型分型（一）材料与方法（一）材料与方法n标本：中性福尔马林固定，石蜡包埋标本：中性福尔马林固定，石蜡包埋nIHC： nHercepTest（DAKO）n判断标准：参照乳腺癌，判断标准：参照乳腺癌，DAKO, 10%nFISH：nHER2 FISH pharmDx (DAKO)n判断标准：参照乳腺癌，判断标准：参照乳腺癌， DAKO, HER2/CEP172%（二）结果分析（二）结果分析nIHC和和FISH 符合率达符合率达93.5%，与乳腺癌的相应，与乳腺癌的相应符合率（符合率（82100%）接近）接近11例例FISH+/IHC 02+ 病例分析病例分析n按按HER2染色强度、膜染

24、色强度、膜染色完整性和被染色细染色完整性和被染色细胞的比例分别分析所有胞的比例分别分析所有病例的病例的IHC结果，并与结果，并与FISH对照列表对照列表n肿瘤异质性（染色细胞肿瘤异质性（染色细胞比例）？比例）？n基底侧面型表达（不完基底侧面型表达（不完整膜阳性）？整膜阳性）？肿瘤异质性肿瘤异质性n胃腺癌肿瘤异质性胃腺癌肿瘤异质性(4.8%)： 比乳腺癌更常见比乳腺癌更常见(1.4%)n对胃镜活检标本可能对胃镜活检标本可能的影响的影响n强阳性细胞比例强阳性细胞比例10%是否视为是否视为IHC3+？肠型印戒细胞型高度扩增不扩增胃癌中肿瘤异质性更常见胃癌中肿瘤异质性更常见基底侧面型表达基底侧面型表达

25、n部分胃癌，尤其低级别者，部分胃癌，尤其低级别者，仍可见腺上皮的极性分布，仍可见腺上皮的极性分布，腔面的瘤细胞保留分泌功腔面的瘤细胞保留分泌功能而不被标记染色，形成能而不被标记染色，形成U型（基底和侧面）不完型（基底和侧面）不完整膜染色整膜染色n胃癌腺腔形成更多见，故胃癌腺腔形成更多见，故此现象比乳腺癌多见此现象比乳腺癌多见n此型表达是否应相当于乳此型表达是否应相当于乳腺癌的完整膜阳性？腺癌的完整膜阳性？用用IHC法处法处理腺癌细胞，膜染色不完全理腺癌细胞，膜染色不完全乳腺癌与胃乳腺癌与胃癌癌HER2检测的不检测的不同点同点n由于胃癌及乳腺癌病理组织的差别，对胃癌由于胃癌及乳腺癌病理组织的差别

26、，对胃癌HER2的评分系统需要进的评分系统需要进行修正行修正胃癌中肿瘤异质性更常见用IHC法处理腺癌细胞，外膜染色不完全Hofmann M, et al. Histopathology 2008; 52:797805.（三）结论（三）结论 HER2的乳腺癌的乳腺癌IHC评分标准基本可用于胃评分标准基本可用于胃腺癌的评判，腺癌的评判，但鉴于肿瘤异质性和分化好的腺腔结构导但鉴于肿瘤异质性和分化好的腺腔结构导致致HER2不完整膜表达在胃癌更常见，不完整膜表达在胃癌更常见，故需作适当调整。故需作适当调整。图片来自 TARGOSIHC 阴性阴性 (0)不染色或不染色或 10% 的细胞膜染色较浅或仅有部分

27、膜染色的细胞膜染色较浅或仅有部分膜染色IHC 可疑可疑 (2+)10%的细胞膜或外膜的细胞膜或外膜轻到中度染色轻到中度染色 IHC 阳性阳性 (3+)在以下细胞膜或外膜中高度染色在以下细胞膜或外膜中高度染色切除标本中切除标本中10% 的细胞的细胞IHC 3+ 的活检标本的活检标本胃癌胃癌HER2 的的IHC评分标准（推荐评分标准（推荐）ToGA 研究中研究中54.6% FISH阳性阳性胃癌胃癌HER2 的的IHC评分标准（推荐评分标准（推荐）n与乳腺癌不同，在胃癌标准中，与乳腺癌不同，在胃癌标准中，IHC 2+ 或或IHC 3+不需要完全的细胞膜染色不需要完全的细胞膜染色，在胃癌中，在胃癌中U形染色形染色(即部分细胞外膜中、高度染色即部分细胞外膜中、高度染色) 即为阳即为阳性。性。n另一项重要的修正即在另一项重要的修正即在活检标本的分析中取消活检标本的分析中取消了细胞染色百分比的临界值。了细胞染色百分比的临界值