器官保存技术新进展1017

1、器官保存技术新进展器官保存技术发展概览理想的保存技术评论保存时间更长的保存时间可带来的优势：更好的受者配型，更长的转运距离，更佳的受者准备，精力更充沛的手术团队减少缺血损伤尽可能减少器官获取前及器官获取时的损伤；器官复苏移植评估/可行性评估在移植前评估器官功能，以减少因不确定移植后移植物功能而造成的不必要的丢弃；消除器官评估的“主观性”干预保存期间的干预包括：药物治疗以改善移植物功能，移植物或受者基因靶向治疗，免疫调节实用性保存技术对器官获取团队具有实用性；尽量减少不稳定供者或心脏死亡后器官捐献的准备时间可控性设备易于控制、移动，最好可在供者准备介导到移植中心全程使用安全性减小保护技术及相关保

2、护设备的内在风险Transplantation Reviews 26 (2012) 156162. (ref 1)器官保存方法分类单纯冷藏Simple Cold Storage，SCS 主要的器官保存方式机械灌注Machine Perfusion，MP 低温机械灌注 亚低温机械灌注 常温机械灌注中华移植杂志（电子版）.2011,5(3):41-44. (ref 2)SCS不能满足当前器官保存需求 单纯低温保存（SCS）技术简单，易于操作。 SCS是目前最主要的器官保存方式。然而： 供者死亡和器官保存的持续损伤不可逆转 冷保存本身可导致时间依赖的缺血损伤 移植前无法评估器官功能 保存时间非常有限

3、Transplantation Reviews 26 (2012) 156162.(ref 1)中华移植杂志（电子版）.2011,5(3):41-44. (ref 2)机械灌注的出现与应用 1968年，Folker O.Belzer首次报道应用持续低温灌注保存肾脏并成功实行肾移植的成功案例 1970年代低温机械关注主要用于美国欧洲移植中心，用于肾脏保护和转运 随后，不同的灌注机械被研制，用于临床Matsuno, N., K. Uchida, and H. Furukawa, Transplant Proc, 2014. 46(4): p. 1099-103.(ref 3)机械灌注的常用技术机械

4、灌注低温机械灌注亚常温机械灌注常温机械灌注（0-4）（20-30）（37）中华移植杂志（电子版）.2011,5(3):41-44. (ref 2)与SCS相比，低温机械灌注受者肝功能更好Guarrera JV, Henry SD, Samstein B, et al. Am J Transplant 2010;10(2):372e81.(ref 4)纳入20例供肝经低温机械灌注保存的肝移植受者，并将同期20例供肝经SCS保存的受者作为对照组，评估低温机械灌注与冷保存对肝移植受者肝肾功能的影响。与SCS相比，亚低机械温灌注保存显著减少肝脏损伤Gringeri, E., et al. Transp

5、lant Proc, 2012. 44(7): p. 2026-8.(ref 5)MP vs CS ,p0.0001MP vs CS ,p0.000110例供猪肝脏分别经Celsior静态冷保存或亚低温（20）灌注保存6小时。后经供者血再灌注2小时以模拟移植过程，再灌注后30分钟、60分钟、2小时测定供肝功能。低温机械灌注仍有不足Matsuno, N., K. Uchida, and H. Furukawa, Transplant Proc, 2014. 46(4): p. 1099-103.(ref 3)中华移植杂志(电子版）.2007,1(1). (ref 6)细胞水肿细胞间隙水肿细胞内酸

6、化再灌注损伤钙超载血管内皮损伤能量物质缺乏即使短时间的冷保存后恢复常温，也会导致DCD供肝的肝细胞、Kupffer细胞及内皮细胞的损伤常温机械灌注的优势常温灌注可评估移植物功能延长保存时间保存期间可进行药物干预基因治疗可与常温循环相结合改善细胞能量代谢，减少组织损伤，改善移植后肝脏功能Matsuno, N., K. Uchida, and H. Furukawa, Transplant Proc, 2014. 46(4): p. 1099-103.(ref 3)Transplantation Reviews 26 (2012) 156162.(ref 1)37下行机械灌注有效保护供肝功能Bes

7、sems M, Doorschodt BM, Albers PS,et al. Liver Int. 2006.26(7):880-8. (ref 7) *P0.05 vs 37获取心脏死亡后小鼠供肝，热缺血30分钟后采用Polysol液在4、18、37（每组6只小鼠）下行机械灌注，比较不同温度下行机械灌注对供肝功能的影响。常温机械灌注模式图供肝常温供血氧合灌注循环：在常温灌注前管道中需用供血预充。预充血经门静脉（图中数字3）流入肝脏，通过腔静脉（图中数字7）进入离心泵（P），经离心泵（P）离心后流入氧合器（O），经氧合后的血一部分经肝动脉（图中数字1）进入肝脏，另一部分经心脏交换器（HE）交

8、换后再次通过门静脉进入肝脏形成供肝常温供血氧合灌注循环。旁路循环：经24小时的热保存后，肝动脉（数字1）、门静脉（数字3）夹闭，冷冲洗液（数字2、5）开放，流出液经腔静脉通路（数字7）进入离心泵。此时旁路循环开放（图中数字4和8）。再次灌注时，肝脏经供血、冷冲液灌注，流出液经图中数字6所示的通道排出循环外。此时门静脉（数字3）和肝动脉（数字1）处开放，并将旁路循环（数字4、8）关闭。Imber CJ, et al. Transplantation. 2002;73(5):701-709.(ref 8)常温机械灌注在肝移植中的应用动物研究显示，常温机械灌注显著改善肝脏合成功能通过标准方法（与人体

9、获取方法相同）获取3050kg大白猪的肝脏。获取的肝脏分别经UW液低温保存（n=5）或在体温下经供猪血氧合灌注保存（n=5）24小时。在24小时的再灌注阶段检测两组供肝的合成功能、代谢功能、血流动力学及再灌注损伤的标记物。xp0.05Imber CJ, et al. Transplantation. 2002;73(5):701-709.(ref 8)动物研究显示，常温机械灌注显著改善移植物肝功能通过标准方法（与人体获取方法相同）获取3050kg大白猪的肝脏。获取的肝脏分别经UW液低温保存（n=5）或在体温下经供猪血氧合灌注保存（n=5）24小时。在24小时的再灌注阶段检测两组供肝的合成功能、

10、代谢功能、血流动力学及再灌注损伤的标记物。xp0.05与经UW液单纯低温保存相比，常温下供血氧合灌注是一种更好的供肝保存方法。此外，通过该灌注方法可在移植前进行移植物功能的评估。Imber CJ, et al. Transplantation. 2002;73(5):701-709.(ref 8)动物研究显示，常温机械灌注可改善肝移植物血流动力学Liu Q,et al. Liver Transpl. 2014 May 8. doi: 10.1002/lt.23906. (ref 9)再灌注后时间（小时）再灌注后时间（小时）门静脉血流量肝动脉血流量*P0.05*P0.05热缺血60分钟后的供肝分

11、别经冷保存（CS组，n=5）或常温供血机械灌注保存（NMP组，n=5）10小时，然后在独立灌注系统中经全血再灌注24小时以模拟移植过程。评估NMP与CS对供肝血流动力学及肝内胆管组织学的影响。动物研究显示，常温机械灌注可改善胆管上皮细胞再生能力热缺血60分钟后的供肝分别经冷保存（CS组，n=5）或常温供血机械灌注保存（NMP组，n=5）10小时，然后在独立灌注系统中经全血再灌注24小时以模拟移植过程。评估NMP与CS对供肝血流动力学及肝内胆管组织学的影响。常温机械灌注显著降低胆管组织学损伤评分胆管组织学损伤评分常温机械灌注组供肝出现肝外胆管上皮细胞再生单纯冷保存组常温机械灌注组NMP作为更好的

12、器官保存方法，可改善缺血事件后的胆管上皮细胞再生，从而可能预防临床移植中的缺血性胆道病变。Liu Q,et al. Liver Transpl. 2014 May 8. doi: 10.1002/lt.23906. (ref 9)ILTS2014最新研究报道：常温机械灌注显著改善肝移植受者早期肝功能NMP技术最早由牛津技术最早由牛津大学研发，现已由实大学研发，现已由实验室开始走向临床，验室开始走向临床，已完成已完成I期临床试验，期临床试验，即将开始即将开始II期临床试验。期临床试验。常温机械灌注在供肝保存中的应用 期、非随机、前瞻性研究 2020例NMPNMP（常温机械灌注）供肝移植 评估NM

13、PNMP应用于肝移植的安全性及可行性 研究由以下机构合作执行： Kings College Hospital University Hospitals Birmingham University of Oxford常温机械灌注在供肝保存中的应用研究流程供肝分配给研究受者NMP组对照组传统肝移植流程设备及后台准备后台准备并于冷UW液中插管，供肝与移动灌注设备连接与设备相连的供肝转运至移植中心从设备上取下供肝并行肝移植供体所在点转运移植中心单纯冷藏保存NMP前供肝准备下腔静脉处理和插管NMP前供肝准备肝动脉、门静脉、胆管插管NMP设备准备灌注：灌注：肝素、前列环素、胆汁酸盐、胰岛素、肝素、前列环素

14、、胆汁酸盐、胰岛素、营养物质营养物质预充：预充： 500ml胶体液胶体液 3单位的符合交叉配型的袋装红细胞单位的符合交叉配型的袋装红细胞 葡萄糖酸钙、肝素、头孢呋辛、碳酸氢钠葡萄糖酸钙、肝素、头孢呋辛、碳酸氢钠使用NMP后的供肝供肝处于NMP下的时间NMP时间时间中位时间：中位时间：9.3小时小时I期临床研究显示NMP组AST显著改善结果NMP组对照组P值主要终点移植物天存活率 100（n=20）97.5(n=37)1.000次要终点原发性无功能0(n=0)0(n=0)1.000早期移植物失功15(n=3)22.5(n=9)0.734天内峰浓度，（），中位数（范围）417(84-4681)902(218-8786)0.034重症监护时间（天），中位数（范围3(1-8)3(1-41)0.459住院时间（天），中位数（范围12(6-34)14(8-88)0.100天死亡率0(n=0)2.5(n=1)1.000个月存活率100(n=20)97.5(n=39)1.000离体供肝常温灌注在供肝保存中的应用研究小结 I期临床研究的数据令人鼓舞，NMP组受者早期的肝功能指标得到显著改善。 在使用NMP的情况下，供肝的获取、保存和运输、移植等过程顺利，证实该技术具备可操作性。 更大样本的临床试