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文档简介
1、医院污水监测方法 细菌总数及粪大肠菌群的测定1. 采样时间在消毒后 1 小时,排放前进行采样2. 采样方法1)水样瓶采集前必须进行灭菌,并需保证在装运、保持过程中不受污染2)在采集水样时,先将出水口消毒,然后将水龙头完全打开,放水5-10mi n, 以排除管道内的贮水后再采水样。3)如果是经加氯处理的污水, 应按每 500ml 加%硫代硫酸钠 2ml 中和余氯, 终止余氯的杀 菌作 用。4)所才的水量为采样瓶容量的 80%左右,以便在检验时可以充分摇动水样。5)水样从采集到检验一般不超过 2h 如放冰箱保存,也应不超过 4h.3. 细菌总数的测定:细菌总数是指 1ml 水样在营养琼脂培养基中,
2、于 37 °C 培养 48h 后,所生长的细菌菌落数。 操作方 法:1)无菌操作吸取 10ml 充分混匀的水样注入盛有 90mln 灭菌蒸馏水的玻璃瓶中,混匀成 1:10 稀释 液。2)吸取 1:10 稀释液 1ml 注入盛有 9ml 灭菌水的试管中,混匀成 1:100 稀释液。3)用涂抹法或倾注法接种平皿。4)置 37C 培养 48h 后计数菌落数,报告 1ml 水样的细菌总数。4. 粪大肠菌群的检验方法 采用发酵法。步骤: 初发酵试验 平板分离 复发酵试验初发酵试验1) 将水样作 1:10 及 1:100 稀释2) 水样的接种 1 :1 00 稀释水样 (相当于原水样 1ml 原
3、水样 1ml 以上分别注入 10ml 普通浓度(单料)乳糖蛋白胨液中(内有倒管)。 原水样 10ml 注入 5ml3 倍浓缩(三料)乳糖蛋白胨液中(内有倒管) 如水样较清洁,再取原水样 10ml 注入 50ml3 倍浓缩乳糖蛋白胨液中,上述发酵 管置 44C, 24h 培养。平板分离 将产酸产气及只产酸不产气的发酵管,分别接种伊红美蓝培养基上,于37 C 培养 1824 小时,挑去深紫黑色、具有金属光泽的菌落(或紫黑色,不带或略带金属光泽的菌落;淡 紫红色、中 心色较深的菌落),进行涂片、染色、镜检。复发酵试验挑取镜检为革兰阴性无芽孢杆菌的典型菌落13 革,接种于一支单料乳糖发酵管内, 44C
4、培养 24h ,产酸产气即证实有大肠菌群存在。结果报告根据证实有大肠菌群存在的阳性管(瓶)数查表1 或表 2,报告没升水样中的粪大肠菌群 数。5、污水中沙门困、志贺困检验步骤:污水样品过滤、稀释、增菌处理:取 200ml 污水,用灭菌滤膜进行抽滤;用 100ml 二倍浓 度 SF (亚硒酸盐增菌液)把滤膜上截留的杂质洗脱倒灭菌三角烧瓶内,充分摇匀,置于 37C 培养 24格式: ZG-XJ-JL48h; 挑选可疑菌落接种于双糖 37C 培养 1824 小时。 鉴定:生化、血清学试验,检验结果报告一定体积样品中存在或不存在沙门 三、报告填写 编号:细菌总数检测报告样品名称:检测日期:生产日期:稀释度101001000菌落计数(CFU3503302802603238平均数(CFU结果(CFU检测人:审核人:编号:格式:ZG-
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