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文档简介
1、DNA的粗提取与鉴定基础巩固i.下列各项中不宜选作DNA提取的材料的是()A.洋葱表皮细胞C.人的成熟红细胞B.鲜豌豆种子D.鸡血细胞液解析:作为提取DNA的材料的首要条件是 DNA含量丰富,而哺乳动物成熟的红细胞无细胞核 所以不宜选作实验材料。答案:C2.DNA粗提取的实验中,若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是 ()A.利于DNA的溶解B.瓦解细胞膜C.分离DNA和蛋白质D.溶解蛋白质解析:洗涤剂是一种离子去污剂,能瓦解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是 NaCl,有 利于DNA的溶解。答案:B3.DNA粗提取的实验中,在破碎血细胞
2、时,要加入20 mL的蒸储水,其作用是()A.溶解DNAB.使血细胞破裂,DNA释放C.稀释血液,防止凝固D.有利于搅拌解析:一般用低渗溶液,如蒸储水,使细胞过度吸水而破裂,从而使细胞中的 DNA释放出来。答案:B4.在除去杂质时将滤液放在6075 C的恒温水浴箱中保温1015 min,这样做的目的是()A.使DNA变性B.使蛋白质变性C.使DNA和蛋白质变性D.分解蛋白质解析:大多数蛋白质不能忍受 6080 C的高温,而DNA在80 C以上才变性。在 6075 C的恒温水浴箱中保温1015 min,目的是使蛋白质变性,然后分离得到DNA。答案:B5.某同学用洋葱进行 DNA粗提取和鉴定实验,
3、下列操作错误的是()A.加入洗涤剂后,进行充分的研磨DNAB.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的C.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析:提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定量的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,A项错误;蛋白酶能够分解研磨液中的蛋白质以纯化DNA,B项正确;加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌,以防止因DNA断裂而不能形成絮状沉淀,C项正确;加入二苯胺试剂并摇匀后,沸水浴加 热5 min,以观察颜色是否变蓝,D项正确。答案:AI 6.在提取DNA的过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()A.不易破碎B.减少DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易刷洗解析
4、:DNA易吸附在玻璃上,造成DNA量的损失。答案:BL 7.(2018江苏高考)关于还原糖、蛋白质和 DNA的鉴定实验,下列叙述正确的是()A.在甘蔗茎的组织样液中加入双缩月尿试剂,温水浴后液体由蓝色变成砖红色B.在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂,液体由蓝色变成紫色C.提取DNA时,在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤并弃去滤液D.将DNA粗提物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂 沸水浴后液体由无色变成蓝色 解析:甘蔗富含蔗糖,蔗糖无还原性,双缩月尿试剂用于鉴定蛋白质,温水浴后不会发生颜色变化,A 项错误;大豆种子富含蛋白质,斐林试剂用于鉴定还原糖,两者混合不会发
5、生题述颜色变化,B项错误;在切碎的洋葱中加入适量的洗涤剂和食盐,食盐用于溶解DNA,过滤后应保留滤液,弃去黏稠物,C项错误;DNA粗提物溶于2mol/L NaCl溶液,加入二苯胺试剂,沸水浴加热,可观察到蓝 色,D项正确。答案:D8. DNA的粗提取与鉴定”实验中,A、B、C、D、E五个小组除下表中所列处理方法不同外 其他操作步骤均相同且正确 ,但实验结果却不同。组别实验 材料提取核物质时加入的溶 液去除杂质时加入的溶液DNA鉴 定时加 入的试剂A鸡血蒸储水体积分数为95%的酒精(25 C)F胺B菜花蒸储水体积分数为95%的酒精(冷却)双缩月尿C人血浆蒸储水体积分数为95%的酒精(冷却)F胺D
6、人血 细胞物质的量浓度为2 mol/L的 NaCl溶液物质的量浓度为 0.14 mol/L的NaCl溶液双缩月尿E鸡血蒸储水体积分数为95%的酒精溶液(冷却)F胺(1)实验材料选择错误的组别是 ,其原因(2)实验步骤(不包括实验材料)均正确,但得不到DNA的组别 是。(3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是 ;其中,蓝色较淡的是,其原因(4)B组实验不成功的最主要原因答案:(1)C、D人的血浆中没有细胞结构,人成熟的红细胞中没有细胞核,选用这些材料提取不 到DNA 或提取的 DNA 很少(2)C(3)A、E A 冷却的酒精溶液对 DNA的凝集效果较佳,该组使用的是25 C的酒精溶液(4)菜花细胞在蒸
7、储水中不能被破坏,得不到DNA(应采用研磨的方法) 能力提升匚1.在利用鸡血进行 DNA的粗提取与鉴定”的实验中,下列相关叙述正确的是()A.用蒸储水将NaCl溶液的物质的量浓度调至 0.14 mol/L,滤去析出物B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶 ,都可以去除部分杂质C.将丝状物溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同解析:当NaCl溶液的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最小,析出物中含有大量的DNA。将丝状DNA溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂并沸
8、水浴加热后呈蓝色。用菜花替代鸡血作实验材料,实验操作步骤不完全相同,处理菜花时,要加入洗涤 剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨。答案:BL 2.玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)显现的颜色分别是()A.黄色、紫色B.白色、醇红色C.白色、蓝色D.蓝色、醇红色解析:DNA在体积分数为95%的冷酒精中析出时的颜色为白色,DNA遇二苯胺(沸水浴)显现的颜色为蓝色。答案:CL 3.下列有关 DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液,可将DNA与蛋白质分离B.利用高温能使DNA变性,却对蛋白质没有任何影响的特性,可将DNA
9、与蛋白质分离C.利用DNA在物质的量浓度为 0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最大的特点,可将DNA与蛋 白质分离D.在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA与蛋白质分离解析:DNA不溶于酒精,而蛋白质等杂质溶于酒精,A项错误。蛋白质比DNA对温度的耐受性更 差,因此更容易变性,B项错误。DNA在物质的量浓度为 0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小 而蛋白质在该浓度的 NaCl溶液中溶解度较大,因此可将DNA与蛋白质分离,C项错误。嫩肉粉 中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解,而对DNA没有影响,因此,可将DNA与蛋白质分离,D项正确。答案:DJ 4.在DNA的
10、粗提取实验过程中,有两次DNA沉淀析出,其依据的原理是()DNA在物质的量浓度为 0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出A.两次都是B.两次都是C.第一次是,第二次是D.第一次是,第二次是解析:第一次沉淀析出是用浓NaCl溶液溶解核内DNA之后,加蒸储水稀释 NaCl溶液的物质的量浓度至0.14 mol/L,使DNA溶解度最低而析出;第二次沉淀析出是用冷酒精溶液使DNA凝集并溶解非DNA物质,达到提纯DNA的目的。答案:CJ 5.下列关于DNA粗提取和鉴定实验的操作及原理的叙述,正确的是()A.用蒸储水使家兔的红细胞涨破以获取含DNA的滤
11、液B.向菜花组织中加入蒸储水并搅拌可释放核DNAC.控制NaCl溶液的浓度可以实现去除杂质的目的D.DNA在酒精溶液中析出时,用玻璃棒轻缓搅拌可使析出的DNA量减少解析:DNA主要位于细胞核,哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,因此家兔的红细胞不能作为提取DNA的材料。菜花细胞为植物细胞,有细胞壁保护,加蒸储水不会吸水涨破。由于DNA和蛋白质等物质在 NaCl溶液中的溶解度不同,因此可以通过控制 NaCl溶液的浓度来去除杂质。DNA在酒精溶液中析出时,用玻璃棒轻缓搅拌,以便获得较完整的 DNA。答案:CL 6.将粗提取的DNA丝状物分别加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液、物质的量
12、浓度为2 mol/L的NaCl溶液、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液中,然后用放有纱布的漏斗过 滤,分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物 p、q、r淇中由于含DNA少可以丢弃 的是()A.P、Q、RB.p、q、rC.P、q、RD.p、Q、r解析:将粗提取的DNA丝状物加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中,DNA析出,过滤后DNA存在于纱布上(p),杂质存在于滤液(P)中;DNA丝状物加入物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,DNA溶解,过滤后DNA存在于滤液(Q)中,杂质(q)存在于纱布上;DNA丝状物加入 冷却的体积分数为 95%的酒精溶液中,DNA析出
13、,过滤后DNA存在于纱布上(r),杂质存在于滤液 (R)中。答案:CL 7.回答下列有关 DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。右上图为该实验过程中的一些重要操作示意图。怵里分班为析出较纯净 的钝状物1TD7A的该Na 口海液 AH蛙状物物质的处胱度 为 2nwl/L 的 |,- NaCl汨液被NaCl港液D(1)正确的操作顺序是 。(请用字母和箭头表示)(2)上图C、E步骤都加入蒸储水,但其目的不同,分别是和。上图A步骤中所用酒精必须是经过 的,该步骤的目的(4)为鉴定A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加 试剂后?水浴,如果出现则证明该丝状物的主要成分为DNA。解析:(1)图中A步骤
14、为往含DNA的浓NaCl溶液中加入体积分数为 95%的酒精溶液,目的是提 取较纯净的DNA。B步骤为单层纱布过滤,目的是获得含 DNA的滤液。C步骤为往鸡血细胞 液中添加蒸储水,目的是破碎细胞,释放核物质。D步骤为往物质的量浓度为2 mol/L NaCl溶液中加入DNA丝状物,目的是溶解DNA。E步骤为往含DNA的浓NaCl溶液中加入蒸储水,目的 是降低NaCl溶液的浓度,析出DNA。根据DNA粗提取的实验流程:破碎细胞(释放DNA) 一过 滤一溶解核内DNA 一过滤一析出DNA 一过滤一DNA再溶解一提取含杂质较少的 DNA。可以 判断正确的操作顺序为 C- B-E-D-A°(2)
15、C步骤为往鸡血细胞液中添加蒸储水,目的是破碎细胞,释放核物质。E步骤为往含DNA的浓NaCl溶液中加入蒸储水,目的是降低NaCl溶液的 浓度,析出DNA o (3)A步骤为往含DNA的浓NaCl溶液中加入体积分数为95%的酒精溶液,目的是提取较纯净的 DNA。因为DNA在冷却的酒精溶液中溶解度更低,因此需要将酒精溶液充分预冷后使用。(4)鉴定DNA可以利用二苯胺试剂,DNA与该试剂在沸水浴的条件下变蓝色。答案:(1)C-B一 E-D-A(2)加速细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出(3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA二苯胺蓝色L 8.某生物兴趣小组开展 DNA粗提取的相
16、关探究活动,具体步骤如下。材料处理:称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份,每份10 go剪碎后分成2组,一组置于20 C,另一组置于-20 C条件下,分别保存24 hoDNA粗提取:第一步,将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨,用两层纱布过滤,取滤液 备用;第二步,先向6只小烧杯中分别注入 10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液, 然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上;第三步,取6支试管,分别加入等量的物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入 4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加
17、热 5 min,待试管冷 却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:材料保存温度/C菜花辣椒蒜黄20+-20+(注:+”越多表示蓝色越深) 分析上述实验过程,回答下列问题。(1)该探究性实验课题名称(2)第二步中 缓缓地”搅拌,这是为了防止。根据实验结果,得出结论并分析。结论1:与20 C相比,相同实验材料在-20 C条件下保存,DNA的提取量较多。结论2: 针对结论1,请提出合理的解释:。氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进 一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是 然后用体积分数为 95%的冷酒精溶?使DNA析出。解析:(1)分析表格可知,实验目的在于探究材料和保存温度对DNA提取量的影响。
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