第六章 黄酮类化合物

1、第六章第六章 黄酮类化合物黄酮类化合物黄酮黄酮醇异黄酮查耳酮黄烷3-醇类花色素类橙酮类二氢黄酮二氢黄酮醇二氢异黄酮二氢查耳酮黄烷3、4-二醇类汕酮高异黄酮类OOABC1234567823465 芹菜素（5，7，4-三OH黄酮） 木犀草素（5，7，3，4-四OH黄酮） 黄芩素(5，6，7-三OH黄酮)23OO橙皮苷（5，7，3 - 三OH，4-OCH3二氢黄酮） 甘草苷（甘草素-7-O-glu苷） 甘草素（7，4 二OH二氢黄酮）黄酮黄酮二氢黄二氢黄酮酮23OOOH 山柰酚（5，7，4-三OH黄酮醇） 槲皮素（5，7，3，4-四OH黄酮醇） 杨梅素（5，7，3，4，5-五OH黄酮醇） 23OOO

2、H 二氢黄酮醇二氢黄酮醇二氢槲皮素（5，7，3，4-四OH二氢黄酮醇） 二氢桑色素（5，7，2，4-四OH二氢黄酮醇）23OO 大豆素（大豆素（7，4-二二OHOH异黄酮异黄酮） 大豆苷（大豆素大豆苷（大豆素-7-O-glc苷）苷） 葛根素（葛根素（7，4-二二OHOH，8-8- glc异黄酮异黄酮苷）苷）23OO紫檀素紫檀素鱼藤酮鱼藤酮二氢异黄二氢异黄酮酮异黄酮异黄酮2345623465OOHOOHOHOHOHOglc红花苷红花苷查耳酮查耳酮OOHOOHOHOHOglc梨根苷梨根苷二氢查耳酮二氢查耳酮OOH3OOHOHOHOHHHOH （+）儿茶素）儿茶素OOHOH34OOHOHOHOHOH

3、OHOH 无色飞燕草素无色飞燕草素黄烷黄烷-3，4-二醇二醇黄烷黄烷3-醇醇34OOCH256723456OOHOHOHOHOHOH+34OOH+ 飞燕草苷元橙酮橙酮花色素花色素硫磺菊素（6，3，4-三OH橙酮）OOOHOHOHOHglcOO异芒果素OO 高异黄高异黄酮酮双苯吡酮双苯吡酮OOHOOOHHHCH2OHHOCHOHOHOH3 木脂素黄酮木脂素黄酮（水飞蓟素）（水飞蓟素）一性状一性状 形态：多为结晶性固体，少数为无定形粉末。形态：多为结晶性固体，少数为无定形粉末。 颜色：多为黄色颜色：多为黄色交叉共轭体系（电子交叉共轭体系（电子转移、重排，共轭增转移、重排，共轭增强，产生颜色的基础）

4、强，产生颜色的基础） 助色团（给系统提供助色团（给系统提供电子，使颜色加深，电子，使颜色加深，尤其尤其7，4-位，辅助位，辅助作用）作用） 黄酮（灰黄黄酮（灰黄黄色）黄色） 二氢黄酮二氢黄酮黄酮醇（灰黄黄酮醇（灰黄黄色）黄色） 二氢黄酮醇二氢黄酮醇查耳酮（黄查耳酮（黄橙橙黄色）黄色） 二氢查耳酮二氢查耳酮 二氢异黄酮二氢异黄酮 黄烷醇类黄烷醇类 异黄酮（无或微黄色）异黄酮（无或微黄色）花色素类（颜色随花色素类（颜色随pH而改变而改变 红色（红色（pH 8.8.5）OOOOOO47+交叉共轭体系交叉共轭体系*OHOOOO2*OO二旋光性：二旋光性：一溶解性一溶解性: 符合苷的溶解性规律。但水溶性

5、与符合苷的溶解性规律。但水溶性与结构的平面性、取代基团的种类和数目结构的平面性、取代基团的种类和数目等有一定关系。等有一定关系。2OOHRH R=OH 二氢黄酮醇R=H 二氢黄酮（1）三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元（2）3 - O - 糖苷 7 - O - 糖苷（平面性分子）（3）花色素(平面性分子,离子型) 非平面性分子 平面性分子三三.黄酮苷黄酮苷(亲水性亲水性) 7，4-OH 7或4-OH 其他位-OH 5-OH NaHCO3 + - - - Na2CO3 + + - - NaOH + + + + 应用：应用：pHpH梯度法分离梯度法分离OOH+Cl2.碱性：碱性： -吡喃酮环吡喃酮环1-

6、氧原子氧原子 微弱碱性（孤对电子，接受质子）微弱碱性（孤对电子，接受质子） 仅溶于强的、浓酸仅溶于强的、浓酸+水水 （浓硫酸）（浓硫酸） 烊烊 盐（呈色）盐（呈色） 应用应用 初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇 黄黄橙色，并有荧光橙色，并有荧光 二氢黄酮二氢黄酮 橙红（冷）、紫红（热）橙红（冷）、紫红（热） 查耳酮查耳酮 橙红橙红洋红洋红 异黄酮（二氢）异黄酮（二氢） 黄色黄色 橙酮橙酮 红红洋红洋红五显色反应五显色反应 1还原显色反应还原显色反应反应类型反应类型 鉴别特征鉴别特征 鉴别意义鉴别意义 备注备注 盐酸盐酸-镁粉镁粉 黄酮、二氢黄酮、黄酮、二氢黄酮

7、、 红红紫红紫红 黄酮类特征性黄酮类特征性 假阳性假阳性 反应反应 黄酮醇、二氢黄酮醇黄酮醇、二氢黄酮醇 红红紫红紫红 鉴别反应鉴别反应 （花色素）（花色素） （最常用）（最常用） 查耳酮、橙酮、查耳酮、橙酮、 （-） 儿茶素类、异黄酮儿茶素类、异黄酮 （-） 四氢硼钠四氢硼钠 二氢黄酮、二氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇 红红紫红紫红 二氢黄酮类特有二氢黄酮类特有 还原反应还原反应 其它黄酮类其它黄酮类 （-） 钠汞齐反应钠汞齐反应 黄酮、二氢黄酮黄酮、二氢黄酮 红红 异黄酮、二氢异黄酮异黄酮、二氢异黄酮 红红 黄酮醇类黄酮醇类 黄黄淡红色淡红色 二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类 棕黄色棕黄色2.与金属

8、盐类试剂络合反应与金属盐类试剂络合反应反应类型反应类型 鉴别特征及鉴别意义鉴别特征及鉴别意义 备备 注注 锆盐 枸橼酸 锆盐锆盐-枸橼酸枸橼酸 3-OH或或3，5 -二二OH 黄色 黄色不褪 PPC(ZrOCl2) 5-OH 黄色褪去 示 氨性氯化锶(SrCl2) 邻二酚羟基邻二酚羟基 绿、棕乃至黑色沉淀 三氯化铁(FeCl3) 酚羟基酚羟基 紫、蓝、绿三氯化铝 3-OH，4-C=O 黄色 （AlCl3） 5-OH，4-C=O 鲜黄色荧光 PPCTLC 邻二酚羟基邻二酚羟基 （4或7，4黄酮醇，天蓝色荧光）3. 硼酸显色反应硼酸显色反应 硼酸硼酸 5 - 羟基，羟基，4 - 羰基黄酮羰基黄酮

9、黄色，绿色荧光（草酸液）黄色，绿色荧光（草酸液） （H3BO3） 6-羟基，羟基，4 - 羰基查耳酮羰基查耳酮 黄色，无荧光（枸橼酸）黄色，无荧光（枸橼酸）氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 黄酮黄酮 黄黄 橙色橙色 查耳酮、橙酮查耳酮、橙酮 红红 紫红紫红 二氢黄酮二氢黄酮 黄黄橙色（冷）橙色（冷） 深红深红 紫红紫红 （较长时间或加热）（较长时间或加热） 母核类型鉴别母核类型鉴别 稀氢氧化钠稀氢氧化钠 邻三酚羟基黄酮类邻三酚羟基黄酮类 暗绿暗绿蓝绿色纤维状蓝绿色纤维状 邻三酚羟基邻三酚羟基氨蒸气或碳酸钠溶液氨蒸气或碳酸钠溶液 颜色变化颜色变化 TLC、PPC五氯化锑五氯化锑 (SdCl5)： 查耳酮

10、特征性显色反应查耳酮特征性显色反应 (红或紫红色沉淀红或紫红色沉淀) 黄酮、二氢黄酮、黄酮醇类呈橙色。黄酮、二氢黄酮、黄酮醇类呈橙色。Gibb，s反应：酚羟基对位活泼质子的特征（蓝反应：酚羟基对位活泼质子的特征（蓝 或蓝绿色）或蓝绿色） 5与五氯化锑反应与五氯化锑反应6其他显色反应其他显色反应溶剂法关键: 溶剂的选择 溶剂选择依据: 黄酮类成分的存在状态 （游离、苷）及溶解性 提取方法选择依据: 溶剂的溶解性能 （煎煮法、渗漉法、回流法等） 溶剂 提取原理 游离黄酮 黄酮苷 备 注 乙醇 溶解范围广 + + （甲醇） 苷、苷元均可溶 （9095%） ( 60%） 甲醇毒性大沸水 多糖苷易于水

11、+ 成本低、安全,水溶性杂质多 碱性水或 稀氢氧化钠溶出能力强 碱性乙醇 酚羟基的酸性 + + 石灰水除杂质效果好黄酮类化合物的提取黄酮类化合物的提取二二.分离方法分离方法（一）溶剂萃取法（一）溶剂萃取法 黄酮与杂质黄酮与杂质 分离依据：成分之间分离依据：成分之间 苷与苷元苷与苷元 之间的极性（分配系数之间的极性（分配系数K）差异）差异 苷元与苷元苷元与苷元 分离工艺：分离工艺： 原料的提取浓缩液（水溶液）原料的提取浓缩液（水溶液） 依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取 石油醚液石油醚液 乙醚液乙醚液 乙酸乙酯乙酸乙酯 水饱和正丁醇水饱和

12、正丁醇 母液母液（脂溶性杂质）（脂溶性杂质） 回收回收 回收回收 减压回收减压回收 （水溶性杂质（水溶性杂质) 苷元苷元 单糖苷单糖苷 多糖苷多糖苷 （二）（二）pH梯度萃取法梯度萃取法 分离依据：游离黄酮类化合物的酸性差异分离依据：游离黄酮类化合物的酸性差异 分离工艺：总游离黄酮的乙醚液分离工艺：总游离黄酮的乙醚液 依次以依次以5%NaHCO3 、5%Na2CO3、0.2 % NaOH、 4% NaOH萃取萃取 5%NaHCO3液液 5%Na2CO3液液 0.2 % NaOH液液 4% NaOH液液 母液母液 酸化酸化 （脂溶性杂质）（脂溶性杂质）7，4-OH黄酮黄酮 7或或4-OH黄酮黄酮

13、 一般一般-OH黄酮黄酮 5-OH黄酮黄酮（三）柱色谱法（三）柱色谱法 吸附原理 异黄酮、二氢黄酮（醇）、 氯仿-甲醇不同比例（105，活化） 高度甲基化或乙酰化黄酮（醇） 混合溶剂洗脱 （极性小）分配原理 多羟基黄酮醇或黄酮苷类 氯仿-甲醇-水 （加水失活或不活化） （极性大） （80 ：20 ：1）等比例1硅胶柱色谱硅胶柱色谱2氧化铝柱色谱（少）氧化铝柱色谱（少） 具有3-OH或5-OH 、4-羰基及邻二酚羟基黄酮类化合物与铝离子络和而被牢固吸附，难于洗脱。2聚酰胺色谱聚酰胺色谱（氢键吸附）（氢键吸附）洗脱规律：与吸附规律正好相反，即吸附能力越强，越难洗脱洗脱规律：与吸附规律正好相反，即吸

14、附能力越强，越难洗脱 聚酰胺聚酰胺“双重色谱双重色谱”原理原理 正相色谱正相色谱 反相色谱反相色谱聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团） 非极性固定相（非极性脂肪链）洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小） 含水溶剂（甲醇-水，极性大） 先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小） 苷（极性大）（柱色谱分离） Rf值： 苷元 苷 苷元 双糖苷 单糖苷 苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黄酮 4 . 葡聚糖凝胶柱色谱葡聚糖凝胶柱色谱“双重色谱双重色谱”原理原理常用洗脱剂：常用洗脱剂： 碱水（碱水（0.1mol / L NH3.H2O） 盐水（盐水（0.5mol / L NaCl） 醇或醇水不

15、同比例。醇或醇水不同比例。 应用：适用于各种黄酮类化合物的分离应用：适用于各种黄酮类化合物的分离 原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大）原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大） 固定相：固定相：ODS 流动相：水流动相：水-乙晴，水与甲醇不同比例乙晴，水与甲醇不同比例6高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC）双相色谱双相色谱 第I向 醇性展开剂 第II向 水性展开剂（BAW、TBA、水饱和正丁醇） （28%HAc、3%NaCl、1%HCl） 正相色谱正相色谱 反相色谱反相色谱固定相（水）极性 流动相 （ *有认为是吸附原理）？Rf规律：极性小的化合物Rf大 极性大的化合物Rf大 苷元（0.7以

16、上） 单糖苷 双糖苷（0.7以下） 苷元中，平面型分子 非平面型分子 Rf规律与左边相反 母核相同，2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黄酮 苷元的分离鉴别 黄酮苷及花色素类 PPC色谱1硅胶薄层色谱 极性较小的黄酮类化合物（黄酮苷元）2聚酰胺薄层色谱 可用于黄酮苷及游离黄酮的分离 鉴别，其色谱行为可参考聚酰胺柱色谱。3纤维素薄层色谱分配原理，其色谱行为可参考纸色谱。 （二）薄层色谱（二）薄层色谱（TLC） 各种色谱的检识：各种色谱的检识： 日光下观察多数黄酮有黄色斑点 紫外光下观察多数黄酮呈黄绿色荧光斑点 氨蒸气熏多数黄酮有颜色变化 喷显色剂（2%AlCl3甲醇液）多数黄酮黄色变深，荧光

17、加强 黄酮（醇）： 带 II、带I均强母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、 带I弱 母核的推断母核的推断 （甲醇） 查耳酮、橙酮：带 II弱、带I强 依红移规律推断取代基团依红移规律推断取代基团取代基：OH等，为助色团 甲醇钠：强碱，所有酚羟基解离 醋酸钠：碱性弱，酸性强的酚羟基解离 加入诊断试剂 醋酸钠/硼酸：邻二酚羟基络和 相应吸收峰红移 三氯化铝：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 络和 邻二酚羟基OOROOROOR+黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征 苯甲酰系统苯甲酰系统 桂皮酰系统桂皮酰系统（带（带II 220280nm） （带（带1 3

18、00400nm） 黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系OOBOORAB 二氢黄酮（醇） 异黄酮（二氢） （由（由B环产生的桂皮酰系统不存在，带环产生的桂皮酰系统不存在，带I弱，带弱，带II强）强） 黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征黄酮类化合物母核黄酮类化合物母核UV吸收特征吸收特征 母核类型母核类型 带带II （nm） 带带I （nm） 备注备注黄酮 250280（强） 304350（强） 典型的交叉共轭系统黄酮醇（3-OH取代） 328357（强） 3-OH供电减弱，使黄酮黄酮醇（3-OH游离） 358385（强） 3-OH供电共轭

19、，带1红移 异黄酮 245278（强） ( sh ) 桂皮酰系统破坏 二氢黄酮（醇） 270295（强） ( sh )查耳酮 220270（弱） 340390（强）橙酮 230270（弱） 370430（强） 花青素（苷） 270280 465560（可见区） 黄酮黄酮 、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带I、带、带II）的位移规律）的位移规律诊断试剂诊断试剂 位移规律位移规律 归归 属属 NaOMe 带I红移4060nm，强度不降 示有4-OH 带I红移5060 nm，强度下降 示有3-OH、但无4-OHNaOAc 带II红移520nm 示有7-OH2.加入诊断试

20、剂后引起的位移及其在结构测定中的意义加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义 NaOAc / H3BO3 带I红移1230nm 示B环有邻二酚羟基 带II红移510nm 示A环有邻二酚羟基 （不包括5，6-邻二酚羟基） 诊断试剂 位移规律 归 属AlCl3 及AlCl3/HCl AlCl3/HCl谱图 = AlCl3谱图 示无邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 AlCl3谱图 示有邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱较AlCl3谱 带I紫移3040 nm 示B环有邻二酚羟基 若紫移20 nm 示B环有邻三酚羟基 带带I紫移5065 nm 示A、B环均可能有邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图

21、= MeOH谱图 示无3-及/或5-OH无邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 MeOH谱图 示可能有3-及/或5-OH 带带I红移3555 nm 示只有5-OH 无3-OH 仅红移1720 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代红移5060nm 示可能有3-OH及5-OH 异黄酮、二氢黄酮（醇）的吸收峰（带异黄酮、二氢黄酮（醇）的吸收峰（带II）位移规律）位移规律NaOAc 异黄酮 带带II红移620nm 示有7-OH 二氢黄酮（醇） 带带II红移3437nm 示有5，7-二OH 带带II红移5158nm 示有7-二OHAlCl3/HCl AlCl3/HCl谱图与甲醇中的谱图比较谱图与甲醇中的

22、谱图比较 异黄酮异黄酮 带带II红移红移1014nm 示有示有5-OH 二氢黄酮（醇）二氢黄酮（醇） 带带II红移红移2026nm 示有示有5-OH 诊断试剂 位移规律 归 属查耳酮、橙酮的吸收峰（查耳酮、橙酮的吸收峰（ 带带I ）位移规律）位移规律 NaOMe 查耳酮 带带I红移60100nm，强度增加 示有4-OH 带带I红移60100nm，强度不增加 示有2-或4-OH 橙酮 带带I红移7095nm， 示有或6-OH AlCl3 及AlCl3/HCl 查耳酮、橙酮 （ AlCl3较 AlCl3/HCl谱图） 带带I 红移4070nm 示有B-环邻二酚羟基 查耳酮（ AlCl3/HCl谱图

23、较MeOH谱图） 带带I 红移4060nm 示有2- OH诊断试剂 位移规律 归 属A 环质子环质子 B环质子环质子 C环质子环质子 糖上质子糖上质子 取代基团质子取代基团质子 芳环质子芳环质子 芳环质子芳环质子 与类型有关与类型有关 端基质子端基质子 -OH、-CH3、 其它质子其它质子 -OCH3、-OCOCH3 黄酮类化合物各质子的信号特征（黄酮类化合物各质子的信号特征（、峰形状、峰形状、J、峰面积）、峰面积）66 8ppm 8ppm，B-HB-H位于较低场位于较低场5-H5-H最大最大8.0ppm8.0ppm（羰基去屏蔽）（羰基去屏蔽）A-HA-H 5.7 5.77.9 5-OH 12

24、.40 (12.99) 7.9 5-OH 12.40 (12.99) B-H 6.5 7.9 7-OH 10.93 J邻邻 6 9Hz 3-OH 9.709.70J间间 2 3 Hz 4-OH (10.01)(10.01)J对对 0 1 Hz（不计）（不计） 3-OH (9.42)(9.42)峰形状及峰形状及J与取代有关与取代有关 -OCH33.5 3.5 4.10(3H s)4.10(3H s) 6-CH32.042.27(3H s) 8-CH32.142.142.45(3H s)2.45(3H s)A-环环 B-环环 -OCOCH3 (羟基乙酰化羟基乙酰化)5，7-二二OH 4- 氧取代氧

25、取代 糖上糖上1.651.652.10(3H s)2.10(3H s)7-OH取代取代 3，4- 氧取代氧取代 苷元苷元2.302.302.50(3H s)2.50(3H s) 3，4，5- 氧取代 gluglu H-1 位于低场 较大4.85.70ppm 依依、峰形（、峰形（d、dd）、）、J 苷元苷元-3-O-glu 5.805.80左右（左右（1H.d.1H.d.） J J与构型有关与构型有关Jaa=6Jaa=69Hz9Hz， Jae=2Jae=23 3A、B-环取代方式推断环取代方式推断 苷元苷元-5、7、4-O-glu 5.0左右左右 rha C-CH3 0.8 0.8 1.20 (

26、 d/m ) 1.20 ( d/m )黄酮黄酮 H-3 6.306.30（1H，s）黄酮醇黄酮醇 C-环无质子环无质子异黄酮异黄酮 H-2 7.6 7.6 7.807.80（1H，s）受受1-氧原子和氧原子和4-羰基吸电影羰基吸电影 响响,较大较大二氢黄酮二氢黄酮 H-2 中心中心5.2(1H,dd.Jaa =11.0Hz, Jae = 5.0Hz)5.2(1H,dd.Jaa =11.0Hz, Jae = 5.0Hz) 两个两个H-3 H-3 中心中心2.8 (1H,dd.J2.8 (1H,dd.J偕偕 = =17.0Hz,17.0Hz, Jaa =11.0Hz) Jaa =11.0Hz) (

27、1H,dd.J (1H,dd.J偕偕 = = 17.0Hz, Jae = 5.0Hz) 17.0Hz, Jae = 5.0Hz) 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 H-2 4.84.85.0.0（1H，d. Jaa= 11.0Hz） H-3 4.14.1 4.3.3（1H，d. Jaa=11.0Hz） 查耳酮查耳酮 H-a 6.7 a 6.7 7.40 (1H,d.J 7.40 (1H,d.J反反=17.0Hz)=17.0Hz) H- 7.0 7.0 7.70 (1H,d.J 7.70 (1H,d.J反反=17.0Hz)=17.0Hz) 橙酮橙酮 =CH 6.5 6.5 6.70.70（1H，s） 黄黄

28、酮酮 黄黄 酮酮 醇醇 异异 黄黄 酮酮 橙橙 酮酮OOHCOOOHCOOHC3223OOCH324564567CC2332C23OOHHHOOHOHHOHH45626a二二 氢氢 黄黄 酮酮 二二 氢氢 黄黄 酮酮 醇醇 查查 耳耳 酮酮 OOOHOROOOHOHOHHABCOH5AOHOHA67857OR23564OROR23564OROROR235641BBBCH2OH B-H 6. 57. 9ppm, 位于较低场位于较低场 26-H 大大(2H,d. 8.0Hz) 35-H小小(2H,d. 8.0Hz) 2-H7.20(1H,d.2.0Hz)-H7.20(1H,d.2.0Hz) （1）

29、 （2） 5-H6.7-H6.7 7.1(d.8.0Hz)7.1(d.8.0Hz)（1）A-H 6. 3 7. 1 ppm（一（一-OH供电）供电） 6-H7.9(dd.2.0;8.0Hz)-H7.9(dd.2.0;8.0Hz) 5-H 8. 0 (1H,d. J=8.0Hz) * 3、4-OR取代不同，取代不同， 6-H (1H,dd, J=8. 0;2. 0Hz) -2、6可能颠倒可能颠倒 8-H (1H,d, J=2. 0Hz) （2） A-H 5. 7 6. 9 ppm (二二-OH供电供电) 26-H 6.57.5 (2H,s) 6-H 较小较小 (1H,d. J=2. 5Hz) 或

30、分别以双峰（或分别以双峰（J=2.0Hz） 8-H 较大较大 (1H,d. J=2. 5Hz) 出现出现取代基团取代基团三三13C-NMR谱在黄酮类化合物结构研究中的应用谱在黄酮类化合物结构研究中的应用 推断黄酮类化合物的骨架类型推断黄酮类化合物的骨架类型 （一）黄酮类化合物骨架类型的判断（一）黄酮类化合物骨架类型的判断 利用13C-NMR谱中黄酮类化合物的中央三个碳核信号的位置以及它们在偏共振去偶谱中的裂分情况 13C-NMR谱中黄酮类化合物结构中的中央三碳核的信号特征谱中黄酮类化合物结构中的中央三碳核的信号特征 C=O C-2（或（或C-） C-3（或（或C-a a） 归属归属 174.5

31、184.0 (s) 160.5163.2 (s) 104.7111.8 (d) 黄酮类黄酮类 149.8155.4 (d) 122.3125.9 (s) 异黄酮类异黄酮类 147.9 (s) 136.0 (s ) 黄酮醇类黄酮醇类 182.5182.7(s) 146.1147.7(s) 111.6111.9 (d) 橙酮类橙酮类 ( =CH- )188.0197.0 (s) 136.9145.4 (d) 116.6128.1(d) 查耳酮类查耳酮类 75.080.3 (d) 42.844.6 (t) 二氢黄酮类二氢黄酮类 82.7(d) 71.2 (d) 二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类178.416

32、3.2153.6133.7129.0126.3OO131.8131.6125.2125.7124.0118.1107.6129.0126.3（二）黄酮类化合物取代图式的确定（二）黄酮类化合物取代图式的确定 利用黄酮类化合物中芳香碳原子 （A-环碳原子、B-环碳原子）的信号特征 确定取代基的取代图式黄酮母核黄酮母核13C-NMR信号归属信号归属推断取代基（推断取代基（X）的连接位置）的连接位置 依取代基的位移效应规律依取代基的位移效应规律 ( B-环环) X Zi Zo Zm Zp -OH +26.0 -12.8 +1.6 -7.1 -OCH3 +31.4 -14.4 +1.0 -7.8确定确定

33、5，7-二二OH取代黄酮图式取代黄酮图式 依依5，7-二二OH黄酮中的黄酮中的C6和和C8信号特征信号特征 90100ppm范围内范围内 C6 C8 确定糖与苷元的连接位置确定糖与苷元的连接位置 依苷化位移规律依苷化位移规律 苷元（酚羟基）：苷元（酚羟基）： a a-C移向高场，移向高场，降低降低 邻、对位邻、对位-C-C移向低场，移向低场，增大增大 糖（酚苷）：糖（酚苷）： 端基碳原子端基碳原子+4.0 6.0ppm四四MS在黄酮类化合物结构研究中的应用在黄酮类化合物结构研究中的应用M + . M + . 黄酮类化合物黄酮类化合物MS特征特征 测定分子量（测定分子量（M+） 取代基团推断（碎

34、片离子峰）取代基团推断（碎片离子峰）苷元（极性小）苷元（极性小） 苷（极性大、难气化、与热不稳定）苷（极性大、难气化、与热不稳定） EI-MS（以前）：苷看不到（以前）：苷看不到,须制备成衍生物（须制备成衍生物（PM等）方能测得很弱的等）方能测得很弱的 方能测得很弱的苷元峰为基峰。方能测得很弱的苷元峰为基峰。 FD-MS、FAB-MS、ESI-MS（目前）：可测得分子离子峰（目前）：可测得分子离子峰 或准分子离子峰或准分子离子峰M+1、M+23等。等。EI-MS裂解规律裂解规律1分子离子峰为基峰分子离子峰为基峰 用于测定分子量。用于测定分子量。2主要碎片离子峰为裂解途径主要碎片离子峰为裂解途径I 产生的产生的A1和和B1母核确定及裂解途径母核确定及裂解途径II产生的产生的 B2+ A、B-环取代情况确定环取代情况确定 MS在黄酮类化合物结构研究中的应用在黄酮类化合物结构研究