移液管和加样枪的使用

1、精选ppt生物化学课程网站生物化学课程网站 访问路径访问路径:“:“三峡大学三峡大学”-“-“求索学堂求索学堂”-“-“课程课程总揽总揽”-“-“医学院医学院”-“-“生物化学与分子生物生物化学与分子生物学学”-“-“医用生物化学医用生物化学” 网站内有理论课和实验课的教学大纲、教案网站内有理论课和实验课的教学大纲、教案pptppt、习题和考试样卷等，根据需要下载学习习题和考试样卷等，根据需要下载学习精选ppt生化实验室规章制度和实验要求生化实验室规章制度和实验要求1. 1. 准时到实验室，不迟到，不早退准时到实验室，不迟到，不早退。进入实验室须。进入实验室须穿实验服穿实验服。2. 2. 保持

2、环境的肃静，不高声说话，严禁用器械及动物开玩笑。保持环境的肃静，不高声说话，严禁用器械及动物开玩笑。3. 3. 严格按操作规程使用仪器，仪器发生故障、损坏、丢失时，应严格按操作规程使用仪器，仪器发生故障、损坏、丢失时，应立即报告老师，立即报告老师，凡违反操作规程而损坏仪器者，要追究责任。凡违反操作规程而损坏仪器者，要追究责任。4. 4. 认真观察实验现象并记录好原始数据；节约试剂，节约水电。认真观察实验现象并记录好原始数据；节约试剂，节约水电。5. 5. 实验完毕，洗净所用器材，合理处理固体舍弃物和废液。经指实验完毕，洗净所用器材，合理处理固体舍弃物和废液。经指导教师同意，方能离开实验室。导教

3、师同意，方能离开实验室。6. 6. 值日生负责实验室卫生，关好水、电、门窗，经教师检查后方值日生负责实验室卫生，关好水、电、门窗，经教师检查后方可离开。可离开。精选ppt试剂使用试剂使用1. 1. 仔细辨认标签，确定所需试剂及浓度。仔细辨认标签，确定所需试剂及浓度。2. 2. 吸量管与所需试剂号码务必对准。吸量管与所需试剂号码务必对准。3. 3. 用后盖好瓶盖，归还原处，以免影响他人使用。用后盖好瓶盖，归还原处，以免影响他人使用。精选ppt本学期实验内容本学期实验内容1刻度吸管、可调式移液器的校正与误差分析刻度吸管、可调式移液器的校正与误差分析 -教师讲解教师讲解2分光光度法测定物质的浓度分光

4、光度法测定物质的浓度 -教师讲解教师讲解3血清碱性磷酸酶活性测定：血清碱性磷酸酶活性测定：1、2、3组讲演组讲演4血红蛋白与核黄素的凝胶层析分离：血红蛋白与核黄素的凝胶层析分离：4、5、6组讲演组讲演5 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳：血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳：1、2、36酶的竞争性抑制：酶的竞争性抑制：4、5、67血糖测定：血糖测定：1、2、38血清谷丙转氨酶血清谷丙转氨酶(GPT)活性测定：活性测定：4、5、69质粒质粒DNA的提取：的提取：1、2、310DNA的琼脂糖凝胶电泳分析：的琼脂糖凝胶电泳分析：4、5、6,实验总结：实验总结：1-6组组精选ppt实验课教学改革实验课教学改革 改

5、革方案：前改革方案：前2次实验由老师讲解，次实验由老师讲解，从第从第3次实验开始次实验开始，同同学们参与实验教学，担任学们参与实验教学，担任“小老师小老师”，具体安排如下：，具体安排如下： 本实验室共分为本实验室共分为6个小组，每组个小组，每组45人，各组推选人，各组推选1名组长；名组长； 第第3个实验，由个实验，由1、2、3组组各自准备与本次实验内容相关的各自准备与本次实验内容相关的ppt，并并各选派各选派1位同学讲演位同学讲演，每位同学讲演时间，每位同学讲演时间1012分钟，讲演结束分钟，讲演结束后为自由提问、讨论和老师点评时间（后为自由提问、讨论和老师点评时间（30分钟）；分钟）； 第第

6、4个实验，由个实验，由4、5、6组组进行进行ppt准备和发言，方法同上；准备和发言，方法同上； 第第5-10个实验依次类推；个实验依次类推； 注意：每次的注意：每次的ppt准备需全小组同学共同参与，但由小组内的不同准备需全小组同学共同参与，但由小组内的不同同学发言，做到每个同学都有发言机会；同学发言，做到每个同学都有发言机会； ppt 制作制作（包括材料的收集准备、内容的条理性和演示效果等）（包括材料的收集准备、内容的条理性和演示效果等）、每个同学的讲演每个同学的讲演（内容的熟悉程度、讲解的条例性、对同学问（内容的熟悉程度、讲解的条例性、对同学问题的回答情况）、题的回答情况）、回答问题、团队合

7、作都将计入实验成绩回答问题、团队合作都将计入实验成绩。精选ppt实验成绩计算方法实验成绩计算方法 实验成绩占生化总成绩的实验成绩占生化总成绩的35% 实验成绩实验成绩 考勤：考勤：10% 实验报告：实验报告：20% 操作：操作：30% ppt 制作、讲演、回答问题情况：制作、讲演、回答问题情况：40% 自评：自评：每次讲演完后，各组评出自己组内的每次讲演完后，各组评出自己组内的前两名前两名 互评：互评：非讲演组（如非讲演组（如4、5、6组）给讲演组（如组）给讲演组（如1、2、3组）分组）分别从别从ppt制作、讲演、回答问题、团队合作方面进行制作、讲演、回答问题、团队合作方面进行排序排序 教师评

8、价：教师评价：教师从教师从ppt制作、讲演、回答问题、团队合作等方面制作、讲演、回答问题、团队合作等方面对讲演组进行评价，提出表扬和改进意见等对讲演组进行评价，提出表扬和改进意见等精选ppt实验评分标准实验评分标准 考勤：考勤： 迟到扣迟到扣10分；旷课为分；旷课为0分分 操作：操作： 不穿白大褂，不穿白大褂，-10分分 不带实验教材，不带实验教材，-10分分 没有预先预习实验，没有预先预习实验，-10分分 实验操作不规范，实验操作不规范，-5分分 过失造成玻璃器皿损坏，过失造成玻璃器皿损坏，-5分分 过失造成仪器损坏，过失造成仪器损坏，-10分分 没有清洗玻璃器皿和还原仪器，没有清洗玻璃器皿

9、和还原仪器，-10分分 没做清洁，没做清洁，-10分分 实验报告实验报告: : 没有实验目的，没有实验目的，-5 -5分分 没有实验原理，没有实验原理，- 5- 5分分没有实验过程，没有实验过程，-10-10分分涂改实验数据，涂改实验数据，-20-20分分没有分析与实验讨论，没有分析与实验讨论，-15-15分分没有报告临床意义，没有报告临床意义，-5 -5分分精选ppt刻度吸管刻度吸管&微量可调式移液微量可调式移液器的使用、校正与数据处理器的使用、校正与数据处理彭帆彭帆E-mail: Tel:ffice tel:选ppt实验目的实验

10、目的 清楚生物化学清楚生物化学实验室规章制度和实验要求实验室规章制度和实验要求 掌握掌握刻度吸管的分类和使用方法刻度吸管的分类和使用方法 掌握掌握微量可调式移液器的原理和使用方法微量可调式移液器的原理和使用方法，了解可调式移液器的校正方法了解可调式移液器的校正方法 建立建立实验误差、准确度和精确度实验误差、准确度和精确度的概念，掌的概念，掌握误差分析计算方法握误差分析计算方法精选ppt问题：将溶液从一容器转移到另一个容器。用问题：将溶液从一容器转移到另一个容器。用什么量具？如何确定容量？是否精准？什么量具？如何确定容量？是否精准？精选ppt一、刻度吸管一、刻度吸管(pipette)的分类和操作

11、的分类和操作 分类分类：10mL, 5mL, 2mL, 1mL, 0.5mL, 0.2mL, 0.1mL(吹吹?) 精选ppt 刻度吸管的操作方法刻度吸管的操作方法1 1使用前：使用前： 检查刻度吸管是否配套。检查刻度吸管是否配套。2 2吸液：吸液： 排排插插吸吸按按3 3调节液面：放调节液面：放靠靠4 4放出溶液：靠放出溶液：靠放放停；停；* *若吸管上标有若吸管上标有“吹吹”，则需将管内残余液体吹出。，则需将管内残余液体吹出。 精选ppt工欲善其事，必先利其器工欲善其事，必先利其器微量可调式移液器微量可调式移液器(俗称俗称“加样枪加样枪”)的构造和操作的构造和操作 5 mL移液器移液器 (

12、1-5 mL) 1 mL移液器移液器 (200-1000 uL) 200 uL移液器移液器 (20-200 uL) 100 uL移液器移液器 (20-100 uL) 10 uL移液器移液器 (0.5-10 uL) 2 uL移液器移液器 (0.1-2 uL)精选ppt微量可调式移液器的构造微量可调式移液器的构造扭动转轴，可调整移液器容量扭动转轴，可调整移液器容量 手指把手手指把手 吸头的排出器吸头的排出器 容量指示窗口容量指示窗口吸头排出器套筒吸头排出器套筒 吸头圆锥体吸头圆锥体 精选ppt加样枪的操作方法加样枪的操作方法1. 1.容量调节：选定加样枪，调定所需容量读数。容量调节：选定加样枪，调

13、定所需容量读数。* * 请勿将按钮旋出量程以外！请勿将按钮旋出量程以外！2. 枪头装配枪头装配: 将加样枪垂直插入枪头中，将加样枪垂直插入枪头中，稍用力左右转动使其紧密结合。稍用力左右转动使其紧密结合。* * 请勿使劲敲击枪头盒请勿使劲敲击枪头盒！精选ppt4放出溶液：放出溶液：按按1st 按按2nd 松松 3. 吸液：吸液：按按1st插插松松靠靠 (a) Start Dispensing (b) 1st Stop = Dispense(c) 2nd Stop = Expel5弃去枪头：弃去枪头：按排按排精选ppt注意事项注意事项 加样枪的正确放置加样枪的正确放置 当加样枪的枪头里有液体时，应

14、垂直放置加样枪。当加样枪的枪头里有液体时，应垂直放置加样枪。 维护保养维护保养 不使用时，把加样枪的量程调至最大刻度；不使用时，把加样枪的量程调至最大刻度； 定期清洗移液枪定期清洗移液枪 (肥皂水或肥皂水或60异丙醇异丙醇 + 蒸馏水蒸馏水+自然晾干自然晾干)； 重复称量蒸馏水进行校准，环境温度为重复称量蒸馏水进行校准，环境温度为20-25。精选ppt问题问题 获得实验数据后，所得数据是否准确？可获得实验数据后，所得数据是否准确？可靠性如何？如何正确记录与处理实验数据靠性如何？如何正确记录与处理实验数据？ 精选ppt三、实验结果的数据处理三、实验结果的数据处理 准确度准确度: 分析结果与真值的

15、接近程度分析结果与真值的接近程度, 用误差表示用误差表示. 误差误差: 测定结果测定结果(X)与真实值与真实值(XT)之间的差值之间的差值. 系统误差系统误差: 偶然误差偶然误差: 绝对误差绝对误差(Absolute error): E=X-XT 相对误差相对误差(Relative error): 100%rTEEX 准确度与误差准确度与误差 (Accuracy & Error)精选ppt 系统误差系统误差: 由于分析过程中某些固定的原因造成的误差由于分析过程中某些固定的原因造成的误差.1.性质性质：（1）单向性、重复性单向性、重复性 （2）与测定次数无关）与测定次数无关 （3）可以校

16、正，大小、正负可以测定）可以校正，大小、正负可以测定2.产生原因产生原因：（1）方法误差）方法误差 （2）仪器和试剂误差）仪器和试剂误差 （3）操作误差）操作误差 （4）主观误差）主观误差3.校正校正：改变方法，校正仪器，采用高等级试剂等。改变方法，校正仪器，采用高等级试剂等。精选ppt 偶然误差偶然误差 1、性质性质:（1）大小可变）大小可变 （2）方向不定，有时正、有时负。）方向不定，有时正、有时负。 （3）只能减小，不能消除。）只能减小，不能消除。 2、产生原因产生原因： 温度、气压、湿度、仪器性能、人为的终点判断的变化等。温度、气压、湿度、仪器性能、人为的终点判断的变化等。 3、校正校

17、正：不能消除，只有：不能消除，只有增加平行实验次数增加平行实验次数.精选ppt 精密度与偏差精密度与偏差 (Precision & Deviation) 精密度精密度: :在相同条件下在相同条件下, ,各次分析结果间的接近程度，用偏差表示各次分析结果间的接近程度，用偏差表示. . 偏差偏差: : 测定结果测定结果( (X) )与与平均值平均值( )( )之间的差值之间的差值. .偏差小偏差小, ,表示数据集中表示数据集中, ,精密度高精密度高; ;反之反之, ,数据分散数据分散, ,精密度低精密度低. .偶然误差影响分析结果的精密度偶然误差影响分析结果的精密度. .X绝对偏差绝对偏差(

18、Absolute deviation, di) ： di=单个测量值单个测量值(Xi)-平均值平均值( )相对偏差相对偏差(Relative deviation, dr) ： 均值均值: X= nxxxn 21X100%irddX精选ppt 标准偏差标准偏差(Standard deviation，SD or S) 相对标准偏差相对标准偏差(Relative Standard Deviation,RSD)，又称，又称变异变异系数系数(Coefficient of Variation ,CV) %100XSCV精选pptBoth accurate and precisePrecise but no

19、t accurateNeither accurate nor precise精选ppt问题问题 当你把微量可调式移液器容量设定在当你把微量可调式移液器容量设定在100ul并把液体从试剂瓶转移到了试管。你是否并把液体从试剂瓶转移到了试管。你是否确定所转移的液体体积就是确定所转移的液体体积就是100ul？ 如果所转移的液体体积与标示量不符，如如果所转移的液体体积与标示量不符，如何校正？何校正？精选ppt 体积体积准确度准确度（平均误差）（平均误差）精确度精确度（重现性）（重现性）ul误差（误差（uL）误差（）误差（）S.D.（uL） R.S.D.（uL）P2020.15.00.031.550.12

20、.00.040.80100.11.00.050.50200.21.00.060.30P100200.351.80.100.5500.400.80.120.241000.800.80.150.15P200500.51.00.200.401000.80.80.250.252001.60.80.300.15P100020031.50.601.3050040.81.00.20100080.81.50.15移液器的准确度与精确度移液器的准确度与精确度精选ppt微量可调式移液器系统误差的校正微量可调式移液器系统误差的校正 校准方法校准方法 ？ 必须考虑的环境与仪器的影响因素？必须考虑的环境与仪器的影响因素

21、？温度、湿度、天平的精度、水的纯度等温度、湿度、天平的精度、水的纯度等 如何消除偶然误差的影响？如何消除偶然误差的影响？精选ppt实验步骤实验步骤 一、一、刻度吸管的操作刻度吸管的操作： 选择选择5mL、2mL的刻度吸管，按照教师要求，把相应体积的刻度吸管，按照教师要求，把相应体积的的ddH2O移取到烧杯中，称重。重复该步骤移取到烧杯中，称重。重复该步骤3次。次。二、二、微量可调式移液器的操作微量可调式移液器的操作：选择选择1000 L、200 L的微量可调式移液器，按照教师要求，的微量可调式移液器，按照教师要求，把相应体积的把相应体积的ddH2O移取到烧杯中，称重。重复该步骤移取到烧杯中，称重。重复该步骤3次。次。精选ppt实验结果实验结果刻度吸管刻度吸管真值真值(mL)次数次数123456测量值测量值(g)计算体计