experiment霉菌形态观察

1、一、目的要求 1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 2. 了解四类常见霉菌的基本形态特征。了解四类常见霉菌的基本形态特征。 二、基本原理（1）u霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多霉菌菌

2、丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约（约 310m ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。倍，因此，用低倍显微镜即可观察。u观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本节课用载玻片培养观察法。本节课用载玻片培养观察法。 二、基本原理（2）u载玻片培养观察法：载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

3、培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。 三、实验器材1. 菌种 曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) 和毛霉（ Mucor sp. ）培养 25d 的马铃薯琼脂平板培养物。 2. 培养基 土豆琼脂或察氏琼脂。 3. 仪器或其他用具 无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片， U 型玻棒，解剖针，解剖刀，镊子， 50% 乙醇， 20% 的甘油以及显微镜等。 四、操作步骤载玻片培养观察法 u培养小室的灭菌 在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一 U 形玻棒，其上放一洁

4、净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于 121 灭菌 30min ，烘干备用。 u琼脂块的制作 取已灭菌的马铃薯琼脂 培养基 67ml 注入另一灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成 0.5 1cm 2 的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块 )。（注：制作过程应注意制作过程应注意无菌操作无菌操作 。） u接种 用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。（注：接种量要少，尽可能将分散的（注：接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察 。）。

5、） u培养 先在平皿的滤纸上加 3 5ml 灭菌的 20 甘油（用于保持平（用于保持平皿内的湿度皿内的湿度 ) ，盖上皿盖， 28 培养一周。 u镜检 根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。 五、实验报告 1. 结果结果 绘图说明四种霉菌的形态特征。绘图说明四种霉菌的形态特征。 2. 思考题思考题 （ 1 ） 你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌菌 （ 2 ） 你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵母菌你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵母菌和和 霉菌的主要区别是什么霉菌的主要区别是什么 ？曲霉图片曲霉图片24h24h曲霉曲

6、霉曲霉图片曲霉图片24h24h曲霉足细胞曲霉足细胞 曲霉图片曲霉图片根霉图片（根霉图片（1 1）根霉图片（根霉图片（2 2）根霉图片（根霉图片（3 3）根霉图片（根霉图片（4 4）青霉图片（青霉图片（1 1）青霉图片（青霉图片（2 2）青霉图片（青霉图片（3 3）青霉图片（青霉图片（4 4）青霉图片（青霉图片（5 5）毛霉图片（毛霉图片（1 1）毛霉图片（毛霉图片（2 2） 四、操作步骤载玻片培养观察法 u培养小室的灭菌 在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一 U 形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于 121 灭菌 30min ，烘干备用。 u琼脂块的制作 取已灭菌的马铃薯琼脂 培养基 67ml 注入另一灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成 0.5 1cm 2 的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块 )。（注：制作过程应注意制作过程应注意无菌操作无菌操作 。） u接种 用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。（注：接种量要少，尽可能将分散的（注：接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察 。）。） u培养 先在平皿的滤纸上加 3 5ml 灭菌的 20 甘油（