T淋巴细胞结果的解读

1、淋巴细胞分化图淋巴细胞分化图u按按T T细胞所处的活化阶段细胞所处的活化阶段 初始T细胞（naive T cell） 效应T细胞（effector T cell） 记忆性T细胞（memory T cell）u按按T T细胞表面受体（细胞表面受体（TCRTCR）分类分类 + T细胞 + T细胞u按按T T细胞细胞CD4CD4和和CD8CD8分子表型分子表型 CD4+ T细胞细胞 CD8+ T细胞细胞 u按按T T细胞的功能分类细胞的功能分类 Th（辅助（辅助T细胞）细胞） TS（抑制（抑制T细胞）细胞） Tr（调节（调节T细胞）细胞）T T淋巴细胞的分类方法淋巴细胞的分类方法外周血中各亚群占淋巴

2、细胞总数的比例外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴细胞CD4T淋巴细胞CD8T淋巴细胞淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合合血液分析常规检测血液分析常规检测依据白细胞、淋巴细胞比例依据白细胞、淋巴细胞比例及计数绑定机体免疫状况，及计数绑定机体免疫状况，无法精确判断。无法精确判断。T T淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群比例检测比例检测临床常用，但较片面临床常用，但较片面T T淋巴细胞亚群数量淋巴细胞亚群数量观察免疫细胞数值变化，评估观察免疫细胞数值变化，评估免疫状况，通常采用流式细胞免疫状况，通常采用流式细胞仪法，特别针对仪法

3、，特别针对CD4CD4的检测，已的检测，已成为成为“金标准金标准”。功能、数量、比功能、数量、比例结合例结合更精确评估机体免更精确评估机体免疫状态疫状态1234目前临床主要可以做以下项目的检测目前临床主要可以做以下项目的检测 淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例和计数 T细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值） MHLA-DR（单核细胞HLA-DR) CD4CD25Treg（调节细胞）及Th17细胞（我们工作）目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目项项 目目百分含量百分含量（%淋巴淋巴细胞）细胞）Total B lymphocyte (CD19+) 5-18%NK c

4、ell (CD3-/CD16+56+) 7-40%Total T lymphocyte (CD3+) 50-84%T helper/inducer cell (CD3+/CD4+) 27-51%T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+) 15-44%CD4/CD80.71-2.78(BD)(BD)健康中国人参考范围健康中国人参考范围项项 目目百分含量百分含量（% T淋巴细淋巴细胞）胞）绝对含量绝对含量（cells/ L）Total T lymphocyte (CD3+)770-2041Thelper/inducer cell (CD3+/CD4+/CD8-)3

5、4-70%414-1123Tsupressor/cytotoxic cell (CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8+ cell0.5-4.0%6-56CD4+CD4+、 CD8+ TCD8+ T淋巴细胞的计数方法一淋巴细胞的计数方法一（FCM)FCM) 取取100l100l全血，加三种不同荧光素全血，加三种不同荧光素标记的鼠抗人标记的鼠抗人CD3CD3、CD4CD4、CD8McAbCD8McAb，阴性对照。阴性对照。 加红细胞裂解液，溶血，离心，弃加红细胞裂解液，溶血，离心，弃上清。上清。 用用PBSPBS洗洗1 1次，次，PBSPBS重悬细胞，上机重

6、悬细胞，上机检测。检测。 FCMFCM分析分析 电子计算机自动计算出电子计算机自动计算出阳性细胞百分率及总细胞计数。阳性细胞百分率及总细胞计数。简单、快速、相对精确简单、快速、相对精确 CD3+T细胞正常范围为：50-84% CD4+T细胞正常范围为： 27-51% CD8+T细胞正常范围为： 15-44% CD19+B细胞正常范围为：5-18% 与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。CD4TCD4T淋巴细胞的计数方法二（推淋巴细胞的计数方法二（推算）算）不精确、繁琐不精确、繁琐省钱省钱举例如下举例如下患者血常规中淋巴细胞计数为患者血常规中淋巴细

7、胞计数为0.63 0.63 109 /L,109 /L,淋巴细胞比例测定结果淋巴细胞比例测定结果CD3 CD3 为为64.9%,CD464.9%,CD4为为32.5%,CD832.5%,CD8为为31.1%31.1%CD3CD3细胞计数为细胞计数为0.630.6310109 9/L/L64.9%0.41 64.9%0.41 10109 9 /L /LCD4CD4细胞计数为细胞计数为0.630.63109/L109/L32.5%0.20 32.5%0.20 10109 9 /L /LCD8CD8细胞计数为细胞计数为0.630.63109/L109/L31.1%0.19 31.1%0.19 101

8、09 9 /L /L推推算算单核细胞人类白细胞抗原单核细胞人类白细胞抗原DRDR（ CD14/HLA-DRCD14/HLA-DR） CD14CD14为为LPSLPS复合物受体复合物受体, ,主要分布在单核细胞，主要分布在单核细胞，HLA-DRHLA-DR为活化标志。为活化标志。 CD14/HLA-DRCD14/HLA-DR可反映人体细胞免疫功能，可反映人体细胞免疫功能，30%30%提示免疫麻痹。也有人认为提示免疫麻痹。也有人认为HLA-DRHLA-DR浓度如果连续两天浓度如果连续两天低于低于8000AB/C8000AB/C可认为存在可认为存在免疫麻痹免疫麻痹。 广泛应用于临床。广泛应用于临床。

9、T T淋巴细胞亚群研究淋巴细胞亚群研究研究逐年增多研究逐年增多淋巴细胞亚群变化的常见临床意义淋巴细胞亚群变化的常见临床意义 CD4CD4淋巴细胞减少：淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者应用免疫抑制剂的患者 CD8CD8淋巴细胞增多：淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLESLE）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等 CD4CD4CD8CD8比值异常：比值异常： 比值降低：比值降低：一般被称为一般被称为“免

10、疫抑制免疫抑制”状态，常见于免疫缺陷病、恶状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等性肿瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等 比值增高：比值增高：表明细胞免疫功能处于表明细胞免疫功能处于“过度活跃过度活跃”状态，容易出现自状态，容易出现自体免疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后体免疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排异反应较移植前明显增加，则可能发生排异反应14The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammat

11、ory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.脓毒症休克期存在免疫麻痹脓毒症休克期存在免疫麻痹存在免疫麻痹的存在免疫麻痹的SepticSeptic患者死亡率大大增加患者死亡率大大增加100100名名septicseptic患者患者28天死亡无免疫麻痹无免疫麻痹免疫麻痹免疫麻痹脓毒症休克患者脓毒症休克患者T T淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱存活与死亡存活与死亡SepticSeptic中中T T淋巴细胞亚群的变化淋

12、巴细胞亚群的变化一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究Injury, Int. J. Care Injured (2007) 38, 13461357严重多发伤患者免疫细胞的变化特点严重多发伤患者免疫细胞的变化特点CD4/CD8降低降低MHLA-DR降低降低T细胞及单核细胞细胞及单核细胞凋亡增加凋亡增加烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点n烧伤患者白细胞低于正常组烧伤患者白细胞低于正常组n早期早期CD3CD3、CD4CD4、CD8CD8细胞计数细胞计数 均明显下降。均明显下降。nHLA-DRHLA

13、-DR表达降低。表达降低。nCD4/CD8CD4/CD8比值下降。比值下降。CD4T细胞亚群新分类：细胞亚群新分类：Th1 、Th2 、Treg 、Th17我们的研究我们的研究抗炎细胞抗炎细胞TregTreg及其分泌的抗炎介质及其分泌的抗炎介质IL-10IL-10；促炎细胞；促炎细胞Th17Th17及分泌的促炎介质及分泌的促炎介质IL-17IL-17、IL-6IL-6在人体的炎性免疫稳态中在人体的炎性免疫稳态中发挥重要作用。发挥重要作用。22中国呼吸与危重监护杂志中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.结论一：脓毒症患者中结论一：脓毒症患者中TregTreg明显升

14、高，明显升高，表明抗炎反应的增强表明抗炎反应的增强23 结论二：结论二：在脓毒症患者中在脓毒症患者中Th17表达明显升高表达明显升高吴铁军吴铁军,亢翠翠亢翠翠, 中华急诊医学杂志中华急诊医学杂志, 2012, 21(04): 378-380.脓毒症组对照组脓毒症患者中脓毒症患者中Th17Th17表达明显升高，表达明显升高，提示促炎反应的增强。提示促炎反应的增强。24重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡淋巴细胞淋巴细胞Ag-NoR在健康组中的表达在健康组中的表达 淋巴细胞淋巴细胞Ag-NoR在在Sepsis组中的表达组中的表达吴铁军，张丽娜吴铁军，张丽

15、娜 中国呼吸与危重监护杂志中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.脓毒症组对照组重症脓毒症患者存在免疫麻痹重症脓毒症患者存在免疫麻痹中国急救医学杂志中国急救医学杂志, 2011, 31(9): 836-838.CD14+单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR) 表达情况对照组脓毒症组26T T淋巴细胞亚群的研究越来越多淋巴细胞亚群的研究越来越多某种某种T T细胞亚群过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，细胞亚群过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，主要用于了解恶性肿瘤、免疫缺陷、重症病毒感染、自主要用于了解恶性肿瘤、免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫病等患者机体的免

16、疫功能是处于什么状态。身免疫病等患者机体的免疫功能是处于什么状态。 T T细胞亚群的表达受多种因素影响细胞亚群的表达受多种因素影响 常常“变幻莫测变幻莫测”，因，因此此T T细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态，连细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态，连续动态监测更有意义。续动态监测更有意义。严重脓毒症存在免疫紊乱，严重脓毒症存在免疫紊乱，T T淋巴细胞的凋亡，与预后有淋巴细胞的凋亡，与预后有一定关系。创伤等应激状态同样导致免疫紊乱。一定关系。创伤等应激状态同样导致免疫紊乱。总结总结目前临床主要可以做以下项目的检测目前临床主要可以做以下项目的检测 淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例

17、和计数 T细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值） MHLA-DR（单核细胞HLA-DR) CD4CD25Treg（调节细胞）及Th17细胞（我们工作）目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目CD4+CD4+、 CD8+ TCD8+ T淋巴细胞的计数方法一淋巴细胞的计数方法一（FCM)FCM) 取取100l100l全血，加三种不同荧光素全血，加三种不同荧光素标记的鼠抗人标记的鼠抗人CD3CD3、CD4CD4、CD8McAbCD8McAb，阴性对照。阴性对照。 加红细胞裂解液，溶血，离心，弃加红细胞裂解液，溶血，离心，弃上清。上清。 用用PBSPBS洗洗1 1次，次，P

18、BSPBS重悬细胞，上机重悬细胞，上机检测。检测。 FCMFCM分析分析 电子计算机自动计算出电子计算机自动计算出阳性细胞百分率及总细胞计数。阳性细胞百分率及总细胞计数。简单、快速、相对精确简单、快速、相对精确 CD3+T细胞正常范围为：50-84% CD4+T细胞正常范围为： 27-51% CD8+T细胞正常范围为： 15-44% CD19+B细胞正常范围为：5-18% 与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。CD4TCD4T淋巴细胞的计数方法二（推淋巴细胞的计数方法二（推算）算）不精确、繁琐不精确、繁琐省钱省钱举例如下举例如下32The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after di