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文档简介
1、实验三酶的基本性质实验三 酶的基本性质(P85)实验三酶的基本性质n酶的定义:酶的定义: 是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的生物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在生物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在酶催化下进行的。酶催化下进行的。n酶的特点:酶的特点: 酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等特性特性 。n温度、温度、pHpH值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。实验三酶的基本性质一、目的一、目的n通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性,了解温通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性,了
2、解温度对酶活性的影响,明确最适温度的概念;度对酶活性的影响,明确最适温度的概念;n了解了解pHpH值对酶活力的影响,学习测定最适值对酶活力的影响,学习测定最适pHpH值的值的方法;方法;n了解激活剂、抑制剂对酶活性的影响,学习检定了解激活剂、抑制剂对酶活性的影响,学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。实验三酶的基本性质二、原理二、原理n酶的催化作用受温度的影响很大酶的催化作用受温度的影响很大n提高温度可以增加酶促反应的速提高温度可以增加酶促反应的速度。通常温度每升高度。通常温度每升高1010摄氏度,摄氏度,反应速度加快一倍左右,最后反反应速度加快一
3、倍左右,最后反应速度达到最大值。应速度达到最大值。n酶是一种蛋白质,温度过高可引酶是一种蛋白质,温度过高可引起蛋白质变性,导致酶的失活。起蛋白质变性,导致酶的失活。因此,反应速度达到最大值以后,因此,反应速度达到最大值以后,随着温度升高,反应速度反而逐随着温度升高,反应速度反而逐渐下降,以至完全停止反应。渐下降,以至完全停止反应。n反应速度达到最大值时的温度称反应速度达到最大值时的温度称为某种酶作用的最适温度。为某种酶作用的最适温度。高于高于或低于最适温度时,反应速度逐或低于最适温度时,反应速度逐渐降低。渐降低。102030405060708090020406080100Tem peratur
4、e OCRelative Activity (%)最适温度最适温度(一)温度对酶活性的影响(一)温度对酶活性的影响实验三酶的基本性质二、原理二、原理n酶的活性受环境酶的活性受环境pHpH的影响极为显著。的影响极为显著。n通常各种酶只有在一定的通常各种酶只有在一定的pHpH范围内才表现它的活性。范围内才表现它的活性。一种酶一种酶表现其活性最高时的表现其活性最高时的pHpH值,称为该酶的最适值,称为该酶的最适pHpH。低于或高于低于或高于最适最适pHpH时,酶的活性逐渐降低。时,酶的活性逐渐降低。n不同酶的最适不同酶的最适pHpH值不同,例如,胃蛋白酶的最适值不同,例如,胃蛋白酶的最适pHpH为为
5、1.5-1.5-2.52.5,胰蛋白酶的最适,胰蛋白酶的最适pHpH为为8 8等。等。 (二)(二)pHpH对酶活性的影响对酶活性的影响实验三酶的基本性质n酶的活性常受某些物质的影响。酶的活性常受某些物质的影响。n有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂;有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂;n有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。例如,例如,氯化钠氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂,为唾液淀粉酶的激活剂,硫酸铜硫酸铜为其抑为其抑制剂。制剂。n很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有特异性。特
6、异性。n激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。酶的激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。例如,氯化钠达到例如,氯化钠达到1/31/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。活性。 二、原理二、原理(三)酶的激活和抑制(三)酶的激活和抑制实验三酶的基本性质二、原理二、原理 本实验分别在不同温度、不同本实验分别在不同温度、不同pHpH值及不同物质作用的值及不同物质作用的条件下使淀粉酶作用于其底物条件下使淀粉酶作用于其底物淀粉,并用碘液检查酶淀粉,并用碘液检查酶促淀粉水解程度
7、来说明各条件与酶活力之间的关系。促淀粉水解程度来说明各条件与酶活力之间的关系。淀粉淀粉糊精糊精麦芽糖麦芽糖淀粉酶淀粉酶淀粉酶淀粉酶大大小小中中碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液蓝色蓝色蓝紫色蓝紫色暗褐色暗褐色红色红色碘色碘色实验三酶的基本性质三、仪器和试剂三、仪器和试剂n仪器仪器移液管、吸耳球、试管、试管架、恒温水浴锅、胶头滴管、白瓷反应盘n试剂试剂1%淀粉溶液(含0.3%NaCl),0.1%淀粉溶液,唾液淀粉酶液,pH7.0、8.0、5.0的磷酸缓冲液(PB),碘液,1%NaCl,1%CuSO4,蒸馏水(dH2O)实验三酶的基本性质四、实验方法四、实验方法n(一)温度对酶活性的影响(一
8、)温度对酶活性的影响操作项目操作项目管号管号1 12 23 3唾液淀粉酶液(唾液淀粉酶液(mLmL)1 11 11 1酶液处理酶液处理5min5min003737100100pH7.0pH7.0缓冲液(缓冲液(mLmL)2 22 22 21%1%淀粉液(含淀粉液(含0.3%NaCl0.3%NaCl)()(mLmL)1 11 11 1反应反应10min10min003737100100冷却冷却3min3min流动水冷却流动水冷却碘液(滴)碘液(滴)1 11 11 1实验三酶的基本性质四、实验方法四、实验方法n(二)(二)pHpH值对酶活性的影响值对酶活性的影响操作项目操作项目管号管号1 12 2
9、3 3pH5.0pH5.0缓冲液(缓冲液(mLmL)3 3/ / /pH7.0pH7.0缓冲液(缓冲液(mLmL)/ /3 3/ /pH8.0pH8.0缓冲液(缓冲液(mLmL)/ / /3 31%1%淀粉液(含淀粉液(含0.3%NaCl0.3%NaCl)()(mLmL)1 11 11 1淀粉酶液(淀粉酶液(mLmL)1 11 11 1保温保温将各管混匀将各管混匀37 37 水浴中保温水浴中保温检查淀粉水解程度检查淀粉水解程度保温保温2min2min后,从后,从2 2号试管中取出号试管中取出1 1滴溶液置于白磁盘上,用碘液检滴溶液置于白磁盘上,用碘液检查淀粉的水解程度查淀粉的水解程度碘液(滴)
10、碘液(滴)1 11 11 1实验三酶的基本性质四、实验方法四、实验方法n(三)酶的激活和抑制(三)酶的激活和抑制操作项目操作项目管号管号1 12 23 31%NaCl1%NaCl(mLmL)1 1/ / /1%CuSO1%CuSO4 4(mLmL)/ /1 1/ /蒸馏水(蒸馏水(mLmL)/ / /1 1淀粉酶液(淀粉酶液(mLmL)1 11 11 10.1%0.1%淀粉液(淀粉液(mLmL)3 33 33 3保温保温将各管混匀将各管混匀37 37 水浴中保温水浴中保温检查淀粉水解程度检查淀粉水解程度保温保温1min1min后,从后,从1 1号试管中取出号试管中取出1 1滴溶液置于白磁盘上,用碘液检滴溶液置于白磁盘上,用碘液检查淀粉的水解程度查淀粉的水解程度碘液(滴)碘液(滴)2 22 22 2实验三酶的基本性质五、结果与分析五、结果与分析n(三
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