1DNA重组技术的基本工具

1、1.1 DNA重组技术的基本工具专题1 基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具课时训练1 DNA重组技术的基本工具1 .限制酶切割DNA时（）。A.专一识别特定的核甘酸序列B.切断的是碱基对之间的氢键C.任意切割，没有特定的核甘酸序列D.识别多种核甘酸序列，但切口只有一个解析:限制酶发挥作用时的特点是具有专一性，一种限制酶只能识别一种特定的核甘酸 序列。答案:A2 .属于 分子缝合针”的是（）。E coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 RNA聚合酶A.B.C.D.一答案:B3 .能催化磷酸二酯键形成的酶有（）。E coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 DNA聚合

2、酶 解旋酶 RNA聚合酶 A.B.C.D.解析:DNA连接酶和DNA聚合酶都能催化形成磷酸二酯键，不同之处是DNA连接酶连 接的是DNA片段，而DNA聚合酶连接的是单个脱氧核甘酸，将单个脱氧核甘酸连接形成 与模板链互补的单链；RNA聚合酶也可催化磷酸二酯键的形成，在转录过程中可将单个 核糖核甘酸连接形成mRNA。解旋酶的作用是将DNA两条双链的氢键解开。答案:C4 .有关DNA重组技术中-的工具一一分子缝合针”分子手术刀”分子运输车”的组合正 确的是（）oDNA连接酶 DNA聚合酶 限制酶 RNA聚合酶 载体A.B.C.D.答案:C5 .下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（）0

3、一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核甘酸序列限制性核酸内切酶的活性受温度影响限制性核酸内切酶能识别和切割 RNA限制性核酸内切酶可 从原核生物中提取限制性核酸内切酶的操作对象是原核细胞A.B.C.D.答案:C6 .质粒是基因工程常用的载体，它的特点是（）。能自主复制不能复制结构简单单链DNA环状DNA含有标记 基因A.B.D.解析:在基因工程中，通常用质粒作为载体。质粒是裸露的、结构简单、独立于细菌拟 核DNA之外，并能自主复制的双链环状DNA分子。在质粒上有一个至多个限制酶切割 位点,供外源DNA片段插入其中，另外质粒上还有标记基因，如四环素抗性基因等。答案:A7 .下列关于限制酶的

4、说法，错误的是（）oA.限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的8 .不同的限制酶识别不同的核昔酸序列C.限制酶能识别特定的核昔酸序列，体现了酶的专一性D.限制酶的作用只是用来提取目的基因解析:限制酶的作用是在基因工程中提取目的基因和切割载体，切割目的基因和载体的 是同一种限制酶，从而产生相同的黏性末端或平末端,使它们能相互结合。答案:D8.水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly和Ser构成发光环，现将这种蛋白质 的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（）o A.促使目的基因导入宿主细胞中8 .促使目的基因在宿主细胞中复制C使含目的基因的受体细胞容易被检测出

5、来D.使目的基因容易成功表达答案:C线性D、A分子的酶切示意图9 .已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指。如果 该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度 的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位 点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后该DNA分子最多能产生长度不同的DNA片 段是（）oA.3种B.4种C.9种D.12 种解析:若3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段; 若在1个或2个酶切位点上被该酶切断，则会产生ab、abc、be、bcd>

6、 cd五种不同长度 的DNA片段。答案:C10.下图为DNA分子的切割和连接过程。D、A分子的切割和连接WEcoR I是一种 酶,其识别序列是，切割位点是 与 之间的 键。切割结果产生的DNA片段末端形式为。(2)不同来源的DNA片段结合,在这里需要的酶应是 ，此酶的作用是在 与 之间形成 键，而起 缝合”作用的。其中能连接平末端的连接酶解析:EcoRI是一种限制酶，从图中可以看出其识别序列是 GAATTC,切割位点,是鸟喋 吟脱氧核甘酸和腺喋吟脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键。切割后产生的DNA末端形式为黏性末端。要将不同来源的DNA片段连接起来，需要DNA连接酶，其作用是形成磷酸二 酯键而将两D

7、NA片段 缝合”起来。T4 DNA连接酶既可以 缝合.”黏性末端，也可以 缝 合”平末端。答案:(1)限制性核酸内切(限制)GAATTC鸟喋吟脱氧核甘酸腺喋吟脱氧核甘酸磷酸二酯黏性末端(2)E coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶 鸟喋吟脱氧核甘酸腺喋吟脱氧核甘酸 磷酸二酯 T4DNA连接酶11根据基因工程的有关知识，回答下列问题。(1)限制酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有 和。(2)质粒载体用EcoR I切割后产生的片段如下：AATTCGG CTTAA为使载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR I切割外，还可用另一种 限制酶切割该酶必须具有的特点是.(3)按其

8、来源不同，基因工程中所使用而DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和DNA连接酶。基因工程中除质粒外，和 也可作为载体。解析：(1)限制酶切割DNA分子后，露出的末端类型为黏性末端和平末端两种。(2)要想使 另一种限制酶切割并与之相连接，则需要的限制酶切割后的末端与 EcoR I切割后的末 端一致。(3)基因工程中使用的DNA连接酶有两种类型即T4DNA连接酶、E - coli DNA 连接酶。(4)基因工程中常用载体有质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒。答案:(1)黏性末端 平末端(2)切割产生的DNA片段末端与EcoR I切割产生的相同(3)E coli T4(4)入噬菌体的衍生物动植物病毒

9、12.在人类的遗传病中，有一种重症联合免疫缺陷病(简称SCID),患者因缺乏正常的人体 免疫功能，只要稍被细菌或病毒感染，就会发病死亡。经研究证实,SCID病人细胞的一个 常染色体上编码腺甘酸脱氨酶(简称ADA)的基因发生了突变。目前，人们已经找到了治 疗该疾病的方案。如图：(1)(多选)载体必须具备的条件是()。A.能在宿主细胞中复制并保存B.具有多个限制性核酸内切酶*切割位点，以便与外源基因连接C.具有标记基因 便于进行筛选D.是环状的DNA分子在图示过程中，所用到的基因操作工具分别(3)研究人员将ADA基因注入淋巴细胞，而不是其他细胞，其原因是:0解析:(1)载体是把目的基因导入受体细胞并使其复制、表达的工具，因此载体需具备以下条件:能在宿主细胞中复制并保存，以便于目的基因的复制与保存；具有多个限制性 核酸内切酶切割位点，以便与目的基因连接：具有标记基因，便于进行筛选。(2)构建基 因表达载体时，需用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体 ，再用DNA连接酶连