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文档简介
1、、课题目标1.知识目标a. 了解DNA的物理化学性质。专题5课题1DNA勺粗提取与鉴定b.理解DNA粗提取与鉴定的原理。2.能力目标a.掌握DNA粗提取及鉴定方法。b.利用DNA的性质进行实验设计和操作。3.情感目标通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。二、课题重点DNA的粗提取和鉴定方法。三、课题难点DNA的粗提取和鉴定方法。四教学流程学流程节二:讲授新课教师活动、基础知识1.提取DNA的方法通过介绍DNA的溶解性和DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,让学生体会提取DNA的方法。(1)DNA的溶解性不同浓度的NaCI溶液中溶解度让学生分析教材图
2、 5-1 “DNA在NaCI溶液中溶解度曲线,回答问题,理解DNA溶解度随NaCI溶液浓度的变化情况。学设生活动计意图阅了读、思解 DNA考、回的物理答。化学性质;理解 DNA粗提取与鉴定的原理。问题1.DNA在NaCI溶液中的溶解度如何变化?在NaCI溶液浓度低于 0.14 mol/L 时,DNA的溶解度随NaCI溶液浓度的增加而逐渐降低;在 0.14 mol/L 时,DNA溶解度最小;当 NaCI溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。问题2.如何通过控制NaCI溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?当氯化钠的物质的量浓度为2moI /L时,DNA的溶解度最大,浓度为0.14 mo
3、I /L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出。讲述:DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将 DNA与蛋白质进一步分离。(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性讲述DNA对蛋白酶、高温和洗涤剂的耐受性。蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080C的高温,而 DNA在 80 C以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。2.DNA的鉴定介绍DNA的鉴定方法。二苯胺染色法DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色甲基绿染色法甲基绿与DNA结合,呈绿色【典型例题】答。握 DNA粗提取下列有关“ DNA
4、粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是(A.B.C.D.)(多选)及鉴定新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破DNA不溶于95%的冷酒精而溶于 2mol/L的NaCI溶液溶有DNA的 NaCI溶液中加人二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观察颜色【答案】CD【方法点拨】1.新鲜猪血中大量成熟红细胞内无DNA2.植物材料需先用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁再吸水胀破3.DNA不溶于95%勺冷酒精而溶于 2moI/L的NaCI溶液二、实验设计讲述实验设计几个方面内容,再以动画形式展现以鸡血细胞为材料进行DNA的提取和鉴定。1.实验材料的选取(1 )选取原则D
5、NA含量丰富材料易得提取简便(2)选材鸡血细胞2.破碎细胞,获取含 DNA勺滤液(1)动物细胞加入蒸馏水,搅拌过滤后收集滤液(2 )植物细胞加入洗涤剂和食盐,搅拌研磨后过滤收集滤液3.去除滤液中的杂质问题1:滤液中的杂质可能有哪些细胞成分?核蛋白、多糖和 RNA等杂质展示三种方案,让学生分析回答问题。方案一:30mL含DNA的滤液+ 2moI/L NaCI同方向搅拌,DNA溶解加入蒸馏水7 DNA析出7过滤得到过滤物7放到2moI/LNaCI溶液中溶解7DNA-NaCI溶解液问题2 :为什么反复地溶解与析出DNA能够除去杂质?用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质;出,能除去在低盐溶液中的
6、杂质。答。设计。方法;用 DNA的性质进行实验设计作。用低盐浓度使 DNA析方案二:30mL滤液+嫩肉粉(木瓜蛋白酶)7静置1015分钟7 DNA滤液节三:课堂小结方案三:30mL滤液7 6075C恒温保温1015分钟过滤获得 DNA滤问题3 :方案二与方案三的原理有什么不同?方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白质,使提取的DNA与蛋白质分开;方案三是利用 DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,使蛋白质变性,与DNA分 离。4.DNA的析出与鉴定(1)析出:滤液+同体积冷却95%酒精7白色丝状物(2)溶解:将白色丝状物溶于 2mol/L的NaCI溶液中(3)鉴定:DNA+二苯胺7 蓝色物(沸水浴5分钟)【典型例题】F表有关“ DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂,相关操作选取的试剂A破碎鸡血细胞蒸馏水B溶解核内DNA2mol/LNaCl 溶液C提取杂质较少的DNA冷却的95%的酒精DDNA的鉴定双缩脲试剂【答案】D是( )【方法点拨】错误的1.可以利用DNA在氯化钠溶液中的溶解度不同,将DNA分子溶解或析出2.DNA不容易酒精,因此可以用95%勺冷酒精提取杂质较少的DNA三、操作提示讲解操作步骤注意事项。1.以鸡血为实验材料时,每100mL血液中需要加入 3g柠檬酸钠,防止血液凝固。2.加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生
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