YH-QMS-WI-332-A产品初始污染菌检测作业指导书

1、砂湖南佑华医疗用品有限公司初始污染菌检测作业指导书版权所有，注意保密YH-QMS-WI-332Rev A第1页共4页版本号修改日期修改内容描述A2020.3.16首次发布制定：审核：批准：签名签名签名砂湖南佑华医疗用品有限公司初始污染菌检测作业指导书版权所有，注意保密YH-QMS-WI-332Rev A第2页共4页1.0目的为了规范灭菌产品使用的原材料、产品初始污染菌的检验操作，确保原材料、产品灭菌前细菌数符合 标准要求。2.0范围本检验规程只适用于本公司产品、原材料的初始污染菌的检验操作。3.0职责质量法规部：微生物检验员负责原材料及产品灭菌前初始污染菌的检测。4.0操作方法4.1 产品初始

2、污染菌数：W 100cfu/件原材料初始污染菌：原材料外壳及导管、线材类：100cfu/件原材料包装袋类： 10cfu/cm 24.2 培养基及洗脱液制备配制一定量的胰酪大豆月东琼脂培养基（TSA）及沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA , 0.9%Nacl洗脱液，高压灭菌后备用。4.3 操作流程4.3.1 产品检验? 产品取样：1产品表面与患者直接接触或间接接触产品：取每批次样品10件，将样品浸入100ml0.9%Nacl 洗脱液中；2产品内部与患者直接接触或间接接触的产品：将100ml0.9%Nacl洗脱液注入产品内部；充分震荡，将滤液通过 0.45 m膜，微生物限度过滤系统抽滤，将滤膜一剪二，菌

3、面朝 上，分别贴于胰酪大豆陈琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养表面，倒置培养。? 空白对照：将100ml0.9%Nacl通过0.45 m膜，微生物限度过滤系统抽滤，将滤膜一剪 二，菌面朝上，分别贴于1块TSA培养基和1块SDA§养基表面，倒置培养。?TSA培养基皿放在 30-35 C培养箱倒置培养 3天。SDA培养基皿放在 20 C-25 c培养箱倒置培养5天。?将平板置于灯光下从平板的背面直接以肉眼用标记笔点计，仔细观察计数，必要时可借助放大镜、菌落计数器。（空白对照应无菌生长） 每件产品的初始污染菌总数=细菌平均数和霉菌平均数的总和砂湖南佑华医疗用品有限公司初始污染菌检测作业指导书版

4、权所有，注意保密YH-QMS-WI-332Rev A第3页共4页4.3.2 原材料检验4.3.2.1 原材料外壳及导管、线材类?取每批次原材料样品10件，按照样品大小与无菌取样袋（大袋、小袋）匹配度，可选择将样品浸入100ml或200ml0.9%Nacl洗脱液中充分震荡，将滤液通过0.45 m膜，微生物限度过滤系统抽滤，将滤膜一剪二，菌面朝上，分别贴于胰酪大豆陈琼脂培养基和 沙氏葡萄糖琼脂培养基表面，倒置培养。? 空白对照：将100ml0.9%Nacl通过0.45 m膜，微生物限度过滤系统抽滤，将滤膜一剪 二，菌面朝上，分别贴于 1块TSA培养基和1块SDA养基表面，倒置培养。? TSA培养基

5、皿放在 30-35 C培养箱倒置培养 3天。SDA培养基皿放在 20 C-25 c培养箱倒 置培养5天。?将平板置于灯光下从平板的背面直接以肉眼用标记笔点计，仔细观察计数，必要时可借助放大镜、菌落计数器。（空白对照应无菌生长）?每件原材料的初始污染菌总数=细菌平均数和霉菌平均数的总和4.3.2.2 原材料包装袋类?取每批次原材料样品10件，每件样品内或外表面选取25cm2大小的面积（使用采样板）内，用浸有灭菌生理盐水的棉签来回涂抹十次，将涂抹后的棉签头剪入10ml0.9%Nacl洗脱液中，充分震荡，吸取洗脱液1ml至微生物限度过滤系统，倒入100ml0.9%Nacl ,通过0.45科m膜抽滤，

6、将滤膜一剪二，菌面朝上，分别贴于胰酪大豆月东琼脂培养基和沙 氏葡萄糖琼脂培养基表面，倒置培养。? 空白对照：将100ml0.9%Nacl通过0.45 m膜，微生物限度过滤系统抽滤，将滤膜一剪 二，菌面朝上，分别贴于 1块TSA培养基和1块SDA养基表面，倒置培养。? TSA培养基皿放在 30-35 C培养箱倒置培养 3天。SDA培养基皿放在 20 C-25 c培养箱倒 置培养5天。?将平板置于灯光下从平板的背面直接以肉眼用标记笔点计，仔细观察计数，必要时可借助放大镜、菌落计数器。（空白对照应无菌生长）?每件原材料初始污染菌：每件产品菌落总数*稀释倍数菌数=取样面积（25cm2）砂湖南佑华医疗用品有限公司初始污染菌检测作业指导书版权所有，注意保密YH-QMS-WI-332Rev A第4页共4页5.0产品的修正系数：相